Biochemische und molekularbiologische Charakterisierung der Alpha-Glucuronidase von Thermotoga maritima MSB8:
Gespeichert in:
| 1. Verfasser: | |
|---|---|
| Format: | Abschlussarbeit Buch |
| Sprache: | German |
| Veröffentlicht: |
1997
|
| Schlagworte: | |
| Online-Zugang: | Inhaltsverzeichnis |
| Beschreibung: | [6], 151 S. graph. Darst. |
Internformat
MARC
| LEADER | 00000nam a2200000 c 4500 | ||
|---|---|---|---|
| 001 | BV011485414 | ||
| 003 | DE-604 | ||
| 005 | 19971127 | ||
| 007 | t | ||
| 008 | 970818s1997 gw d||| m||| 00||| gerod | ||
| 016 | 7 | |a 951347349 |2 DE-101 | |
| 035 | |a (OCoLC)164786926 | ||
| 035 | |a (DE-599)BVBBV011485414 | ||
| 040 | |a DE-604 |b ger |e rakddb | ||
| 041 | 0 | |a ger | |
| 044 | |a gw |c DE | ||
| 049 | |a DE-91 |a DE-29T |a DE-12 |a DE-11 |a DE-188 | ||
| 100 | 1 | |a Ruile, Peter |e Verfasser |4 aut | |
| 245 | 1 | 0 | |a Biochemische und molekularbiologische Charakterisierung der Alpha-Glucuronidase von Thermotoga maritima MSB8 |c Peter Ruile |
| 264 | 1 | |c 1997 | |
| 300 | |a [6], 151 S. |b graph. Darst. | ||
| 336 | |b txt |2 rdacontent | ||
| 337 | |b n |2 rdamedia | ||
| 338 | |b nc |2 rdacarrier | ||
| 502 | |a München, Techn. Univ., Diss., 1997 | ||
| 650 | 0 | 7 | |a Glucosiduronase |g alpha- |0 (DE-588)4469090-3 |2 gnd |9 rswk-swf |
| 650 | 0 | 7 | |a Thermotoga maritima |0 (DE-588)4310313-3 |2 gnd |9 rswk-swf |
| 655 | 7 | |0 (DE-588)4113937-9 |a Hochschulschrift |2 gnd-content | |
| 689 | 0 | 0 | |a Thermotoga maritima |0 (DE-588)4310313-3 |D s |
| 689 | 0 | 1 | |a Glucosiduronase |g alpha- |0 (DE-588)4469090-3 |D s |
| 689 | 0 | |5 DE-604 | |
| 856 | 4 | 2 | |m DNB Datenaustausch |q application/pdf |u http://bvbr.bib-bvb.de:8991/F?func=service&doc_library=BVB01&local_base=BVB01&doc_number=007727281&sequence=000001&line_number=0001&func_code=DB_RECORDS&service_type=MEDIA |3 Inhaltsverzeichnis |
| 943 | 1 | |a oai:aleph.bib-bvb.de:BVB01-007727281 | |
Datensatz im Suchindex
| _version_ | 1807773460906115072 |
|---|---|
| adam_text |
INHALTSVERZEICHNIS
A.
EINLEITUNG
.
1
B.
MATERIAL
UND
METHODEN
.
6
1.
BAKTERIEN,
PLASMIDE
UND
ANTIBIOTIKA
.
6
1
1.
BAKTERIEN
.
6
1.2.
PLASMIDE
.
7
1
3.
ANTIBIOTIKA
.
12
2.
ANZUCHT
UND
STAMMHALTUNG
.
12
2.1.
NAEHRMEDIEN
FUER
E.
COLI
.
12
2
2.
NAEHRMEDIUM
FUER
T.MARITIMA
.
12
2.3.
ANZUCHT
UND
STAMMHALTUNG
VON
E.COLI
.
15
2
4.
ANZUCHT
UND
STAMMHALTUNG
VON
T.MARITIMA
.
15
2.5.
ZELLEMTE
.
16
2.6.
INDUKTION
DES
LACF/PUC-SYSTEMS
.
17
3.
ALLGEMEINE
PUFFER
UND
LOESUNGEN
.
17
4.
MOLEKULARGENETISCHE
METHODEN
.
18
4.1.
PLASMIDISOLIERUNG
AUS
E.
COLI
.
18
4
1.1.
PRAEPARATION
VON
PLASMIDEN
DURCH
ULTRAZENTRIFUGATION
.
18
4.1.2.
PLASTNIDISOLIENMG
MIT
QIAGEN
PLASMID
MIDI
KIT
.
19
4.1.3.
PLASMIDSCHNELLISOLIERUNG
.
20
4
1.3.1.
ALKALISCHE
LYSE
.
20
4.1.3.2.
OIAPREP
SPIN
PLASMID
MINIPREP
KIT
.
20
4.2.
REINIGUNG
UND
KONZENTRIERUNG
VON
DNS
.
21
4
2.1.
PHENOLEXTRAKTION
.
21
4.2.2.
ETHANOLFAELLUNG
.
21
4.3.
AGAROSEGELELEKTROPHORESE
.
22
4.3.1.
ANALYTISCHE
AGAROSEGELELEKTROPHORESE
.
22
4.3.2.
GROESSENBESTIMMUNG
VON
DNS-FRAGMENTEN
.
23
4.3.3.
KONZENTRATIONSABSCHAETZUNG
VON
DNS-FRAGMENTEN
.
23
4.3.4.
PRAEPARATIVE
AGAROSEGELELEKTROPHORESE
.
24
4.3.5
ISOLIERUNG
VON
DNS
AUS
AGAROSEGELEN
.
24
4.4.
IN-VITRO
MANIPULATION
VON
DNS
.
24
4.4
1.
RESTRIKTIONSVERDAUUNG
.
24
4.4.2.
LIGATION
VON
DNS-MOLEKUELEN
.
25
4.4.3.
DEPHOSPHORYLIERUNG
VON
DNS-FRAGMENTEN
.
26
4.4.4.
KLENOWBEHANDLUNG
.
26
4.5.
TRANSFORMATION
VON
E.COLI
DURCH
ELEKTROPORATION
.
27
4.6.
DNS-TRANSFER
NACH SOUTHERN
.
28
4.7.
IN
VITRO
AMNLIFIZIERUNG
VON
DNS
DURCH
PCR
.
30
4.8
HERSTELLUNG
UNIDIREKTIONALER
DELETIONEN
DURCH
EXONUCLEASE
III-BEHANDLUNG
.
31
4.9.
SEQUENZIERUNG
.
33
4.9.1.
SEQUENZIERUNGSREAKTION
.
33
4.9.2.
GELELEKTROPHORESE:
YYDIRECT-BLOTTING
ELEKTROPHORESE
"
.
35
4.9.3.
DETEKTION
.
37
5.
GEWINNUNG
VON
ROHEXTRAKTEN
AUS
ZELLEN
.
39
5
1.
LYSOZYMAUFSCHLUSS
VON
E.COLI
.
39
5.2.
ZELLAUFSCHLUSS
MIT
DER
FRENCH
PRESS
.
39
5.3.
HITZEFAELLUNG
VON
MESOPHILEN
WIRTSPROTEINEN
.
40
5.4
KONZENTRIEREN
UND
ENTSALZEN
VON
PROTEINLOESUNGEN
.
40
5
4.1.
DIALYSE
.
40
5
4.2.
VERWENDUNG
VON
MIKROKONZENTRATOREN
.
40
5.5.
BESTIMMUNG
DES
GESAMTPROTEINS
.
41
6.
POLYACRYLAMIDGELELEKTROPHORESE
(PAGE)
.
41
6.1.
BENOETIGTE
PUFFER
UND
LOESUNGEN
.
42
6.2.
HERSTELLEN
DER
GELE
.
43
6.3.
DURCHFUEHRUNG
DER
ELEKTROPHORESE
.
44
6.4.
PROTEINFAERBUNG
MIT
COOMASSIE
R250
.
44
6.5.
MOLEKULARMASSENBESTIMMUNG
DURCH
PAGE
.
44
7.
ISOELEKTRISCHE
FOKUSIERUNG
DURCH
PAGE
.
45
8.
ENZYMCHARAKTERISIERUNG
.
46
8.1.
SUBSTRATHERSTELLUNG
.
46
8.1.1.
KOMBINIERTER
ENZYMATISCHER
VERDAU
EINES
SUBSTITUIERTEN
XYLANS
.
46
8.1.2.
SAEULENCHROMATOGRAPHISCHE
TRENNUNG
DER
ABBAUPRODUKTE
.
47
8.2.
CHROMATOGRAPHISCHE
ANALYSEN
.
49
8.2.1
PRODUKTANALYSE
DURCH
DUENNSCHICHTCHROMATOGRAPHIE
.
49
8.2.2.
PRODUKTANALYSE
DURCH
HOCHLEISTUNGS-FLUESSIG-CHROMATOGRAPHIE
(HPLC)
.
50
8.3.
ARSENOMOLYBDAT-KUPFERSULFAT-TEST
ZUR
BESTIMMUNG
DER
GLUCURONIDASEAKTIVITAET.
50
8.3.1.
TESTPRINZIP
.
50
8.3.2.
PUFFER
UND
LOESUNGEN
.
51
8
3.3
TESTANSATZ
(IM
1,5
ML
EPPENDORF-CAP)
.
52
8.4.
BESTIMMUNG
REDUZIERENDER
ZUCKER
MITTELS
DNSA-TEST
.
53
8.5
STANDARDASSAY
FUER
XYLANASEAKTIVITAET
.
54
8.6.
STANDARDASSAY
FUER
SS-XYLOSIDASEAKTIVITAET
.
54
8.7.
STANDARDASSAY
FUER
A-ARABINOFUERANOSIDASEAKTIVITAET
.
55
9.
PROTEINREINIGUNG
.
56
9
1
VORBEMERKUNG
.
56
9.2.
APPARATIVE
AUSSTATTUNG
.
57
9.3.
TRENNUNG
DURCH
ANIONEN-BZW
KATIONENAUSTAUSCHCHROMATOGRAPHIE
.
57
9.4.
TRENNUNG
DURCH
HYDROPHOBE
INTERAKTIONSCHROMATOGRAPHIE
(HIC)
.
58
9.5.
GELFILTRATION
.
59
9.5.1.
TRENNUNG
DURCH
GELFILTRATION
.
59
9.5.2.
MOLEKULARMASSENBESTIMMUNG
MIT
GELFILTRATION
.
59
9.6.
LAGERUNG
UND
REINIGUNG
DER
SAEULEN
.
60
10.
DAPI-FAERBUNG
.
60
C.
ERGEBNISSE
.
62
1.
ISOLIERUNG
DES
A-GLUCURONIDASEGENS
AUS
THERMOTOGA
MARITIMA
.
62
2.
RESTRIKTIONSKARTE
VON
PTAGU18
.
62
3.
DELETIONSSTUDIEN
.
64
4.
SOUTHERN-BLOT
ANALYSE
.
66
5.
SUBKLONIERUNG
UND
SEQUENZIERUNG
.
69
6.
AUSWERTUNG
DER
SEQUENZDATEN
.
71
6.1
RESTRIKTIONSKARTE
DES
GESAMTEN
SEQUENZIERTEN
BEREICHS
.
71
6.2.
OFFENE
LESERAHMEN
.
72
6.2.1.
ORF1
.
75
6.2.2.
ORF2
.
82
7.
BESTIMMUNG
DES
NHJ-TERMINUS
.
84
8.
KLONIERUNG
VON
AGUA
IN
EXPRESSIONSVEKTOREN
.
84
8.1.
EXPRESSIONSSYSTEM
PT7-7
.
85
8.2.
EXPRESSIONSSYSTEM
PET-15B
.
87
9.
INDUKTIONSSTUDIEN
MIT
DEN
EXPRESSIONSSYSTEMEN
.
L
.
.
90
10.
REINIGUNG
UND
CHARAKTERISIERUNG
DER
REKOMBINANT
EXPRIMIERTEN
A-GIUCURONIDASE
92
10.1.
NICHT
EINSETZBARE
REINIGUNGSMETHODEN
.
92
10.1.1.
LONENAUSTAUSCHCHROMATOGRAPHIE
.
92
10
1.2.
HYDROPHOBE
INTERAKTIONSCHROMATOGRAPHIE
.
93
10.1.3.
GELFILTRATION
.
93
10.2.
ERFOLGREICHE
REINIGUNGSMETHODE
.
93
10.2.1.
ANZUCHTBEDINGUNGEN
UND
ROHEXTRAKTHERSTELLUNG
.
93
10.2.2.
ANREICHERUNG
DURCH
HITZEFAELLUNG
.
94
10.2.3.
GELFILTRATION
.
94
10
3.
EINFLUSS
VON
SALZ
AUF
DAS
REINIGUNGSVERHALTEN
.
96
10.4.
PH-OPTIMUM
.
97
10.5
"
TEMPERATUROPTIMUM
"
.
98
10.6.
THERMOSTABILITAET
.
99
10.7.
ISOELEKTRISCHER
PUNKT
.
101
10.7.1.
EXPERIMENTELLE
BESTIMMUNG
.
101
10.7.2.
THEORETISCHE
BESTIMMUNG
.
102
10.8.
EINFLUESSE
VERSCHIEDENER
REAGENZIEN
AUF
DIE
AKTIVITAET
DER
A-GHICURONIDASE
.
103
10.9
KINETISCHE
DATEN
.
104
10.10.
SUBSTRATSPEZIFITAET
.
106
10.10.1.
HARTHOLZXYLAN
.
108
10.102.
WEICHHOLZXYLAN
.
112
10.10.3.
STROHXYLAN
.
113
10.104.
STROHXYLAN,
YYSTEAM
EXPLOSION
"
.
118
10.10.5.
DMSO-XYLAN
(BUCHE)
.
119
10.11.
SUBSTRATSPEZIFITAT
DER
A-GLUCURONIDASE
.
119
11.
INDUKTION
DER
ENZYME
DES
XYLANOLYTISCHEN
SYSTEMS
BEI
T.MARITIMA
.
127
12.
WACHSTUM
VON
T.MARITIMA
MIT
GLUCURONSAEURE
ALS
C-QUELLE
.
128
D.
DISKUSSION
.
130
E.
ZUSAMMENFASSUNG
.
145
F.
LITERATURVERZEICHNIS
.
147 |
| any_adam_object | 1 |
| author | Ruile, Peter |
| author_facet | Ruile, Peter |
| author_role | aut |
| author_sort | Ruile, Peter |
| author_variant | p r pr |
| building | Verbundindex |
| bvnumber | BV011485414 |
| ctrlnum | (OCoLC)164786926 (DE-599)BVBBV011485414 |
| format | Thesis Book |
| fullrecord | <?xml version="1.0" encoding="UTF-8"?><collection xmlns="http://www.loc.gov/MARC21/slim"><record><leader>00000nam a2200000 c 4500</leader><controlfield tag="001">BV011485414</controlfield><controlfield tag="003">DE-604</controlfield><controlfield tag="005">19971127</controlfield><controlfield tag="007">t</controlfield><controlfield tag="008">970818s1997 gw d||| m||| 00||| gerod</controlfield><datafield tag="016" ind1="7" ind2=" "><subfield code="a">951347349</subfield><subfield code="2">DE-101</subfield></datafield><datafield tag="035" ind1=" " ind2=" "><subfield code="a">(OCoLC)164786926</subfield></datafield><datafield tag="035" ind1=" " ind2=" "><subfield code="a">(DE-599)BVBBV011485414</subfield></datafield><datafield tag="040" ind1=" " ind2=" "><subfield code="a">DE-604</subfield><subfield code="b">ger</subfield><subfield code="e">rakddb</subfield></datafield><datafield tag="041" ind1="0" ind2=" "><subfield code="a">ger</subfield></datafield><datafield tag="044" ind1=" " ind2=" "><subfield code="a">gw</subfield><subfield code="c">DE</subfield></datafield><datafield tag="049" ind1=" " ind2=" "><subfield code="a">DE-91</subfield><subfield code="a">DE-29T</subfield><subfield code="a">DE-12</subfield><subfield code="a">DE-11</subfield><subfield code="a">DE-188</subfield></datafield><datafield tag="100" ind1="1" ind2=" "><subfield code="a">Ruile, Peter</subfield><subfield code="e">Verfasser</subfield><subfield code="4">aut</subfield></datafield><datafield tag="245" ind1="1" ind2="0"><subfield code="a">Biochemische und molekularbiologische Charakterisierung der Alpha-Glucuronidase von Thermotoga maritima MSB8</subfield><subfield code="c">Peter Ruile</subfield></datafield><datafield tag="264" ind1=" " ind2="1"><subfield code="c">1997</subfield></datafield><datafield tag="300" ind1=" " ind2=" "><subfield code="a">[6], 151 S.</subfield><subfield code="b">graph. Darst.</subfield></datafield><datafield tag="336" ind1=" " ind2=" "><subfield code="b">txt</subfield><subfield code="2">rdacontent</subfield></datafield><datafield tag="337" ind1=" " ind2=" "><subfield code="b">n</subfield><subfield code="2">rdamedia</subfield></datafield><datafield tag="338" ind1=" " ind2=" "><subfield code="b">nc</subfield><subfield code="2">rdacarrier</subfield></datafield><datafield tag="502" ind1=" " ind2=" "><subfield code="a">München, Techn. Univ., Diss., 1997</subfield></datafield><datafield tag="650" ind1="0" ind2="7"><subfield code="a">Glucosiduronase</subfield><subfield code="g">alpha-</subfield><subfield code="0">(DE-588)4469090-3</subfield><subfield code="2">gnd</subfield><subfield code="9">rswk-swf</subfield></datafield><datafield tag="650" ind1="0" ind2="7"><subfield code="a">Thermotoga maritima</subfield><subfield code="0">(DE-588)4310313-3</subfield><subfield code="2">gnd</subfield><subfield code="9">rswk-swf</subfield></datafield><datafield tag="655" ind1=" " ind2="7"><subfield code="0">(DE-588)4113937-9</subfield><subfield code="a">Hochschulschrift</subfield><subfield code="2">gnd-content</subfield></datafield><datafield tag="689" ind1="0" ind2="0"><subfield code="a">Thermotoga maritima</subfield><subfield code="0">(DE-588)4310313-3</subfield><subfield code="D">s</subfield></datafield><datafield tag="689" ind1="0" ind2="1"><subfield code="a">Glucosiduronase</subfield><subfield code="g">alpha-</subfield><subfield code="0">(DE-588)4469090-3</subfield><subfield code="D">s</subfield></datafield><datafield tag="689" ind1="0" ind2=" "><subfield code="5">DE-604</subfield></datafield><datafield tag="856" ind1="4" ind2="2"><subfield code="m">DNB Datenaustausch</subfield><subfield code="q">application/pdf</subfield><subfield code="u">http://bvbr.bib-bvb.de:8991/F?func=service&doc_library=BVB01&local_base=BVB01&doc_number=007727281&sequence=000001&line_number=0001&func_code=DB_RECORDS&service_type=MEDIA</subfield><subfield code="3">Inhaltsverzeichnis</subfield></datafield><datafield tag="943" ind1="1" ind2=" "><subfield code="a">oai:aleph.bib-bvb.de:BVB01-007727281</subfield></datafield></record></collection> |
| genre | (DE-588)4113937-9 Hochschulschrift gnd-content |
| genre_facet | Hochschulschrift |
| id | DE-604.BV011485414 |
| illustrated | Illustrated |
| indexdate | 2024-08-19T00:25:17Z |
| institution | BVB |
| language | German |
| oai_aleph_id | oai:aleph.bib-bvb.de:BVB01-007727281 |
| oclc_num | 164786926 |
| open_access_boolean | |
| owner | DE-91 DE-BY-TUM DE-29T DE-12 DE-11 DE-188 |
| owner_facet | DE-91 DE-BY-TUM DE-29T DE-12 DE-11 DE-188 |
| physical | [6], 151 S. graph. Darst. |
| publishDate | 1997 |
| publishDateSearch | 1997 |
| publishDateSort | 1997 |
| record_format | marc |
| spelling | Ruile, Peter Verfasser aut Biochemische und molekularbiologische Charakterisierung der Alpha-Glucuronidase von Thermotoga maritima MSB8 Peter Ruile 1997 [6], 151 S. graph. Darst. txt rdacontent n rdamedia nc rdacarrier München, Techn. Univ., Diss., 1997 Glucosiduronase alpha- (DE-588)4469090-3 gnd rswk-swf Thermotoga maritima (DE-588)4310313-3 gnd rswk-swf (DE-588)4113937-9 Hochschulschrift gnd-content Thermotoga maritima (DE-588)4310313-3 s Glucosiduronase alpha- (DE-588)4469090-3 s DE-604 DNB Datenaustausch application/pdf http://bvbr.bib-bvb.de:8991/F?func=service&doc_library=BVB01&local_base=BVB01&doc_number=007727281&sequence=000001&line_number=0001&func_code=DB_RECORDS&service_type=MEDIA Inhaltsverzeichnis |
| spellingShingle | Ruile, Peter Biochemische und molekularbiologische Charakterisierung der Alpha-Glucuronidase von Thermotoga maritima MSB8 Glucosiduronase alpha- (DE-588)4469090-3 gnd Thermotoga maritima (DE-588)4310313-3 gnd |
| subject_GND | (DE-588)4469090-3 (DE-588)4310313-3 (DE-588)4113937-9 |
| title | Biochemische und molekularbiologische Charakterisierung der Alpha-Glucuronidase von Thermotoga maritima MSB8 |
| title_auth | Biochemische und molekularbiologische Charakterisierung der Alpha-Glucuronidase von Thermotoga maritima MSB8 |
| title_exact_search | Biochemische und molekularbiologische Charakterisierung der Alpha-Glucuronidase von Thermotoga maritima MSB8 |
| title_full | Biochemische und molekularbiologische Charakterisierung der Alpha-Glucuronidase von Thermotoga maritima MSB8 Peter Ruile |
| title_fullStr | Biochemische und molekularbiologische Charakterisierung der Alpha-Glucuronidase von Thermotoga maritima MSB8 Peter Ruile |
| title_full_unstemmed | Biochemische und molekularbiologische Charakterisierung der Alpha-Glucuronidase von Thermotoga maritima MSB8 Peter Ruile |
| title_short | Biochemische und molekularbiologische Charakterisierung der Alpha-Glucuronidase von Thermotoga maritima MSB8 |
| title_sort | biochemische und molekularbiologische charakterisierung der alpha glucuronidase von thermotoga maritima msb8 |
| topic | Glucosiduronase alpha- (DE-588)4469090-3 gnd Thermotoga maritima (DE-588)4310313-3 gnd |
| topic_facet | Glucosiduronase alpha- Thermotoga maritima Hochschulschrift |
| url | http://bvbr.bib-bvb.de:8991/F?func=service&doc_library=BVB01&local_base=BVB01&doc_number=007727281&sequence=000001&line_number=0001&func_code=DB_RECORDS&service_type=MEDIA |
| work_keys_str_mv | AT ruilepeter biochemischeundmolekularbiologischecharakterisierungderalphaglucuronidasevonthermotogamaritimamsb8 |