Kontinuierliche Ammoniumentfernung im Bioreaktor zur Akkumulation von Wachstumsinhibitoren in der tierischen Zellkultur:
Gespeichert in:
| 1. Verfasser: | |
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| Format: | Buch |
| Sprache: | German |
| Veröffentlicht: |
1996
|
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| Beschreibung: | Bielefeld, Univ., Diss., 1996 |
| Beschreibung: | VI, 171, XIX S. Ill., graph. Darst. |
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INHALTSVERZEICHNIS
_
UEI
INHALTSVERZEICHNIS
VORBEMERKUNGEN
.
I
INHALTSVERZEICHNIS
.
III
I
EINLEITUNG
.
1
1.
EINFUEHRUNG
.
1
1.1
STOFFWECHSEL
IN
HYBRIDOM-ZELLEN
.
3
1.2
WACHSTUMSINHIBITOREN
.
8
2.
ARBEITSZIEL
.
9
3.
AMMONIUMENTFERNUNG
.
11
3.1
AMMONIUMREDUZIERUNG
DURCH
VERDUENNUNG
.
11
3.2
REDUZIERUNG
DER
AMMONIUMQUELLEN
.
11
3.3
SELEKTIVE
ENTFERNUNG
VON
AMMONIUM
.
12
3.3.1
MEMBRANPROZESSE
.
13
3.3.2
STOFFTRANSPORT
BEI
MEMBRANPROZESSEN
.
18
II
MATERIAL
UND
METHODEN
.
21
1.
ZELLINIEN
.
21
2.
KULTURMEDIEN
.
22
2.1
MEDIENOPTIMIERUNG
.
24
2.2
MEDIENHERSTELLUNG,
STERILISATION
UND
LAGERUNG
.
25
3.
STAMMHALTUNG
DER
ZELLEN
.
25
4.
KULTIVIERUNGSYSTEME
.
27
4.1
GEWEBEKULTURFLASCHEN
.
27
4.2
SUPERSPINNER
.
27
4.3
BIOREAKTOR
IM
2
LITER-MASSSTAB
.
29
5.
PROZESSFUEHRUNGEN
.
31
5.1
SATZWEISER
BETRIEB
.
31
5.2
WIEDERHOLT
SATZWEISER
BETRIEB
.
31
5.3
SATZWEISER
BETRIEB
MIT
ZUFUETTERUNG
.
31
5.4
PERFUSIONSBETRIEB
.
32
5.5
PERFUSIONSBETRIEB
MIT
KONTINUIERLICHER
MEDIENREZYKLISIERUNG
.
33
6.
AMMONIUMENTFERNUNG
.
34
6.1
MEMBRANSYSTEME
ZUR
AMMONIUMENTFEMUNG
.
34
6.2
VERFAHREN
ZUR
KONTINUIERLICHEN
AMMONIUMENTFEMUNG
.
35
6.2.1
VERFAHREN
1:
KONTINUIERLICHE
AMMONIUMENTFEMUNG
MIT
DEM
MEM
BRANKORB
AUS
ZELLHALTIGEM
KULTURUEBERSTAND
.
36
6.2.2
VERFAHREN
2:
KONTINUIERLICHE
AMMONIUMENTFEMUNG
MIT
HOHLFASERMO
DULEN
AUS
ZELLHALTIGEM
KULTURUEBERSTAND
.
37
I
NH
ALTS
V
ERZEICHNIS
IX
6.2.3
VERFAHREN
3:
KONTINUIERLICHE
AMMONIUMENTFEMUNG
NUT
HOHLFASERMO
DULEN
AUS
ZELLFREIEM
KULTURUEBERSTAND
.
39
6.3
STERILISATION
DER
MEMBRANSYSTEME
.
39
6.4
REINIGUNG
DER
MEMBRANSYSTEME
.
40
6.5
BESTIMMUNG
DES
STOFFMENGENSTROMS
VON
AMMONIUM
BEI
DER
ENTFER
NUNG
MIT
MEMBRANSYSTEMEN
.
40
7.
ZELLSPEZIFISCHE
PARAMETER
.
41
7.1
SATZWEISER
UND
WIEDERHOLT
SATZWEISER
BETRIEB
.
41
7.1.1
BILDUNGSRATEN
FUER
AMMONIUM
.
42
7.2
SATZWEISER
BETRIEB
MIT
ZUFUETTERUNG
.
43
7.3
PERFUSIONSBETRIEB
.
44
7.4
PERFUSIONSBETRIEB
MIT
KONTINUIERLICHER
MEDIENREZYKLISIERUNG
.
44
8.
ANALYTIK
.
46
8.1.1
ZELLZAHLBESTIMMUNG
NACH
DER
TRYPANBLAU-AUSSCHLUSSMETHODE
.
46
8.1.2
ZELLZAHL-UND-GROESSENBESTIMMUNG
MIT
CASY
1
.
46
8.2
BESTIMMUNG
VON
MYCOPLASMENKONTAMINATIONEN
.
47
8.3
GLUCOSE
UND
LACTATBESTIMMUNG
.
49
8.4
AMMONIUMBESTIMMUNG
.
49
8.5
OSMOLALITAETSBESTIMMUNG
.
50
8.6
BESTIMMUNG
DER
ANTIKOERPERKONZENTRATION
.
51
8.6.1
SANDWICH-ELISA
.
51
8.6.2
HPLC-GELCHROMATOGRAPHIE
.
54
8.7
AMINOSAEUREBESTIMMUNG
.
55
8.8
PROTEINBESTIMMUNG
DURCH
SDS-GELELEKTROPHORESE
.
56
8.9
STOFFTRENNUNG
DURCH
GELFILTRATION
.
57
8.10
ZELLAKTIVITAETSTEST
.
59
III
ERGEBNISSE
UND
DISKUSSION
.
63
1.
KULTIVIERUNG
DER
ZELLINIE
MAK
33
OHNE
AMMONIUMENTFER
NUNG
IM
PERFUSIONSBETRIEB
MIT
KONTINUIERLICHER
MEDIENREZY
KLISIERUNG
.
64
1.1
ADAPTIERUNG
DER
ZELLINIE
MAK
33
AN
SERUMFREIES
MEDIUM
.
64
1.2
KULTIVIERUNG
DER
ZELLINIE
MAK
33
IM
PERFUSIONSBETRIEB
MIT
KONTINUIER
LICHER
MEDIENREZYKHSIERUNG
IM
2
LITER
BIOREAKTOR
.
65
1.3
ZUSAMMENFASSUNG
UND
DISKUSSION
DER
ERGEBNISSSE
.
70
2.
KONTINUIERLICHE
AMMONIUMENTFERNUNG
MIT
EINEM
MEMBRAN
KORB
AUS
ZELLHALTIGEM
KULTURUEBERSTAND
.
72
2.1
VORVERSUCH
ZUR
BESTIMMUNG
DES
STOFFMENGENSTROMS
FUER
AMMONIUM
MIT
DEM
MEMBRANKORB
.
72
2.1.1
VERGLEICH
DES
VORVERSUCHS
MIT
DER
PERFUSIONSKULTIVIERUNG
.
73
2.2
SATZWEISE
KULTIVIERUNG
DER
ZELLINIE
MAK
33
MIT
ZUFUETTERUNG
IM
2
LITER
BIOREAKTOR
.
75
2.3
KONTINUIERLICHE
AMMONIUMENTFEMUNG
AUS
ZELLHALTIGEM
KULTURUEBER
STAND
MIT
DEM
MEMBRANKORB
BEI
SATZWEISER
KULTIVIERUNG
MIT
ZUFUETTE
RUNG
DER
ZELLINIE
MAK
33
IM
2
LITER
BIOREAKTOR
.
82
2.4
ZUSAMMENFASSUNG
UND
DISKUSSION
DER
ERGEBNISSE
.
87
INHALTSVERZEICHNIS
_
X
3.
KONTINUIERLICHE
AMMONIUMENTFERNUNG
MIT
HOHLFASERMODULEN
AUS
ZELLHALTIGEM
KULTURUEBERSTAND
.
89
3.1
KONTINUIERLICHE
AMMONIUMENTFERNUNG
MIT
DEM
HOHLFASERMODUL
MD
070
.
89
3.1.1
STROEMUNGSVERHAELTNISSE
IM
HOHLFASERMODUL
MD
070
.
89
3.1.2
VORVERSUCH
ZUR
BESTIMMUNG
DES
STOFFMENGENSTROMS
FUER
AMMONIUM
MIT
DEM
MODUL
MD
070
.
91
3.1.3
KONTINUIERLICHE
AMMONIUMENTFERNUNG
AUS
ZELLHALTIGEM
KULTURUEBER
STAND
MIT
DEM
HOHLFASERMODUL
MD
070
BEI
SATZWEISER
KULTIVIERUNG
DER
ZELLINIE
MAK
33
IM
2
LITER
BIOREAKTOR
.
93
3.1.3.1
TOXIZITAETSTEST
FUER
P-TOLUOLSULFONSAEURE
.
103
3.1.3.2
UEBERPRUEFUNG
DER
HYDROPHOBIZITAET
DER
HOHLFASERMEMBRAN
.
104
3.1.3.3
WEITERE
VERSUCHE
MIT
DEM
MODUL
MD
070
.
106
3.1.4
ZUSAMMENFASSUNG
UND
DISKUSSION
DER
ERGEBNISSE
.
106
3.2
KONTINUIERLICHE
AMMONIUMENTFERNUNG
MIT
DEM
HOHLFASERMODUL
MD
020
.
108
3.2.1
VORVERSUCH
ZUR
BESTIMMUNG
DES
STOFFMENGENSTROMS
FUER
AMMONIUM
MIT
DEM
MODUL
MD
020
.
108
3.2.2
KULTIVIERUNGEN
DER
ZELLINIE
MAK
33
IM
1
LITER
SUPERSPINNER
.
110
3.2.2.1
WIEDERHOLT
SATZWEISE
KULTIVIERUNG
DER
ZELLINIE
MAK
33
IM
1
LITER
SU
PERSPINNER
.
110
3.2.2.2
KONTINUIERLICHE
AMMONIUMENTFERNUNG
AUS
ZELLHALTIGEM
KULTURUEBER
STAND
MIT
DEM
HOHLFASERMODUL
MD
020
BEI
SATZWEISER
KULTIVIERUNG
DER
ZELLINIE
MAK
33
IM
1
LITER
SUPERSPINNER
.
122
3.2.2.3
ZUSAMMENFASSUNG
UND
DISKUSSION
DER
ERGEBNISSE
.
132
3.23
KULTIVIERUNGEN
DER
ZELLINIE
HB
58
IM
1
LITER
SUPERSPINNER
.
134
3.2.3.1
SATZWEISE
KULTIVIERUNG
DER
ZELLINIE
HB
58
IM
1
LITER
SUPERSPINNER
.
134
3.2.3.2
KONTINUIERLICHE
AMMONIUMENTFERNUNG
AUS
ZELLHALTIGEM
KULTURUEBER
STAND
MIT
DEM
HOHLFASERMODUL
MD
020
BEI
SATZWEISER
KULTIVIERUNG
DER
ZELLINIE
HB
58
IM
1
LITER
SUPERSPINNER
.
138
3.2.3.3
ZUSAMMENFASSUNG
UND
DISKUSSION
DER
ERGEBNISSE
.
141
3.3
ZUSAMMENFASSUNG
UND
DISKUSSION
DER
ERGEBNISSE
BEI
DER
KONTINUIERLI
CHEN
AMMONIUMENTFERNUNG
AUS
ZELLHALTIGEM
KULTURUEBERSTAND
MIT
DEN
HOHLFASERMODULEN
MD
070
UND
MD
020
.
141
4.
KONTINUIERLICHE
AMMONIUMENTFERNUNG
MIT
HOHLFASERMODULEN
AUS
ZELLFREIEM
KULTURUEBERSTAND
.
143
4.1
VERSUCHE
MIT
DER
ZELLINIE
HB
58
.
144
4.1.1
KULTIVIERUNG
DER
ZELLINIE
HB
58
IM
PERFUSIONSBETRIEB
MIT
KONTINUIERLI
CHER
MEDIENREZYKLISIERUNG
UND
KONTINUIERLICHER
AMMONIUMENTFERNUNG
AUS
ZELLFREIEM
KULTURUEBERSTAND
MIT
DEM
HOHLFASERMODUL
MD
020
.
144
4.1.2
NACHWEIS
VON
INHIBITIONEN
IM
BIOLOGISCHEN
TEST
NACH
GELFILTRATION
DES
KULTURUEBERSTANDES
.
152
VJ
_
INHALTSVERZEICHNIS
4.1.3
ZUSAMMENFASSUNG
UND
DISKUSSION
DER
ERGEBNISSE
.
156
4.2
VERSUCHE
MIT
DER
ZELLINIE
MAK
33
.
156
4.2.1
KULTIVIERUNG
DER
ZELLINIE
MAK
33
IM
PERFUSIONSBETRIEB
MIT
KONTINUIER
LICHER
MEDIENREZYKLISIERUNG
UND
KONTINUIERLICHER
AMMONIUMENTFEMUNG
AUS
ZELLFREIEM
KULTURUEBERSTAND
MIT
DEM
HOHLFASERMODUL
MD
070
.
157
4.2.2
NACHWEIS
VON
INHIBITIONEN
IM
BIOLOGISCHEN
TEST
NACH
GEIFILTRATION
DES
KULTURUEBERSTANDES
.
164
4.2.3
ZUSAMMENFASSUNG
UND
DISKUSSION
DER
ERGEBNISSE
.
167
IV
ZUSAMMENFASSUNG
UND
AUSBLICK
.
169
ANHANG
.
I
A
LITERATURVERZEICHNIS
.
I
B
ABKUERZUNGSVERZEICHNIS
.
XVII |
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