Untersuchungen zu Standardpräparationen von Immunglobulinen aus dem Dotter von Eiern verschiedener Wirtschaftsgeflügelspezies:
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1996
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INHALTSVERZEICHNIS
SEITE
1
EINLEITUNG
1
2.
LITERATURUEBERSICHT
5
2.1.
DASIMMUNSYSTEM
5
2.2.
DAS
AVIAERE
IMMUNSYSTEM
8
2.2.1.
BESONDERHEITEN
UND
PHYLOGENETISCHE
EINORDNUNG
8
2.2.2.
IMMUNGLOBULINKLASSEN
DER
AVES
9
2.3,
MATERNALER
ANTIKOERPERSCHUTZ
11
2.4.
DAS
EIDOTTER
ALS
QUELLE
VON
ANTIKOERPERN
14
2.4.1.
DIE
ZUSAMMENSETZUNG
DES
DOTTERS
14
2.4.2.
STANDARDVERFAHREN
ZUR
GEWINNUNG
VON
ANTIKOERPERN
AUS
DEM
DOTTER
17
2.5.
VITELLINE
ANTIKOERPER
20
2.5.1.
EIGENSCHAFTEN
DER
VITELLINEN ANTIKOERPER
20
2.5.2. EINSATZ
VITELLINER
ANTIKOERPER
IN
THERAPIE
UND
DIAGNOSTIK
24
3.
MATERIAL
UND
METHODEN
31
3.1.
REINIGUNGSVERFAHREN
FUER
IMMUNGLOBULINE
AUS
DEM
DOTTER
31
3.1.1. SEPARATION
BEI-20C
31
3.1.2.
AMMONIUMSULFATFAELLUNG
(AMS-FAELLUNG)
31
3.1.3.
POLYETHYLENGLYCOLLFAELLUNG
(PEG-FAELLUNG) 32
3.1.4. ENTFETTUNG
MITTELS
DEXTRANSULFAT
KOMBINIERT
MIT
EINER
NATRIUMSULFATFAELLUNG
32
3.1.5. ENTFETTUNG
MITTELS
CHLOROFORM
33
3.1.6.
MISCHBETT-IONENAUSTAUSCHVERFAHREN
(BAKERBONDABX)
33
3.2.
SDS-POLYACRYLAMIDGELELEKTROPHORESE
(SDS-PAGE)
34
3.3.
DENSITOMETRIE
36
3.4. HOCHREINIGUNG
DER
ANTIKOERPER
IN
DER
HPLC
38
3.5.
MOLEKULARGEWICHTSBESTIMMUNG
DER
EIWEISSMOLEKUELE
38
INHALTSVERZEICHNIS
3.5.1.
AUSWERTUNG
DER
SDS-PAGE
UND
HPLC
MITTELS
NICHTLINEARER
REGRESSION
38
3.5.2.
SPALTUNG
DER
IMMUNGLOBULINE
MIT
MERCAPTOETHANOL
NACH
BROCK
(AMBROSIUS,
1978)
41
3.6.
TIERE:
HALTUNGSSYSTEM,
IMMUN
UND
ZUCHTSTATUS,
ALTER
41
3.7.
UNTERSUCHUNGEN
ZU
KREUZREAKTIVITAETEN
ZWISCHEN
DEN
42
UNTERSUCHTEN
ANTIKOERPERN
3.7.1.
ENZYMMARKIERUNG
DER
ANTI-SPEZIES-KONJUGATE
42
3.7.2.
IMMUNOBLOT
42
3.7.3.
IMMUNOLOGISCHE
KREUZREAKTIONEN
IM
DOT-BLOT
44
3.7.4.
IMMUNOLOGISCHE
KREUZREAKTIONEN
IM
ELISA
44
3.8.
UNTERSUCHUNGEN
ZUM
STAPHYLOKOKKEN-PROTEIN-A
UND
47
STREPTOKOKKEN-PROTEIN-G-BINDUNGSVERHALTEN
VON
AVIAEREN
ANTIKOERPERN
MITTELS
ENZYMIMMUNOASSAY
3
.9.
EIWEISSBESTIMMUNG
NACH
LOWRY
48
4.
ERGEBNISSE
49
4.1.
DARSTELLUNG
VON
REINHEITSGRAD
UND
AUSBEUTE
DER
49
VERSCHIEDENEN
REINIGUNGS-VERFAHREN
BEI
DEN
EINZELNEN
SPEZIES
AN
HAND
DER
DENSITOMETRISCHEN
AUSWERTUNG
UND
DER
PROTEINBESTIMMUNG
4.2.
SPEZIESVERGLEICH
85
4.3.
IMMUNOLOGISCHE
KREUZREAKTIVITAETEN
DER
UNTERSUCHTEN
88
ANTIKOERPER
4.4.
UNTERSUCHUNGEN
ZUM
PROTEIN-A
UND
PROTEIN-G-
94
BINDUNGVERHALTEN
DER
AVIAEREN
ANTIKOERPER
4.5.
SPALTUNG
DER
IMMUNGLOBULINE
95
5.
DISKUSSION
97
5.1.
VERFAHREN
ZUR
PRAEPARATION
VON
IGY
AUS
EIDOTTER
97
5.2.
TIERE:
HALTUNGSSYSTEM,
IMMUN-UND
ZUCHTSTATUS
110
5.3.
SDS-PAGE
UND
HPLC
112
5.4.
PROTEIN-A
UND
PROTEIN-G-BINDUNGSVERMOEGEN
VON
ANTIKOERPERN
117
INHALTSVERZEICHNIS
5.5.
UNTERSUCHUNGEN
ZU
KREUZREAKTIVITAETEN
ZWISCHEN
DEN
119
DOTTERANTIKOERPERN
DER
UNTERSUCHTEN
SPEZIES
6.
ZUSAMMENFASSUNG
125
7.
SUMMARY
127
8.
LITERATUR
129 |
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