Klonierung und Expression immundominanter Epitope von Strukturproteinen des Humanen Cytomegalievirus:
Gespeichert in:
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| Format: | Buch |
| Sprache: | German |
| Veröffentlicht: |
Marburg
Görich & Weiershäuser
1997
|
| Schriftenreihe: | Wissenschaft in Dissertationen
226 |
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| Online-Zugang: | Inhaltsverzeichnis |
| Beschreibung: | Zugl.: Marburg, Univ., Diss., 1997 |
| Beschreibung: | 80 S. Ill., graph. Darst. |
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INHATENARARICHNIJ
INHALTSVERZEICHNIS
1
EINLEITUNG
.
1
1.1
TAXONOMIE
.
.
.
1
1.2
BIOLOGISCHE
ASPEKTE
.
2
1.2.1
VIRIONSTRUKTUR
.
2
1.2.2
GENOMSTRUKTUR
.
4
1.2,3
VIRALER
INFEKTIONSZYKLUS
.
4
1.2.4
VIRALE
MEMBRANGLYKOPROTEINE
.
6
1.2.4.1
GLYKOPROTEINE
.
6
1.2.4.2
TEGUMENTPROTEINE
.
8
13
MEDIZINISCHE
ASPEKTE
.
10
1.4
EVALUATION
DER
DERZEITIGEN
DIAGNOSTISCHEN
MOEGLICHKEITEN
.
12
13
FRAGESTELLUNG
UND
ZIELSETZUNG
.16
2
MATERIAL
UND
METHODEN
.
18
2.1
MATERIAL
.
18
2.1.1
BEZUGSQUELLEN
.
18
2.1.1.1
CHEMIKALIEN
.
18
2.1.1.2
ANTIBIOTIKA
.
18
2.1.1.3
KULTURMEDIENGRUNDSTOFFE
.
18
2.1.1.4RESTRIKTIONSENDONUKLEASEN
.
18
2.1.1.5
SONSTIGE
ENZYME
.
19
2.1.1.6
ANTIKOERPER
.
19
2.1.1.7
RADIOAKTIV
MARKIERTE
NUKLEOTIDE
.
19
2.1.1.8
SONSTIGE
MATERIALIEN
.
19
2.1.2
MEDIEN
.
20
2.1.3
PUFFER
.
20
2.1.4
OLIGONUKLEOTIDE
.
21
2.1.4.1
SEQUENZIERPRIMER
.
21
2.1.4.2
PCR-PRIMER
.
.
.
21
2.1.5
PLASMIDE
UND
BAKTERIEN
.
.
.
22
2.1.5.1
PLASMIDE
.
22
2.1.5.2
BAKTERIEN
.
24
INLUHMMEIDINM
----------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------
U
2.1.5.3
HCMV-STAEMME
.
24
U
METHODEN
.
24
2.2.1
MOLEKULARBIOLOGISCHE
METHODEN
.
24
2.2.1.1
EXTRAKTION
VIRALER
DNA
.
24
2.2.1.2
POLYMERASE-KETTEN-REAKTION
.
26
2.2.1.2.1
VORBEREITUNG
DER
PROBEN
FFLR
DEN
EINSATZ
IN
DER
PCR
.
27
2.2.1.2.2
EXTRAKTION
DER
PCR-PROBEN
.
28
2.2.1.3
ISOLIERUNG
UND
QUANTIFIZIERUNG
DS
PLASMID-DNA
.
28
2.2.1.3.1
ISOLIERUNG
VON
VEKTOR-DNA
AUS
UEBERNACHT-ZELLKULTUR
.
28
2.2.1.3.2
MAXIPRAEPARATION
VON
PLASMIDEN
.
30
2.2.1.3.3
SPEKTROPHOTOMETRISCHE
KONZENTRATIONSBESTIMMUNG
VON
DS
DNA
.
32
2.2.1.4
ANALYTISCHER
VERDAU
VON
DNA
MITTELS
RESTRIKTIONSENDONUKLEASEN
.
32
2.2.1.5
ANALYTISCHE
UND
PRAEPARATIVE
AGAROSEGELELEKTROPHORESE
.
32
2.2.1.5.1
QIAEX-KIT
ZUR
EXTRAKTION
VON
DNA
.
33
2.2.1.6
PLASMIDKLONIERUNG
.
34
2.2.1.7
TRANSFORMATION
VON
E.COLI-M15PREP4-BAKTERIENZELLEN
.
35
2.2.1.7.1
HERSTELLUNG
KOMPETENTER
ZELLEN
.
35
2.2.1.7.2
TRANSFORMATION
VON
M15PREP4-ZELLEN
.
36
2.2.1.8
SEQUENZIERUNG
.
37
2.2.1.8.1
REINIGUNG
DER
SEQUENZIETPRIMER
.
37
2.2.1.8.2
ALKALISCHE
DENATURIERUNG
DER
REKOMBINANTEN
KONSTRUKTE
.
37
2.2.1.8.3
SEQUENZIENEAKTION/
PRINZIP
.
38
2.2.1.8.4
SEQUENZIERREAKTION/
EXPERIMENTELLE
DURCHFUEHRUNG
.
39
2.2.1.8.5
HERSTELLUNG
DER
SEQUENZIERGELE
.
40
2.2.1.8.6
ELEKTROPHORESE
UND
AUTORADIOGRAPHIE
.
41
2.2.1.9
INDUKTION
DER
TRANSFORMIERTEN
KULTUREN
UND
PRAEPARATION
DER
REKOMBINANTEN
PROTEINE.
41
2.2.1.10
PROTEINANALYSEN
.
44
2.2.1.10.1
SDS-POLYACRYLAMID-GELELEKTROPHORESE
.
44
2.2.1.10.2
IIMNUNOBLOT
.
46
2.2.1.10.3
PROTEINBESTIMMUNG
NACH
BRADFORD
.
49
3
ERGEBNISSE
.
50
3.1
AMPLIFIKATION
ANSGEWIHLTER
SPEZIFISCHER
EPITOPKODIERENDER
SEQUENZEN
DER
HCMV
STAEMME
AD169
NND
TOWNE
.
50
INHALTSVERZEICHNIS
_
_JU
3.1.1
GEWINNUNG
VIRALER
DNA
.
50
3.1.2
POLYMERASE-KETTEN-REAKTION
.
51
3.1.2.1
AUFARBEITUNG
UND
QUANTIFIZIERUNG
DER
OLIGONUKLEOTIDE
FUER
DEN
EINSATZ
IN
DER
PCR
.51
3.1.2.2
AMPLIFIKATION
DER
KODIERENDEN
ABSCHNITTE
DER
LABORSTAEMME
ADI
69
UND
TOWNE
.
51
3.1.2.3
INAKTIVIERUNG
DER
AMPLITAQ-POLYMERASE
UND
DNA-PRAEPARATION
.
52
3.1.3
KLONIERUNG
DER
PCR-AMPLIFIKATIONSPRODUKTE
IN
DEN
EXPRESSIONS-VEKTOR
PQE30-32
.
52
3.1.3.1
PRAEPARATION
UND
LIGATION
VON
VEKTOR
UND
INSERT-DNA
.
53
3.1.3.2
OBERPRUEFUNG
DER
PQE30-32-KONSTRUKTE
.
54
3.2
SEQUENZIERUNG
.
57
3.3
EXPRESSION
DER
FUSIONSPROTEINE
.
58
3.3.1
ANALYSE
DER
EXPRESSION
.
58
3.3.2
INDUKTION
UND
AUFREINIGUNG
DER
FUSIONSPROTEINE
IM
GROSSEN
MASSSTAB
.
59
3.3.3
SEROLOGISCHE
UNTERSUCHUNGEN
.
62
4
DISKUSSION
.
67
5
ZUSAMMENFASSUNG
.
71
6
LITERATURVERZEICHNIS
.
72 |
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| topic_facet | Differentielle Genexpression Skleroproteine Cytomegalie-Virus Epitop Hochschulschrift |
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