Methoden der Membranphysiologie:
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Heidelberg [u.a.]
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1997
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|---|---|
| adam_text | Inhalt
Vorwort 9
Abkürzungen 13
1. Einleitung 15
1.1 Literatur 20
2. Struktur und Funktion biologischer Membranen 21
2.1 Lipide und ihre Eigenschaften 22
2.2 Proteine und ihre Eigenschaften 24
2.2.1 Ionentransportproteine 26
2.2.2 Andere Proteine 34
2.3 Wechselwirkungen zwischen Lipiden und Proteinen 35
2.4 Literatur 35
3. Biophysikalische Grundlagen der Membranphysiologie 37
3.1 Membranen als thermodynamische Systeme 37
3.2 Transporttheorie 38
3.3 Elektrische Eigenschaften biologischer Membranen 39
3.4 Das Membranpotential 41
3.5 Literatur 44
4. Membranmodelle 47
4.1 Monolayer 47
4.2 Planare Bilayer 49
4.3 Vesikel 52
4.4 Computermodelle 53
4.5 Literatur 56
6 Methoden der Membranphysiologie
5. Methoden zur Untersuchung von biologischen
Membranen und Modellmembranen 59
5.1 Elektrophysiologie 60
5.1.1 Intra und extrazelluläre Ableitungen 64
5.1.2 Voltage und Current Clamp Messungen 66
5.1.3 Ionensensitive Mikroelektroden 69
5.1.4 Die Patch Clamp Technik 71
5.1.5 Elektrische Messungen an planaren Bilayern 74
5.2 Optische Messungen 74
5.2.1 Spektroskopie 75
5.2.2 Fluoreszierende Farbstoffe und ihre Anwendung 76
5.3 Biochemische Methoden 79
5.3.1 Reinigung, Analyse und Synthese
von Membranlipiden 79
5.3.2 Reinigung und Analyse von
membrangebundenen Proteinen 81
5.4 Molekularbiologische Methoden 83
5.4.1 Expression von Membranproteinen in Wirtszellen 83
5.4.2 Aufklärung der Primärstruktur von Proteinen 84
5.5 Methoden zur Strukturaufklärung 85
5.5.1 Räumliche Membranstruktur 86
5.5.2 Dreidimensionale Struktur von Proteinen 86
5.6 Literatur 87
6. Experimente an Monolayern 89
6.1 Herstellung von Monolayern 89
6.2 Druck Flächen Diagramme 91
6.3 Elektrische Messungen an Monolayern 93
6.4 Optische Messungen an Monolayern 95
6.5 Literatur 97
7. Experimente an planaren Bilayern 99
7.1 Herstellung planarer Bilayer 101
7.2 Elektrische Messungen an planaren Bilayern 105
7.2.1 Elektrische Eigenschaften reiner Lipidbilayer 105
7.2.2 Untersuchung von einfachen Transportsystemen
in planaren Bilayern mit
elektrophysiologischen Methoden 108
[ Inhalt 7
7.3 Rekonstitution von Membranproteinen
[ in planare Bilayer 112
7.4 Optische Messungen an planaren Bilayern 114
7.5 Literatur 116
8. Experimente an Vesikeln 117
8.1 Herstellung von Vesikeln 117
8.1.1 Reine Lipidvesikel 118
8.1.2 Membranfragmentvesikel 119
8.2 Einbau von Proteinen in Vesikel 120
8.3 Physikalische Eigenschaften
von Vesikeln und ihre Messung 121
8.4 Messung des Transports über Vesikelmembranen 122
8.4.1 Elektrische Messungen 122
8.4.2 Flußmessungen 124
8.5 Literatur 128
9. Experimente an Membranen biologischer Zellen 129
9.1 Klassische Elektrophysiologie 129
9.1.1 Messungen an einzelnen Zellen 129
9.1.2 Messungen an der intakten Retina 133
9.2 Patch Clamp Experimente 136
9.2.1 Patch Clamp Messungen an
isolierten retinalen Neuronen 137
9.2.2 Patch Clamp Messungen an
Gliazellen in der intakten Retina 139
9.3 Optische Messungen mit Fluoreszenzfarbstoffen 143
9.3.1 Ionentransport über die Membranen isolierter Zellen 143
9.3.2 Calciumtransport über Zellmembranen
der intakten Retina 144
9.4 Literatur 146
10. Computersimulationen und Modelle 149
10.1 Membranmodelle 150
10.2 Modelle des Ionentransports durch Membranen 152
10.3 Modelle von Membranverbänden 155
10.4 Literatur 158
8 Methoden der Membranphysiologie
11. Schlußbemerkungen 159
Anhang: Verzeichnis nützlicher Bezugsquellen 161
Allgemeiner Laborbedarf 161
Elektronische Bauelemente 161
Chemikalien 162
Computer, Zubehör und Software 162
Elektrophysiologie 162
Feinmechanik 163
Filmwaage 163
Glaskapillaren 163
Lipide 163
Meßtechnik allgemein 163
Mikroskope 164
Neurochemikalien 164
Optik und Video 164
Index 167
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