Fanconi Anämie: molekularer Defekt im Sauerstoffmetabolismus
Gespeichert in:
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| Format: | Abschlussarbeit Buch |
| Sprache: | German |
| Veröffentlicht: |
1997
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INHALTSVERZEICHNIS
1
ALLGEMEINER
TEIL
.
1
1.1
F
ANCONI
A
NAEMIE
.
1
12
S
AUERSTOFF
UND
REAKTIVE
S
AUERSTOFFARTEN
(ROI).
4
1.3
A
NTIOXIDATIVE
A
BWEHRMECHANISMEN
.
9
2
AUFGABENSTELLUNG
.
11
3
ERGEBNISSE
.
13
3.1
N
ACHWEIS
VON
ROI
UND
DIE
B
ESTIMMUNG
DER
L
IHDPEROXIDATION
.
13
3.1.1
ALLGEMEIN
.
13
3.12
NACHWEIS
VON
SUPEROXIDRADIKALEN
(02*)
.
14
3.13
LIPIDPEROXIDATION
.
15
32
T
HIOREDOXIN
.
19
33
U
NIERSUCHUNGEN
AN
ROI
GENERIERENDEN
S
YSTEMEN
.
22
33.1
SAUERSTOFFVERBRAUCH
.
22
332
XANTHIN-DEHYDROGENASELOXIDASE
.
26
333
DAS
CYTOCHROM
P-450
SYSTEM
.
28
3.4
E
ISENSTOFFWECHSEL
.
38
3.4.1
ACONITASE
.
38
3.42
DIE
HAEMOXYGENASE
.
39
3.43
FERRITIN
.
54
3.4.4
EISENGEHALT
IN
FIBROBLASTEN
.
56
3.45
HAEMGEHALT
.
57
3.5
NF
K
B
.
58
4
DISKUSSION
.
62
5
ZUSAMMENFASSUNG
.
68
6
MATERIAL
UND
METHODEN
.
70
6.1
Z
ELLKULTUR
UND
Z
ELLBIOLOGIE
.
70
6.1.1
MATERIAL
.
70
6.12
ZELLINIEN
.
71
6.13
ZELLKULTURBEDINGUNGEN
.
72
6.1.4
UMSETZEN
VON
ZELLEN
.
72
6.15
EINFRIEREN
UND
AUFTAUEN
VON
ZELLEN
.
73
6.1.6
MYCOPLASMENNACHWEIS
.
74
6.1.7
BEHANDLUNG
VON
ZELLKULTUREN
GEGEN
MYCOPLASMEN
.
76
6.1.8
ZELLKERNFAERBUNG
.
76
6.1.9
BESTIMMUNG
DER
ZELLVITALITAET
.
77
6.1.10
TRANSFEKTION
EUKARYONTER
ZELLEN
.
79
6.1.11
BESTIMMUNG
DES
SAUERSTOFFVERBRAUCHS
.
80
6.2
B
IOCHEMIE
.
.
81
62.1
PROTEINBESTIMMUNG
.
81
622
PRAEPARATION
VON
KERNEXTRAKTEN
JUR
NFKB-ASSAYS
.
82
623
YYBAND-SHIFT-ASSAY
"
ZUR
BESTIMMUNG
DER
NF-KB
AKTIVITAET.
.
83
62.4
BESTIMMUNG
DER
PHGPX-AKTIVITAET
AUS
ZELLEXTRAKTEN
.
83
623
BESTIMMUNG
DER
CYT
P-4501A2
AKTIVITAET.
.
85
62.6
BESTIMMUNG
DER
ACONITASEAKTIVITAET
.
85
62.7
BESTIMMUNG
DER
FERRITINKONZENTRATION
.
86
62.8
BESTIMMUNG
DES
HAEMGEHALTES
.
86
62.9
MALONDIALDEHYDBESTIMMUNG
.
87
62.10
MIKROSOMENPRAEPARATION
.
87
62.11
BESTIMMUNG
DER
HAEMOXYGENASEAKTIVITAET
.
87
62.12
SDS-PROTEINGELELEKTROPHORESE
.
89
6.2.13
PROTEINTRANSFER
AUF
NITROZELLULOSEMEMBRAN
(WESTERN-BLOT)
.
91
6.3
M
OLEKULARBIOLOGIE
.
93
63.1
ISOLIERUNG
CYTOPLASMATISCHER
RNA
AUS
FIBROBLASTEN
.
93
632
CDNA
SYNTHESE
.
94
633
ENDMARKIERUNG
VON
DNA-FRAGMENTEN
MIT
KLENOW
POLYMERASE
.
94
6.3.4
PCR
.
95
635
AGAROSEGELELEKTROPHORESE
.
96
63.6
DNA-ISOLIERUNG
AUS
E.
COLI
.
9/7
63.7
RESTRIKTIONSVERDAU
.
99
63.8
BESTIMMUNG
DER
NUKLEINSAEUREKONZENTRATION
.
99
63.9
FRAGMENTISOLIERUNG
.
99
63.10
KLONIERUNG
VON
PCR-FRAGMENTEN
.
100
63.11
HERSTELLUNG
KOMPETENTER
BAKTERIEN
.
101
63.12
TRANFFBRMATION
VON
BAKTERIEN
.
102
63.13
ISOLIERUNG
VON
GENOMISCHER
DNA
AUS
HUMANEN
HAUTFIBROBLASTEN
.
103
63.14
SEQUENZIERUNG
DOPPELSTRAENGIGER
DNA
.104
7
LITERATUR
.
107
8
ABKUERZUNGEN
.
120 |
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