Molekulare Mechanismen der Thrombozytenaggregation und Thrombozyten-Endothel-Adhäsion: experimentelle Befunde und klinische Bedeutung
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| Format: | Buch |
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1997
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| Beschreibung: | München, Techn. Univ., Habil.-Schr., 1997 |
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-I-
INHALTS VERZEICHNIS
1. EINLEITUNG . 1
1.1. BEDEUTUNG DER THROMBOZYTEN FUER DIE PRIMAERE BLUTSTILLUNG. 1
1.2. BEDEUTUNG MEMBRANSTAENDIGER GLYKOPROTEINE FUER DIE
THROMBOZYTENFUNKTION . 2
1. 3. SS3-INTEGRINE . 5
1.3.1. ALLGEMEINE FUNKTION, MOLEKULARSTRUKTUR UND REGULATION. 5
1.3.2. FIBRINOGENREZEPTOR (GPIIB-IIIA, XILBSS3, CD41/61) . 10
1.3.3. VITRONEKTINREZEPTOR (VNR,OTVSS3, CD51/61) . 13
1.4. BEDEUTUNG THROMBOZYTAERER MEMBRANGLYKOPROTEINE FUER DIE
INTERVENTIONELLE KARDIOLOGIE BEI ISCHAEMISCHER HERZERKRANKUNG. 15
1.5. FRAGESTELLUNGEN . 18
2. ALLGEMEINE METHODEN .
20
2.1. REAGENZIEN . 20
2.2. ANTIKOERPER UND PEPTIDE . 21
2.3. VERBRAUCHSMATERIALIEN UND GERAETE . 21
2.4. ZELLINIEN . 22
2.4.1. NABELSCHNURVENENENDOTHELZELLEN (HUVEC) . 22
2.4.2. CHINESISCHE HAMSTER OVARZELLEN (CHO-ZELLEN) . 22
2.5. THROMBOZYTEN . 24
2.5.1. ISOLATION . 24
2.5.2. THROMBOZYTENAGGREGATION . 25
2.5.3. LIGANDENBINDUNGSSTUDIEN . 25
BIBLIOGRAFISCHE INFORMATIONEN
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-II-
2.5.4. THROMBOZYTENADHAESION . 26
2.5.5. BESTIMMUNG DER PEPTID-INDUZIERTEN KONFORMATIONSAENDERUNG
VON ANBSS3 (GPIIB-IIIA) . 27
2.5.6. PHOTOAFFINITAETSMARKIERUNG MIT 8-AZIDO-[Y-^^P]ATP. 27
2.5.7. SDS-POLYAKRYLAMIDGELELEKTROPHORESE UND IMMUNOBIOTTING. 28
2.5.8. DURCHFLUSSZYTOMETRIE . 28
2.5.9. THROMBOZYTEN-ENDOTHEL-ADHAESION . 29
2.6. SS3-INTEGRIN TRANSFEKTANTEN . 30
2.6.1. PRAEPARATION UND FLUORESZENZMARKIERUNG . 30
2.6.2. KOAGGREGATIONSEXPERIMENTE . 31
2.6.3. DURCHFLUSSZYTOMETRISCHE ZWEIFARBENANALYSE UND
FLUORESZENZMIKROSKOPIE . 32
2.7. THROMBOZYTENMEMBRANEN . 32
2.7.1. PRAEPARATION . 32
2.7.2. AGGLUTINATION UND DURCHFLUSSZYTOMETRIE . 33
2.8. STATISTIK . 34
3. BEDEUTUNG DER SS3-INTEGRINE FUER DIE
THROMBOZYTENFUNKTION
. 35
3.1. BEDEUTUNG DER SS3-INTEGRINE FUER DIE AGGREGATION . 35
3.1.1. FIBRINOGEN-ABHAENGIGE AGGREGATION VON (XHBSS3 TRANSFEKTANTEN. 35
3.1.2. KOAGGREGATION VON TRANSFEKTANTEN MIT KONSTITUTIV "AKTIVIERTEN"
UND KONSTITUTIV "RUHENDEN" FIBRINOGENREZEPTOR . 39
-III-
3.2. BEDEUTUNG DER SS3-INTEGRINE FUER DIE
THROMBOZYTEN-ENDOTHEL-ADHAESION. 42
3.2.1. HETEROTYPISCHE AGGREGATION ZWISCHEN (XNBSS3- UND
A
VSS3-TRANSFEKTANTEN . 42
3.2.3. A
VSS3-VERMITTELTE THROMBOZYTENADHAESION AN DIE LUMINALE
SEITE KULTIVIERTER NABELSCHNURVENENENDOTHELZELLEN (HUVEC). 44
3.3. DISKUSSION . 49
4. BEDEUTUNG DES EXTRAZELLULAEREN ATP FUER DIE
FUNKTION DES FIBRINOGENREZEPTORS
GPIIB-IIIA (AILBSS3)
. 56
4.1. 8-AZIDO-[Y-32P]ATP PHOTOAFFINITAETSMARKIERUNG VON OQIBSS3. 56
4.2. 8-AZIDO-ATP HEMMT DIE FIBRINOGEN-VERMITTELTE
THROMBOZYTENAGGREGATION . 58
4.3. 8-AZIDO-ATP HEMMT DIE FIBRINOGENBINDUNG AN
DEN NICHTAKTIVIERTEN FIBRINOGENREZEPTORS OQIBSS3 . 60
4.4. AUSWIRKUNG VON RGD-PEPTIDEN AUF DIE PHOTOAFFINITAETSMARKIERUNG
VON ANBSS3 MIT 8-AZIDO-[Y-32P]ATP . 63
4.5. DISKUSSION . 65
5. AUSWIRKUNG VON EXTRAZELLULAEREN MG^+ AUF DIE
FUNKTION DES FIBRINOGENREZEPTORS
GPIIB-IIIA (AILBSS3). 68
5
.
1
.
AUSWIRKUNG VON MG2+ AUF DIE FIBRINOGEN-VERMITTELTE
AGGREGATION INTAKTER THROMBOZYTEN . 68
5.2. EINFLUSS VON EXTRAZELLULAEREN MG
2+ AUF DIE FUNKTION DES
FIBRINOGENREZEPTORS ISOLIERTER THROMBOZYTENMEMBRANEN. 69
5.3. DISKUSSION . 72
-IV-
6. BEDEUTUNG THROMBOZYTAERER MEMBRANGLYKOPROTEINE
FUER DIE SUBAKUTE STENTTHROMBOSE BEI PATIENTEN MIT
IMPLANTATION KORONARER GEFAESSSTUETZEN
. 74
6.1. VERGLEICHSSTUDIE ZWISCHEN PATIENTEN MIT KORONARER
IMPLANTATION VON GEFAESSSTUETZEN UND ELEKTIVER PTCA . 74
6.1.1. STUDIENDESIGN UND PATIENTEN . 74
6.1.2. STATISTISCHE AUSWERTUNG . 76
6.1.3. ERGEBNISSE . 76
6.2. PROSPEKTIVE UNTERSUCHUNG DER THROMBOZYTENFUNKTION BEI
PATIENTEN MIT IMPLANTATION VON KORONAREN GEFAESSSTUETZEN. 79
6.2.1. STUDIENDESIGN UND PATIENTEN . 79
6.2.2. STATISTISCHE AUSWERTUNG . 80
6.2.3. ERGEBNISSE . 81
6.2.4. DISKUSSION . 85
7. AUSWIRKUNG DER ANTITHROMBOTISCHEN THERAPIE
AUF DIE THROMBOZYTENFUNKTION BEI KORONARER
STENTIMPLANTATION .
88
7.1. STUDIENDESIGN UND PATIENTEN . 88
7.2. STATISTISCHE AUSWERTUNG . 90
7.3. ERGEBNISSE . 90
7.4. DISKUSSION . 93
8. BEDEUTUNG THROMBOZYTAERER MEMBRANGLYKOPROTEINE
FUER DIE REPERFUSION BEIM AKUTEN MYOKARDINFARKT
. 95
8.1. STUDIENDESIGN UND PATIENTEN . 95
-V-
8.2. METHODIK DER CHARAKTERISIERUNG DER THROMBOZYTENFUNKTION EX VIVO
UND IN VITRO . 97
8.2.1. DURCHFLUSSZYTOMETRIE . 97
8.2.2. BESTIMMUNG DER MIKROPARTIKEL . 97
8.2.3. EINFLUSS VON PATIENTENPLASMA AUF DIE FUNKTION NORMALER
THROMBOZYTEN . 98
8.2.4. EINFLUSS VON PATIENTENPLASMA AUF DIE ADHAESION NORMALER
THROMBOZYTEN
AN KULTIVIERTE ENDOTHELZELLEN. 98
8.2.5. STATISTISCHE AUSWERTUNG . 99
8.3. ERGEBNISSE . 99
8.3.1. THROMBOZYTAERE MEMBRANGLYKOPROTEINE IM AKUTEN
MYOKARDINFARKT VOR REKANALISATION . 99
8.3.2. THROMBOZYTAERE MEMBRANGLYKOPROTEINE IN DER REPERFUSION. 100
8.3.3. THROMBOZYTEN-ENDOTHEL-ADHAESION IN DER REPERFUSION . 104
8.4. DISKUSSION . 106
9. ZUSAMMENFASSENDE DISKUSSION
. 109
10.
ZUSAMMENFASSUNG
. 113
11.
LITERATURVERZEICHNIS
. 116
12. ABKUERZUNGEN . 129 |
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