Untersuchung der humoralen Immunantwort gegen die variablen HIV-1-Neutralisationsepitope, den V2- und V3-Loop des viralen Hüllproteins gp120:
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| Format: | Abschlussarbeit Buch |
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1997
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INHALTSVERZEICHNIS
SEITE
ABKUERZUNGEN
I
1.
ZUSAMMENFASSUNG
.
1
2.
EINLEITUNG
2.1
DAS
HUMANE
IMMUNDEFIZIENZVIRUS
VOM
TYP
1
(HIV-1)
.
3
12
DIE
STRUKTUR
DES
HIV-1
.
5
23
DIE
REPLIKATION
DES
HIV-1
.
6
24
DIE
HETEROGENITAET
DES
HIV-1
.
7
25
DER
V3
UND
V2-LOOP
DES
GPL20
.
12
26
NEUTRALISIERENDE
ANTIKOERPER
VERSUS
AUTOANTIKOERPER
.
16
27
ZIEL
DER
ARBEIT
.
21
3.
METHODEN
3.1
EXPRESSION
VON
GST-FUSIONSPROTEINEN
.
23
33
ISOLIERUNG
VON
GST-FUSIONSPROTEINEN
.
25
33
AUFKONZENTRIEREN
VON
PROTEINLOESUNGEN
.
25
3.4
MESSUNG
DER
PROTEINKONZENTRATION
.
26
3.5
SDS-PAGE
.
26
3.6
WESTERN
BLOT
.
27
3.7
INDIREKTER
ELISA
.
27
33
ENTFERNUNG
VON
ANTI-E
COH-ANTIKOERPERN
AUS
SEREN
.
27
SEITE
3.9
DISSOZIATION
VON
IMMUNKOMPLEXEN.
-
.
27
3.10
HARNSTOFF-EUSA.
.
-
27
3.11
KOLONIE
BLOT-SCREENING.
-
.
28
3.12
HARNSTOFF-BLOT-SCREENING.
29
3.13
DOT-BLOT
.
30
3.14
AMMONIUMSULFATFAELLUNG
VON
IMMUNGLOBULINEN
.
30
3.1S
AUFREINIGUNG
VON
ANTI-V3-,
UND
ANTI-V2-ANTIKOERPER
AUS
HIV-L-SEREN
.
30
3.16
DIALYSE.
31
3.17
PEPSCAN
.
32
3.18
SYNTHESE
VON
V3-LOOP-OLIGONUKLEOTIDEN
.
32
3.19
SYNTHESE
VON
DEGENERIERTEN
V3-LOOP-OLIGONUKLEOTIDEN
.
37
3.20
SYNTHESE
VON
SUBTYP
A,
D
UND
E
V3-LOOP-OLIGONUKLEOTIDEN.
39
3.21
SYNTHESE
VON
DEGENERIERTEN
V2-LOOP-OLIGONUKLEOTIDEN
.
41
3.22
AUFREINIGUNG
VON
DNA-FRAGMENTEN
UND
PLASMID-DNA
MIT
SIO2-PARTIKELN
.
42
323
RESTRIKTIONSVERDAU
UND
TRENNUNG
VON
DNA-FRAGMENTEN
.
42
3.24
UGATION
VON
DNA
.
42
3.25
TRANSFORMATION
.
42
326
SEQUENZIERUNG
VON
DNA
.
42
3.27
ISOLIERUNG
VON
PERIPHEREN
BLUTLYMPHOZYTEN
.
42
3.28
ZELLZAEHLUNG
VON
PERIPHEREN
BLUTLYMPHOZYTEN
.
43
3.29
ZELL-PROLIFERATIONSASSAY.
43
330
IMMUNFLUORESZENZ
.
44
4.
ERGEBNISSE
SEITE
4.1
VERLUST
AUTOLOGER
V3-ANDKOERPER.
45
42
UNTERSUCHUNG
DER
AVIDITAET
VON
V3-ANTIKOERPEM
.
52
43
VERLUST
VON
HETEROLOGEN
V3-ANTIKOERPERN
GEGEN
PATIENTENSPEZIFISCHE
GST-V3-FUSIONSPROTEINE.
54
4.4
HERSTELLUNG
EINER
GST-V3-LOOP-EXPRESSIONSBANK.
.
59
4.5
VERLUST
DER
HETEROLOGEN
V3-ANTIKOERPERREAKTIVITAET
GEGEN
SYNTHETISCHE
GST-V3R-LOOPS
.
67
4.6
"PEPSCAN"-ANALYSE
VON
V3-LOOP-SEQUENZEN
.
69
4.7
HERSTELLUNG
EINER
GST-V2-LOOP-EXPRESSIONSBANK.
.
72
4.8
VERLUST
HETEROLOGER
V2-ANTIKOERPER.
76
4.9
AFFINITAETSCHROMATOGRAPHISCHE
REINIGUNG
TYPENSPEZIFISCHER
V2-,
UND
V3-ANTIKOERPER.
79
4.10
INHIBITION
DER
PROLIFERATION
AKTIVIERTER
T-ZELLEN
DURCH
TYPENSPEZIFISCHE
V3-ANTIKOERPER.
84
5.
DISKUSSION
.
89
6.
LITERATUR.
-
.
97
7.
PUBLIKATIONSLISTE
.
105
8.
DANKSAGUNG
.
106
9.
LEBENSLAUF.
.
107 |
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