Synthese und in vitro Testung fluoreszenzmarkierter Liponsäureamide:
Gespeichert in:
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Format: | Buch |
Sprache: | German |
Veröffentlicht: |
1997
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Beschreibung: | Kiel, Univ., Diss., 1997 |
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INHALTSVERZEICHNIS
SEITE
1
EINLEITUNG
1
1.1
A-LIPONSAEURE
1
1.1.1
VORKOMMEN
UND
PHYSIOLOGISCHE
BEDEUTUNG
DER
A-LIPONSAEURE
1
1.1.2
ENZYMGEBUNDENE
BIOCHEMISCHE
FUNKTIONEN
2
1.1.3
NICHT-ENZYMGEBUNDENE
BIOCHEMISCHE
FUNKTIONEN
3
1.1.4
PHARMAKOKINETIK
DER
A-LIPONSAEURE
4
1.1.5
PHARMAKOLOGISCHE
ANWENDUNG
DER
A-LIPONSAEURE
5
1.1.6
CHEMISCHE
UND
PHYSIKALISCHE
EIGENSCHAFTEN
6
1.2
FLUORESZENZMARKER
7
2
PROBLEMSTELLUNG
UND
ZIELSETZUNG
G
3
SYNTHESEN
N
3.1
ALLGEMEINER
TEIL
11
3.2
LIPONSAEUREESTERSYNTHESEN
12
3.2.1
SYNTHESE VON
7-DIETHYLAMINO-4-FORMYLCUMARIN
12
3.2.2
SYNTHESE VON
7-DIETHYLAMINO
4-HYDROXYMETHYLCUMARIN
13
3.2.3
SYNTHESE VON
LIPONSAEURE(7-DIETHYLAMINO
CUMARIN-4-YLMETHYL)ESTER
14
3.3
VERSUCH
DER
DARSTELLUNG
VON
CUMARINYLALKYLHALOGENIDEN
14
3.4
SYNTHESE EINES
LANGWELLIG
EMITTIERENDEN
FLUORESZENZFARBSTOFFES
MIT
EINER
AMINOCUMARINSTRUKTUR
17
3.4.1
SYNTHESE
VON
9-FORMYL-8-HYDROXY-2,
3,6,7
TETRAHYDRO-1
H,5H-BENZO[H,I]CHINOLIZIN
18
3.4.2
SYNTHESE VON
10-NITRO-2,3,6,7-TETRAHYDRO-1H,5H,
11
H-BENZO[B]PYRANO[6,7,8-H,I]CHINOLIZIN-11-ON
19
3.4.3
SYNTHESE
VON
1
0-AMINO-2,3,6,7-TETRAHYDRO-1
H,5H,
11H-BENZO[B]PYRANO[6,7,8-H,I]CHINOLIZIN-11-ON
20
3.5
SYNTHESE
VON
3-AMLNO-7-DIETHYLAMINOCUMARIN
20
3.6
SYNTHESE
DER
CARBONSAEUREAMIDE
20
3.6.1
SYNTHESE
DER
CARBONSAEUREAMIDE
MIT
1-ETHOXY
CARBONYF-2-ETHOXY-1,2-DIHYDROCHINOLIN
(EEDQ)
21
3.6.2
SYNTHESE
DER
CARBONSAEUREAMIDE
MIT
CHLORKOHLENSAEUREALKYLESTEM
22
3.7
INFRAROT-SPEKTROSKOPIE
DER
CARBONSAEUREAMIDE
24
3.8
NMR-SPEKTROSKOPIE
DER
CARBONSAEUREAMIDE
25
3.8.1
1
H-NMR-SPEKTROSKOPIE
25
3.8.2
'
3
C-NMR-SPEKTROSKOPIE
28
4
ANALYTISCHE
METHODEN
36
4.1
MATERIAL
36
4.2
STABILITAETSUNTERSUCHUNGEN
36
4.3
PK,
-WERTBESTIMMUNG
38
4.3.1
ALLGEMEINES
YY
40
4.3.2
DURCHFUEHRUNG
DER
MESSUNGEN
42
4.3.3
HERSTELLUNG
DER
PUFFERLOESUNGEN
43
4.4
BESTIMMUNG
DER
PROTEINBINDUNG
MITTELS
FLUORESZENZPOLARISATION
44
4.4.1
ALLGEMEINES
44
4.4.2
FLUORESZENZPOLARISATION
45
4.4.3
DURCHFUEHRUNG
DER
MESSUNGEN
47
4.5
BESTIMMUNG
DER
QUANTENAUSBEUTE
49
4.5.1
ALLGEMEINES
49
4.5.2
BESTIMMUNG
DES
EMPFINDLICHKEITSFAKTORS
50
4.5.3
DURCHFUEHRUNG
DER
MESSUNGEN
51
4.6
IN
VITRO
-
ESTERASE
TEST
52
4.6.1
ALLGEMEINES
52
4.6.2
HERSTELLUNG
DER
LOESUNGEN
53
4.6.3
INKUBATION
MIT
ESTERASEENZYM
53
4.6.4
PROBENAUFARBEITUNG
54
4.6.5
DURCHFUEHRUNG
DER
MESSUNG
55
4.7
UNTERSUCHUNGEN
ZUR
AUFNAHMEKINETIK
VON
CUMARINYLLIPONSAEUREVERBINDUNGEN
IN
MENSCHLICHEN
HEP-G2
ZELLEN
57
4.7.1
ZELLKULTURMODELL
HEP-G2
ZELLEN
57
4.7.2
HERSTELLUNG
DER
LOESUNGEN
58
4.7.3
BESTIMMUNG
DER
ZELLZAHL
58
4.7.4
DURCHFUEHRUNG
DER
INKUBATION
59
4.7.5
PROBENAUFARBEITUNG
59
4.7.6
AUSWERTUNG
DER
PROBEN
60
4.7.6.1
LIPONSAEURE(7-DIETHYLAMINOCUMARIN
4-YLMETHYL)ESTER
60
4.7.6.2
LIPONSAEURE(7-DIETHYLAMINOCUMARIN-3-YL)AMID
61
5
ERGEBNISSE
UND
DISKUSSION
62
5.1
STABILITAETSUNTERSUCHUNGEN
62
5.1.1
LIPONSAEURE(4-METHYLCUMARIN-7-YL)AMID
62
5.1.2
LIPONSAEURE(2,3,6,7-TETRAHYDRO-1
H,5H,1
1
H-BENZO[BJ
PYRANO[6,7,8-H,I]CHINOLIZIN-11-ON-10-YL)AMID
63
5.1.3
LIPONSAEURE(7-DIETHYLAMINOCUMARIN-3-YL)AMID
63
5.2
PK.
-WERTBESTIMMUNG
65
5.2.1
7-DIETHYLAMINO-4-METHYLCUMARIN
65
5.2.2
LIPONSAEURE(7-DIETHYLAMINOCUMARIN-4-YLMETHYL)ESTER
71
5.3
BESTIMMUNG
DER
PROTEINBINDUNG
MITTELS
FLUORESZENZPOLARISATION
75
5.3.1
ALLGEMEINES
75
5.3.2
7-AMINO-4-METHYLCUMARIN
76
5.3.3
LIPONSAEURE(4-METHYLCUMARIN-7-YL)AMID
77
5.3.4
3-AMINO-7-DIETHYLAMINOCUMARIN
79
5.3.5
LIPONSAEURE(7-DIETHYLAMINOCUMARIN-3-YL)AMID
80
5.3.6
1
0-AMINO-2,3,6,7-TETRAHYDRO-1
H,5H,
11
H-BENZO[B]
PYRANO[6,7,8-H,I]CHINOLIZIN-1
1
-ON
82
5.3.7
LIPONSAEURE(2,3,6,7-TETRAHYDRO-1
H,5H,
11
H-BENZO[B]
PYRANO[6,7,8-H,I]CHINOLIZIN-11-ON-10-YL)AMID
83
5.4
BESTIMMUNG
DER
QUANTENAUSBEUTE
85
5.5
IN
VITRO
-
ESTERASE
TEST
89
5.5.1
LIPONSAEUREESTERVERBINDUNGEN
89
5.5.2
LIPONSAEUREAMIDVERBINDUNGEN
90
5.5.2.1
LIPONSAEURE(7-DIETHYLAMINOCUMARIN-3-YL)AMID
90
5.5.2.2
LIPONSAEURE(4-METHYLCUMARIN-7-YL)AMID
91
5.5.2.3
VERGLEICHENDE
DARSTELLUNG
DER
SUBSTRATSTABILITAET
DER
LIPONSAEUREESTER
UND
DER
LIPONSAEUREAMIDE
92
5.6
INKUBATION
MIT
HEP-G2
ZELLEN
93
5.6.1
LIPONSAEURE(7-DIETHYLAMINOCUMARIN-4-YLMETHYL)ESTER
94
5.6.2
LIPONSAEURE(7-DIETHYLAMINOCUMARIN-3-YL)AMID
95
6
ZUSAMMENFASSUNG
96
7
EXPERIMENTELLER
TEIL
GG
7.1
ALLGEMEINE
HINWEISE
GG
7.2
SYNTHESE
DER
FLUORESZENZMARKER
100
7.2.1
7-DIETHYLAMINO-4-FORMYLCUMARIN
100
7.2.2
7-DIETHYLAMINO-4-HYDROXYMETHYLCUMARIN
101
7.2.3
3-BROM-7-DIETHYLAMINO-4-METHYLCUMARIN
102
7.2.4
G-FORMYL-8-HYDROXY-2,3,6,7-TETRAHYDRO-1
H,5H
BENZO[H,I]CHINOLIZIN
103
7.2.5
10-NITRO-2,3,6,7-TETRAHYDRO-1H,5H,11H-BENZO
[B]PYRANO[6,7,8-H,I]CHINOLIZIN-11-ON
104
7.2.6
10-AMINO-2,3,6,7-TETRAHYDRO-1H,5H,11H-BENZO
[B]PYRANO(6,7,8-H,I]CHINOLIZIN-11-ON
105
7.2.7
7-DIETHYLAMINO-3-NITROCUMARIN
106
7.2.8
3-AMINO-7-DIETHYLAMINOCUMARIN
107
7.3
LIPONSAEUREESTERSYNTHESEN
108
7.3.1
LIPONSAEURE(7-DIETHYLAMINOCUMARIN-4-YLMETHYL)ESTER
108
7.4
LIPONSAEUREAMIDSYNTHESEN
109
7.4.1
LIPONSAEURE(2,3,6,7-TETRAHYDRO-1
H,5H,1
1
H-BENZO[B]
PYRANO[6,7,8-H,I]CHINOLIZIN-11-ON-10-YL)AMID
109
7.4.2
LIPONSAEURE(7-DIETHYLAMINOCUMARIN-3-YL)AMID
110
7.4.3
LIPONSAEURE(4-METHYLCUMARIN-7-YL)AMID
111
8
LITERATUR
112
DANKSAGUNG
121
LEBENSLAUF
122 |
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