Metabolisierung von Xenobiotika durch pflanzliche Zellkulturen und Enzyme:
Gespeichert in:
| 1. Verfasser: | |
|---|---|
| Format: | Buch |
| Sprache: | German |
| Veröffentlicht: |
Aachen
Shaker
1997
|
| Ausgabe: | Als Ms. gedr. |
| Schriftenreihe: | Forschungsverbund Agrarökosysteme <München>: FAM-Bericht
17 |
| Schlagworte: | |
| Online-Zugang: | Inhaltsverzeichnis |
| Beschreibung: | Zugl.: München, Techn. Univ., Diss., 1997 |
| Beschreibung: | 141 S. graph. Darst. |
| ISBN: | 3826527518 |
Internformat
MARC
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Datensatz im Suchindex
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|---|---|
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I.
EINLEITUNG
1
1.
DEFINITION
VON
XENOBIOTIKA
1
2.
ENTGIFTUNGSSTOFFWECHSEL
IN
TIER
UND
PFLANZE
1
3.
DAS
DREIPHASENMODELL
DER
DETOXIFIZIERUNG
3
3.1
PHASE-I-REAKTIONEN
5
3.1.1
P-450
MONOOXYGENASEN
IN
PFLANZEN
5
3.1.1.1
GENERELLE
EIGENSCHAFTEN
UND
FUNKTION
6
3.1.1.2
XENOBIOTIKAMETABOLISMUS
UND
HERBIZIDSELEKTIVITAET
6
3.2
PHASE-UE-REAKTIONEN
8
3
2.1
KONJUGATION
MIT
AMINOSAEUREN
8
3.2.2
KONJUGATION
MIT
GLUTATHION
9
3.2.3
GLYCOSIDIERUNGEN
10
3.2.3.1
O-GLUCOSYLTRANSFERASEN
(O-GT)
10
3.2.3.2N-GLUCOSYLTRANSFERASEN(N-GT)
11
3.2.3.3
S-GLUCOSYLTRANSFERASEN
(S-GT)
11
3.2.3.4
GLUCOSEESTER
12
3.3
PHASE-IUE-REAKTIONEN
12
4.
AUFGABENSTELLUNG
13
IL
MATERIAL
UND
METHODEN
15
1.
MATERIAL
15
1.1
CHEMIKALIEN
15
1.1.1
LOESUNGSMITTEL
UND
SAEUREN
15
1.1.2
RADIOCHEMIKALIEN
1
6
1.1.3
REFERENZSUBSTANZEN
UND
SUBSTRATE
FUER
ENZYMTESTS
16
1.1.4
SAFENER
17
1.2
PUFFERSYSTEME
18
1.3
UNTERSUCHTE
PFLANZENSCHUTZMITTEL
19
1.4
SONSTIGE
CHEMIKALIEN/VERBRAUCHSMATERIAL
19
1.5
GERAETE
20
1.5.1
HPLC
AUSSTATTUNG
20
1.5.2
FPLC
ANLAGE
21
1.5.3
GC/MS-SYSTEM
21
1.6
SUSPENSIONSZELLKULTUREN
22
1.6.1
CHARAKTERISIERUNG
DER
WEIZENSUSPENSIONSZELLKULTUREN
22
1.7
PFLANZENMATERIAL
22
2.
METHODEN
23
2.1
ANZUCHT
UND
SUBKULTIVIERUNG
DER
SUSPENSIONSZELLKULTUREN
23
2.2
METABOLISIERUNGSTESTS
MIT
SUSPENSIONSZELLKULTUREN
23
2.3
ISOLIERUNG
VON
METABOLITEN
24
2.3.1
ISOPROTURONMETABOLITE
AUS
WEIZENSUSPENSIONSZELLKULTUREN
24
2.3.2
ISOLIERUNG
VON
MALEINSAEUREHYDRAZID-SS-D-GLUCOSID
25
2.4
DFINNSCHICHTCHROMATOGRAPHIE
(DC)
25
2.5
HOCHAUFLOESENDE
FLUESSIGKEITSCHROMATOGRAPHIE
(HPLC)
26
2.5.1
HPLC
VON
ISOPROTURON
UND
IPU-METABOLITEN
26
2.5.2
SEMIPRAEPARATIVE
HPLC
ZUR
AUFREINIGUNG
VON
IPU-METABOLITEN
27
2
5.3
HPLC
VON
6-OH-BENTAZON
27
2.5.4
HPLC
VON
QUINMERAC
28
2.5.5
HPLC
VON
MALEINSAEUREHYDRAZID
29
2.5.6
HPLC
VON
S-TRIAZINEN
29
2.5.7
HPLC
VON
2,4-D
30
2.6
MESSUNG
DER
RADIOAKTIVITAET
VON
14
C-MARKIERTEN
SUBSTANZEN
31
2.6.1
RADIOAKTIVITAETSBESTIMMUNG
AUF
DC-PLATTEN
31
2.6.2
RADIOAKTIVITAET
IN
FLUESSIGEN
PROBEN
31
2.6.3
RADIOAKTIVITAETSMESSUNG
IN
HPLC-ELUATEN
32
2.6.4
RADIOAKTIVITAETSBESTIMMUNG
FESTER
PROBEN
32
2.7
STRUKTURAUFKLAERUNG
VON
METABOLITEN
UND
KONJUGATEN
32
2.7.1
STRUKTURAUFKLAERUNG
VON
ISOPROTURONMETABOLITEN
32
2.7.1.1
HPLC/MS
32
2.7.1.2
KEMRESONANZ-SPEKTROSKOPIE
(NMR)
32
2.7.2
STUKTURAUFKLAERUNG
DES
MALEINSAEUREHYDRAZID-SS-D-GLUCOSIDS
(MH-G)
33
2.7.2.1
SAURE
HYDROLYSE
33
2.7.2
2
ENZYMATISCHER
VERDAU
MIT
SS-GLUCOSIDASE
33
2.7.2.3
KAPILLARZONENELEKTROPHORESE
(CZE)
34
2.7.2
4
GC/MS
35
2.7.2.5
FOURIER-TRANSFORMATION-INFRAROT-SPEKTROSKOPIE
(FT-IR)
37
2.7.2.6NMR
37
2.8
GEWINNUNG
VON
PROTEINEXTRAKTEN
37
2.8.1
HERSTELLUNG
EINES
PROTEINEXTRAKTES
ZUR
MESSUNG
VON
P-450
MONOOXY
GENASEAKTIVITAETEN
38
2.8.2
HERSTELLUNG
EINES
PROTEINEXTRAKTES
ZUR
MESSUNG
DER
GLUTATHION
S-TRANSFERASEAKTIVITAETEN
38
2.8.3
HERSTELLUNG
EINES
PROTEINEXTRAKTES
ZUR
MESSUNG
VON
GLUCOSYL
TRANSFERASEAKTIVITAETEN
(METHODE
I)
39
2.8.3.1
GEWINNNUNG
DES
ROHEXTRAKTES
39
2.8.3.2
AMMONIUMSULFATFAELLUNG
39
2.8.3.3
HOCHAUFLOESENDE
CHROMATOGRAPHIE
AUF
MONO
Q
(FPLC)
40
2.8.4
ALTERNATIVE
HERSTELLUNG
EINES
PROTEINEXTRAKTES
ZUR
MESSUNG
VON
GLUCOSYITRANSFERASEAKTIVITAETEN
(METHODE
II)
41
2.9
PROTEINBESTIMMUNG
41
2.10
MESSUNG
VON
ENZYMAKTIVITAETEN
42
2.10.1
CYTOCHROM
P-450
MONOOXYGENASEN
42
2.10.2
GLUTATHION
S-TRANSFERASEN
43
2.10.3
GLUCOSYLTRANSFERASEN
44
2.10.3.1
BESTIMMUNG
DER
O-GLUCOSYLTRANSFERASEAKTIVITAETEN
44
2.10.3.2
BESTIMMUNG
DER
MALEINSAEUREHYDRAZID-O-GLUCOSYLTRANSFERASEAKTIVITAET
46
2.10.3.3
BESTIMMUNG
DER
GLUCOSYITRANSFERASEAKTIVITAETEN
NACH
METHODE
II
47
2.10.3.4
BESTIMMUNG
DER
DCA-N-GLUCOSYLTRANSFERASEAKTIVITAET
47
3.
STATISTIK
48
HL
ERGEBNISSE
49
1.
CHARAKTERISIERUNG
DER
WEIZENZELLKULTUR
49
2.
METABOLISIERUNGSTESTS
IN
SUSPENSIONSZELLKULTUREN
50
2.1
TERBUTHYLAZIN
50
2.2
QUINMERAC
52
2.3
2,4-DICHLORPHENOXYESSIGSAEURE
(2,4-D)
53
2.4
ISOPROTURON
55
2.4.1
IDENTIFIZIERUNG DER
ISOPROTURONMETABOLITE
58
2.4.1.1
HPLC
MIT
AUTHENTISCHEN
STANDARDS
58
2.4.1.2
ELECTROSPRAY/MS
61
2.4.1.3
NMR
62
2.4
2
VERLAUF
DER
KONZENTRATIONEN
DER
IDENTIFIZIERTEN
METABOLITEN
66
2.4.3
METABOLISIERUNGSSCHEMA
FUER
ISOPROTURON
67
2.5
MALEINSAEUREHYDRAZID
68
2.5.1
WEITERE
CHARAKTERISIERUNG
DES
MALEINSAEUREHYDRAZIDMETABOLITEN
69
2.5.1.1
SAURE
HYDROLYSE
69
2.5.1.2GC/MS
70
2.5.1.3
MS
MIT
FESTPHASENEINLASS
71
2.5.1.4
FT-IR
72
2.5.1.5
NMR
74
3.
ENZYMATISCHE
UNTERSUCHUNGEN
76
3.1
CYTOCHROM
P-450
MONOOXYGENASESYSTEM
76
3.1.1
NACHWEIS
VON
CYTOCHROM
P-450
MONOOXYGENASEAKTIVITAETEN
GEGENUEBER
PHENYLHAMSTOFFEN
76
3.1.1.1
ISOPROTURON
77
3.1.1.2
CHLORTOLURON
79
3.2
GLUTATHION
S-TRANSFERASEN
79
3.3
GLUCOSYLTRANSFERASEN
80
3.3.1
NACHWEIS
VON
O-GLUCOSYLTRANSFERASEAKTIVITAETEN
81
3.3.1.1
O-GT
AKTIVITAET
GEGENUEBER
CHLORIERTEN
PHENOLEN
81
3.3.1.2
MH-O-GT
AKTIVITAETEN
IN
ZELLKULTUREN
UND
NUTZPFLANZEN
83
3.3.2
NACHWEIS
VON
N-GLUCOSYLTRANSFERASEAKTIVITAETEN
GEGENUEBER
3,4-DCA
86
3.3
.3
SPEZIFISCHE
O
UND
N-GLUCOSYLTRANSFERASEAKTIVITAETEN
IN
PROTEINEXTRAKTEN
NACH
METHODE
II
88
3.4
EIGENSCHAFTEN
DER
MH-O-GT
88
3.4.1
ERMITTLUNG
DES
TEMPERATUROPTIMUMS
89
3.4.2
ERMITTLUNG
DES
PH-OPTIMUMS
89
3.4.3
ZEITABHAENGIGKEIT
DER
REAKTION
90
3.4.4
PROTEINABHAENGIGKEIT
92
3.4.5
ANREICHERUNGSPROZEDUR
92
3.4.6
KINETISCHE
KONSTANTEN
94
3.4.7
ENZYMSTABILITAET
95
3.4.8
SUBSTRATSPEZIFITAET
95
3.5
ENTWICKLUNGSABHAENGIGKEIT
VON
GLUCOSYLTRANSFERASEN
96
3.6
GT
AKTIVITAETEN
IM
VERLAUF
DES
WACHSTUMS
EINER
WEIZENSUSPENSIONS
ZELLKULTUR
97
3.7
MODULATION
VON
ENZYMAKTIVITAETEN
98
3.7.1
EINFLUSS
MONO
UND
DIVALENTER
IONEN
98
3.7.2
INDUZIERBARKEIT
VON
ENZYMAKTIVITAETEN
99
3.7.2.1
INDUKTION
VON
GLUCOSYLTRANSFERSEAKTIVITAETEN
DURCH
SAFENER
100
3.7.2.2
INDUKTION
DURCH
ELICITIERUNG
101
3.7.3
INHIBIERBARKEIT
VON
ENZYMAKTIVITAETEN
102
3.7.3.1
HEMMBARKEIT
DER
ISOPROTURON
P-450
MONOOXYGENASEAKTIVITAET
102
3.7.3.2
HEMMBARKEIT
VON
GLUCOSYLTRANSFERASEN
103
IV.
DISKUSSION
104
1.
HETEROTROPHE
FFLANZEN-SUSPENSIONSZELLKULTUREN
ALS
MODELLSYSTEM
104
1.1
METABOLISMUSSTUDIEN
MIT
PFLANZLICHEN
SUSPENSIONSZELLKULTUREN
106
2.
UNTERSUCHUNGEN
DER
AM
XENOBIOTIKAMETABOLISMUS
BETEILIGTEN
ENZYM
SYSTEME
113
2.1
CYTOCHROM
P-4S0
MONOOXYGENASEN:
DETOXIFIZIERUNG
VON
ISOPROTURON
114
2.2
DUCOSYLTRANSFERASEN
114
3.
BEDEUTUNG
ENTGIFTENDER
ENZYMSYSTEME
FIIR
DEN
METABOLISMUS
VON
XENOBIOTIKA
UND
DIE
SELEKTIVITAET
VON
HERBIZIDEN
119
4.
ANBINDUNG
DER
ARBEITEN
AN
DEN
FORSCHUNGSVERBUND
AGRAROEKOSYSTEME
MUENCHEN
(FAM)
121
5.
AUSBLICK
122
V.
ZUSAMMENFASSUNG
123
VL
LITERATURVERZEICHNIS
126 |
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| author | Haas, Matthias |
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| discipline | Chemie / Pharmazie Biologie Chemie Agrarwissenschaft Pflanzenbau |
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