Oberflächencharakterisierung von unterschiedlich kultivierten Aeromonas-salmonicida-Isolaten mittels LPS- und Proteinmusteranalyse in der SDS-PAGE:
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1996
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Beschreibung: | Berlin, Freie Univ., Diss., 1997 |
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INHALTSVERZEICHNIS
SEITE
1.
EINLEITUNG
7
2.
LITERATURUEBERBLICK
9
2.1.
AEROMONAS
SALMONICIDA
(A.SAI.)
-
AETIOLOGISCHES
AGENS
DER
FURUNKULOSE
DER
SALMONIDEN
9
2.2.
VIRULENZFAKTOREN
14
2.2.1.
EXTRAZELLULAERE
VIRULENZFAKTOREN
(ECP)
15
2.2.2.
ZELLASSOZIIERTE
VIRULENZFAKTOREN
17
2.3.
METHODEN
ZUR
ISOLIERUNG
UND
DARSTELLUNG
DER
LPS
UND
PROTEINE
GRAM-NEGATIVER
BAKTERIEN
22
2.3.1.
ELEKTROPHORESE
22
2.3.2.
GEWINNUNG
DER
MEMBRANOBERFLAECHEN-PROTEINE
(OMP)
23
2.3.3.
GEWINNUNG
DER
LIPOPOLYSACCHARIDE
(LPS)
24
2.3.4.
DIE
SILBERFARBUNG
24
3.
EIGENE
UNTERSUCHUNGEN
27
3.1.
METHODENWAHL
UND
STANDARDISIERUNG
27
3.1.1.
VERWENDETES
MATERIAL
27
3.1.1.1.
REAGENZIEN
UND
REZEPTE
FUER
DIE
LPS-AUFBEREITUNG
(HITCHCOCK
&
BROWN,
1983)
27
3.1.1.2.
REAGENZIEN
UND
REZEPTE
FUER
DIE
OMP-AUFBEREITUNG
(PATRICK
&
LUTTON,
1990)
28
3.1.1.3.
REAGENZIEN
UND
REZEPTE
FUER
DIE
GELELEKTROPHORESE
(LAEMMLI,
1970)
29
3.1.1.4.
REAGENZIEN
UND
REZEPTE
FUER
DIE
SILBERFARBUNG
31
3.1.1.5.
REAGENZIEN
UND
REZEPTE
FUER
DIE
COOMASSIE
BLUE-FAERBUNG
33
3.1.1.6.
REZEPTE
FUER
DIE
MEDIEN
33
3.1.1.7.
VERWENDETE
A.SAL.-ISOLATE
34
3.1.2.
METHODENBESCHREIBUNG
UND
STANDARDISIERUNG
36
3.1.2.1.
LPS-AUFBEREITUNG
FUER
DIE
SDS-PAGE
36
3.1.2.2.
OMP-AUFBEREITUNG
FUER
DIE
SDS-PAGE
37
3.1.2.3.
AUFBEREITUNG
DER
PROBEN
FUER
DIE
DARSTELLUNG
DER
GANZZELL
PROTEINMUSTER
38
3.1.2.4.
HERSTELLEN
DER
GELE
38
3.1.2.5.
AUFTRAEGEN
DER
PROBEN
UND
SDS-PAGE-LAUF
39
3.1.2.6.
SILBERFARBUNG
41
3.1.2.7.
COOMASSIE BLUE-FARBUNG
43
3.1.2.8.
UNTERSUCHUNGEN
ZUR
KORRELATION
ZWISCHEN
OPTISCHER
DICHTE
UND
LEBENDKEIMZAHL
(EICHKURVE)
44
3.1.2.9.
ERMITTLUNG
DER
FEHLERQUOTE
BEI
DER
VERDUENNUNG
EINER
DEFINIERTEN
A.SAI.
AUSGANGSKULTUR
44
3.1.2.10.
'
UNTERSUCHUNGEN
ZUM
WACHSTUMSVERHALTEN
AUSGEWAEHLTER
A.SAL.-ISOLATE
IN
VERSCHIEDENEN
ANZUCHTMEDIEN
46
3.1.3.
ZUSAMMENFASSUNG
DER
ERGEBNISSE
47
3.2.
LPS
UND
PROTEINMUSTERANALYSE
50
3.2.1.
MATERIAL
UND
METHODE
50
3.2.1.1.
AUSWAHL
DER
ZU
UNTERSUCHENDEN
ISOLATE
50
3.2.I.2.
DARSTELLEN
DER
LPS
UND
PROTEINMUSTER
NACH
ANZUCHT
IM
NAEHRMEDIUM
("NONNALBILD")
50
3.2.1.3,
DARSTELLEN
DER
LPS
UND
PROTEINMUSTER
NACH
INKUBATION
IM
VERDUENNTEN
MEDIUM
BZW.
NACL
52
3.2.1.4.
DARSTELLEN
DER
LPS
UND
PROTEINMUSTER
NACH
EINER
FISCHPASSAGE
53
3.2.2.
ERGEBNISSE
55
3.2.2.1.
LPS
UND
PROTEINMUSTER
NACH
ANZUCHT
IM
NAEHRMEDIUM
("NORMALBILD")
55
3.2.2.2.
LPS
UND
PROTEINMUSTER
NACH
INKUBATION
UNTER
VERSCHIEDENEN
BEDINGUNGEN
59
3.2.2.3.
LPS
UND
PROTEINMUSTER
NACH
EINER
FISCHPASSAGE
64
3.2.2.4.
ELEKTRONENMIKROSKPISCHE
DARSTELLUNG
DER
OBERFLAECHE
AUSGEWAEHLTER
ISOLATE
66
4.
DISKUSSION
72
4.1.
METHODENWAHL
72
4.2.
WACHSTUMS
UND
UEBERLEBENSVERHALTEN
75
4.3.
LPS
UND
PROTEINMUSTER
NACH
ANZUCHT
IM
NAEHRMEDIUM
("NORMALBILD")
76
4.4.
LPS
UND
PROTEINMUSTERANALYSE
NACH
INKUBATION
UNTER
VERSCHIEDENEN
BEDINGUNGEN
84
4.5.
LPS
UND
PROTEINMUSTER
NACH
EINER
FISCHPASSAGE
87
5.
ZUSAMMENFASSUNG
89
6.
SUMMARY
90
7.
QUELLENVERZEICHNIS
91
ANHANG
116 |
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