Struktur, Expression und gezielte Inaktivierung von cell, einem vermutlich Cellobiohydrolase-codierenden Gen von Claviceps purpurea:
Gespeichert in:
1. Verfasser: | |
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Format: | Abschlussarbeit Buch |
Sprache: | German English |
Veröffentlicht: |
Berlin [u.a.]
Cramer
1997
|
Schriftenreihe: | Bibliotheca mycologica
166 |
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Beschreibung: | XI, 100 S. Ill., graph. Darst. |
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INHALTSVERZEICHNIS
ABBILDUNGSVERZEICHNIS
.
VIII
TABELLENVERZEICHNIS
.X
ABKUERZUNGSVERZEICHNIS
.
XI
1.
EINLEITUNG
.
1
1.1
CLAVICEPS
PURPUREA
.
1
1.2
VERLAUF
DER
INFEKTION
.
1
1.3
ENZYMATISCHE
HYDROLYSE
VON
CELLULOSE
.
6
1.4
GEZIELTE
GENINAKTIVIERUNG
ZUR
ANALYSE
MOEGLICHER
PATHOGENITAETSFAKTOREN
.
8
1.5
PLOIDIE
BEI
PILZEN
.
10
2.
MATERIAL
UND
METHODEN
.
13
2.1
BAKTERIENSTAEMME
UND
IHRE
ANZUCHT
.
13
2.2
CLAVICEPS
PURPUREA-SXAEMME
UND
IHRE
ANZUCHT
.
13
2.3
SECALE
CEREALE
.
14
2.4
PLASMIDE
.
14
2.5
PRIMER
.
15
2.6
CHEMIKALIEN
.
16
2.7
HAEUFIG
VERWENDETE
PUFFER
UND
LOESUNGEN
.
17
2.8
PRAEPARATION
VON
NUKLEINSAEUREN
.
18
2.8.1
ISOLATION
VON
PLASMID-DNA
AUS
E.
COLI
.
18
2.8.2
ISOLATION
VON
LAMBDA-DNA
.
18
2.8.3
ISOLATION
VON
GESAMT-DNA
AUS
C.
PURPUREA
.
19
2.8.4
ISOLATION
VON
GESAMT-RNA
AUS
C.
PURPUREA
.
20
2.9
GELELEKTROPHORESE
VON
NUKLEINSAEUREN
.
20
2.9.1
GELELEKTROPHORESE
VON
DNA
.
20
2.9.2
GELELEKTROPHORESE
VON
RNA
.
21
2.10
ISOLATION
VON
DNA-FRAGMENTEN
AUS
AGAROSEGELEN
.
21
2.11
SCREENING
DER
CHROMOSOMALEN
EMBL3-GENBANK
.
21
2.12
KONSTRUKTION
REKOMBINANTER
DNA
(KLONIERUNGEN)
.
21
VI
2.13
HYBRIDISIERUNGEN
.
22
2.13.1
MARKIERUNG
VON
DNA
.
22
2.13.2
SOUTHEM-BLOTS
UND
DNA-DNA-HYBRIDISIERUNGEN
.
23
2.13.3
NORTHEM-BLOTS
UND
DNA-RNA-HYBRIDISIERUNGEN
.
23
2.14
DNA-SEQUENZIERUNG
.
24
2.15
BENOMYLBEHANDLUNG
VON
C.
PURPUREA
ZUR
ERZEUGUNG
VON
STAEMMEN
MIT
VERAENDERTEM
DNA-GEHALT
.
24
2.16
DNA-GEHALTSBESTIMMUNGEN
MIT
KEMFAERBUNGEN
.
24
2.17
UV-UEBERLEBENSKURVEN
.
25
2.18
TRANSFORMATION
VON
C.
PURPUREA
.
26
2.19
GENETISCHE
REINDARSTELLUNG
DER
TRANSFORMANTEN
.
27
2.20
PCR
.
27
2.20.1
PCR-REAKTION
ZUR
AMPLIFIZIERUNG
GENOMISCHER
DNA
.
27
2.20.2
TRANSKRIPTIONSNACHWEIS
MITTELS
RT-PCR
.
27
2.21
PLATTENTESTS
ZUM
NACHWEIS
CELLULOLYTISCHER
AKTIVITAET
.
28
2.22
INFEKTION
VON
SECALE
CERALE
.
28
3.
ERGEBNISSE
.
29
3.1
UNTERSUCHUNGEN
ZUR
PLOIDIE
VON
CLAVICEPSPURPUREA
.
29
3.1.1
BESTIMMUNG
DER
RELATIVEN
KEM-DNA-GEHALTE
VERSCHIEDENER
BENOMYLISOLATE
VON
C.
PURPUREA
.
29
3.1.2
UV-UEBERLEBENSKURVEN
.
34
3.2
ISOLIERUNG
EINES
CELLULASE-CODIERENDEN
GENS
VON
C.
PURPUREA
.
35
3.2.1
ISOLIERUNG
EINER
CELLULASE-HOMOLOGEN
REGION
AUS
EINER
GENOMISCHEN
GENBANK
VON
C.
PURPUREA
.
36
3.2.2
NUKLEOTIDSEQUENZ
DES
CE/7-GENS
UND
DIE
DARAUS
ABGELEITETE
AMINOSAEURESEQUENZ
.41
3.2.3
BESTIMMUNG
DER
IM
GENOM
VON
T5
UND
T5-20.2
VORHANDENEN
CELL
-KOPIEN
.
49
3.3
TRANSKRIPTION
DES
CEZI-GENS
VON
C.
PURPUREA
.
50
3.3.1
TRANSKRIPTION
DES
C.
PURPUREA
CELL-GENS
IN
AXENISCHER
KULTUR
.
50
3.3.2
TRANSKRIPTION
DES
C.
PURPUREA
CELL
-GENS
IN
INFIZIERTEN
ROGGENFRUCHTKNOTEN
.
53
3.4
ERZEUGUNG
CE//-NEGATIVER
TRANSFORMANTEN
MIT
HILFE
HOMOLOGER
INTEGRATION
.
55
3.4.1
KONSTRUKTION
DES
GENAUSSCHALTUNGSVEKTORS
PACE/7PHLEO
R
.
55
3.4.2
TRANSFORMATION
VON
C.
PURPUREA
MIT
PACEZ7PHLEO
R
.
56
VII
3.5
ANALYSE
DER
CELL
-NEGATIVEN
TRANSFORMANTEN
.
59
3.5.1
CELLULOLYTISCHE
AKTIVITAET
DER
CEZZ-NEGATIVEN
TRANSFORMANTEN
.
59
3.5.2
PATHOGENITAETSTESTS
MIT
CELL
-NEGATIVEN
TRANSFORMANTEN
AUF
SECALE
CERALE
.
59
3.6
KOMPLEMENTATION
EINES
CELL
-NEGATIVEN
TRANSFORMANTEN
MIT
DEM
INTAKTEN
CELLULASE-GEN
.
64
3.6.1
KONSTRUKTION
DES
KOMPLEMENTATIONSVEKTORS
PCEZZHYG
R
.
64
3.6.2
TRANSFORMATION
DER
CEZZ-NEGATIVEN
TRANSFORMANTE
129
MIT
PCEZZHYG
R.
65
3.6.3
TRANSKRIPTION
DES
CEZZ-GENS
IN
KOMPLEMENTIERTEN
TRANSFORMANTEN
.
67
4.
DISKUSSION
.
69
4.1
PLOIDIE
BEI
C.
PURPUREA
.
69
4.2
SEQUENZANALYSEN
VON
CELL
.
71
4.2.1
C.
PURPUREA
CELL
IM
VERGLEICH
ZU
ANDEREN
PILZLICHEN
CELLULASEN
.
71
4.2.2
FEHLENDE
SUBSTRATBINDUNGSDOMAENE
.
76
4.2.3
KONSERVIERTE
INTRONPOSITIONEN
.
78
4.3
TRANSKRIPTION
DES
CEZZ-GENS
VON
C.
PURPUREA
.
19
4.4
AUSSCHALTUNG
DES
CELL-GENS
MIT
HOMOLOGER
INTEGRATION
.
84
4.5
HINWEISE
AUF
WEITERE
CELLULASE-CODIERENDEN
GENE
BEI
C.
PURPUREA
.
86
4.6
MOEGLICHE
FUNKTION
VON
C.
PURPUREA
CELL
WAEHREND
DER
INFEKTION
VON
SECALE
CEREALE
.
87
S.
ZUSAMMENFASSUNG
.
91
6.
ABSTRACT
.
92
7.
LITERATUR
.
93 |
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spelling | Müller, Ulrike Verfasser aut Struktur, Expression und gezielte Inaktivierung von cell, einem vermutlich Cellobiohydrolase-codierenden Gen von Claviceps purpurea von Ulrike Müller Berlin [u.a.] Cramer 1997 XI, 100 S. Ill., graph. Darst. txt rdacontent n rdamedia nc rdacarrier Bibliotheca mycologica 166 Zugl.: Osnabrück, Univ., Diss. Cellulase Claviceps purpurea Cytology Claviceps purpurea Genetics Fungal gene expression Genregulation (DE-588)4122166-7 gnd rswk-swf Hydrolasen (DE-588)4160916-5 gnd rswk-swf Cellulasen (DE-588)4147450-8 gnd rswk-swf Mutterkornpilz (DE-588)4170896-9 gnd rswk-swf Genexpression (DE-588)4020136-3 gnd rswk-swf (DE-588)4113937-9 Hochschulschrift gnd-content Mutterkornpilz (DE-588)4170896-9 s Cellulasen (DE-588)4147450-8 s Hydrolasen (DE-588)4160916-5 s Genregulation (DE-588)4122166-7 s DE-604 Genexpression (DE-588)4020136-3 s Bibliotheca mycologica 166 (DE-604)BV035361777 166 DNB Datenaustausch application/pdf http://bvbr.bib-bvb.de:8991/F?func=service&doc_library=BVB01&local_base=BVB01&doc_number=007643623&sequence=000001&line_number=0001&func_code=DB_RECORDS&service_type=MEDIA Inhaltsverzeichnis |
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