Quantifizierung zirkulierender Melanomzellen im peripheren Blut:
Gespeichert in:
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| Format: | Buch |
| Sprache: | German |
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1995
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| Beschreibung: | Heidelberg, Univ., Diss., 1997 (Nicht für den Austausch) |
| Beschreibung: | 51 Bl. Ill., graph. Darst. |
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INHALTSVERZEICHNIS
1. ABKUERZUNGSVERZEICHNIS.1
2. EINLEITUNG.2
3. ZIELSETZUNG DER ARBEIT.3
4. MATERIAL UND METHODIK.4
4.1. MATERIAL.4
4.1.1. REAGENZIEN.4
4.1.2. LOESUNGEN UND PUFFER.5
4.1.3. ENZYME UND GROESSENMARKER.8
4.1.4. NUKLEOTIDE (MWG-BIOTECH, EBERSBERG).9
4.1.5. BLUTPROBEN.9
4.1.6. ZELLINIEN.9
4.1.7. HILFSMATERIALIEN.9
4.1.8. COMPUTER, SCANNERUND COMPUTERSOFTWARE.10
4.1.9. GERAETE.10
4.2. METHODEN.11
4.2.1. ZELLKULTURMETHODEN.11
4.2.2. ISOLIERUNG VON ZELLEN AUS PERIPHEREM BLUT.11
4.2.3. HERSTELLUNG VON VERDUENNUNGSREIHEN. .UE.12
4.2.4. RNA-PRAEPARATION NACH CHOMCZYNSKI UND SACCHI (8).12
4.2.5. NUKLEINSAEURE-KONZENTRATIONSBESTIMMUNG.13
4.2.6. CDNA-SYNTHESE AUS RNA.13
4.2.7. POLYMERASE-KETTEN-REAKTION.14
4.2.8. ELEKTROPHORESETECHNIKEN.18
4.2.9. DNA-TRANSFER AUF NYLONMEMBRANEN.18
4.2.10. HERSTELLUNG DER DNA-SONDE.19
4.2.11. PRAEPARATION DER DNA-SONDE AUS DEM AGAROSEGEL.20
4.2.12. DNA-DNA-HYBRIDISIERUNGEN AUF NYLONMEMBRANEN
(SOUTHERN BLOT).20
4.2.13. DETEKTION DURCH CHEMILUMINESZENZ.22
4.2.14. SEMIQUANTITATIVE AUSWERTUNG DER PCR-PRODUKTE DURCH
COMPUTERDENSITOMETRIE. 22
5. ERGEBNISSE.23
5.1. VERGLEICHENDE DETEKTION ZIRKULIERENDER MELANOMZELLEN BEI
PATIENTEN MIT FEMMETASTASEN NACH ANWENDUNG VERSCHIEDENER
ZELLISOLIERUNGSMETHODEN. 23
5.1.1. DETEKTION NACH ABZENTRIFUGIEREN DES BLUTPLASMAS.23
5.1.2. DETEKTION NACH FICOLLGRADIENT MIT DER DICHTE 1,077 G/ML 25
5.1.3. VERGLEICHENDE DETEKTION NACH FICOLLGRADIENTEN MIT DER
DICHTE 1,077 G/ML UND MIT DER DICHTE 1,090 G/ML 26
5.1.4. AUSZAEHLUNG DER ZELLEN IN DER INTERPHASE VERSCHIEDENER
DICHTEGRADIENTEN.27
5.2. HYBRIDISIERUNG MIT DER TYR-5-DIG-SONDE.29
5.3. HYBRIDISIERUNG MIT DER DNA-PCR-SONDE.30
5.3.1. UEBERPRUEFUNG DER SENSITIVITAET.30
5.3 .2. VARIATION DER ZYKLENZAHL DER PCR.30
5.3.3. VARIATION DER BELICHTUNGSZEIT DER ROENTGENFILME.32
5.4. SEMIQUANTITATIVE AUSWERTUNG DER PCR-PRODUKTE DURCH
COMPUTERDENSITOMETRIE.34
5.5. SEMIQUANTITATIVE BESTIMMUNG DER ZAHL DER ZIRKULIERENDEN
MELANOMZELLEN IM PERIPHEREN BLUT BEI PATIENTEN MIT FEMMETASTASEN 35
BIBLIOGRAFISCHE INFORMATIONEN
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6. DISKUSSION.38
6.1. FRAGESTELLUNG.38
6.2. METHODIK.38
6.2.1. EXPERIMENTELLE PROBLEMATIK.38
6.2.2. AUSSAGEFAEHIGKEIT DES ANSATZES.39
6.3. ERGEBNISSE.40
6.3.1. SENSITIVITAET.40
6.3.2. SPEZIFITAET.41
6.3.3. QUANTITATIVE AUSSAGE.41
6.4. LITERATUR.41
6.4.1. SENSITIVITAET UND SPEZIFITAET.*.41
6.4.2. AEHNLICHE METHODIK DER QUANTIFIZIERUNG.42
6.4.3. ANDERE MOEGLICHKEITEN DER QUANTIFIZIERUNG.42
6.5. SCHLUSSFOLGERUNG.43
6.5.1. UEBERPRUEFUNG DER ERGEBNISSE.43
6.5.2. MOEGLICHE KLINISCHE ANWENDUNG.43
7. ZUSAMMENFASSUNG.45
8. LITERATURVERZEICHNIS.47
9. LEBENSLAUF._.50
10. DANKSAGUNG.
7
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