Einfluss von Angiotensin II auf humane arterielle Gefässendothelzellen:
Gespeichert in:
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Veröffentlicht: |
1997
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5
INHALTSVERZEICHNIS
:
SEITEN
1.
EINLEITUNG
10
1.1
PATHOPHYSIOLOGISCHE
ASPEKTE
DER
ARTERIELLEN
HYPER
TONIE
UND
DER
ARTERIOSKLEROSE
AN
ARTERIELLEN
BLUTGEFAESSEN
10
1.2
DIE
BEDEUTUNG
DES
ENDOTHELS
13
1.3
DAS
RENIN-ANGIOTENSIN-SYSTEM
16
1.4
ANGIOTENSIN-REZEPTOREN
UND
REZEPTOR-ANTAGONISTEN
19
1.5
EINFLUSS
VON
ANGIOTENSIN
II
AUF
ENDOTHELZELLEN
UND
GLATTE
MUSKELZELLEN
DER
GEFAESSE
24
1.6
ZIEL
DER
ARBEIT
28
2.
METHODEN
UND
MATERIALIEN
29
2.1
DIE
ZELLKULTUR
29
2.1.1
MEDIEN
UND
LOESUNGEN
29
2.1.2
ANLEGEN
EINER
PRIMAERKULTUR
31
2.1.3
KULTIVIERUNG
UND
PASSAGIERUNG
32
2.1.4
KULTIVIERUNG
VON
ZELLEN
AUF
MIKROTITERPLATTEN
34
2.1.5
KULTIVIERUNG
VON
ZELLEN
AUF
DECKGLAESCHEN
35
2.1.6
MORPHOLOGISCHE
UND
IMMUNCYTOCHEMISCHE
IDENTI
FIZIERUNG
DER
MENSCHLICHEN
GEFAESSENDOTHELZELLEN
35
2.2
BESTIMMUNG
DER
DNA-SYNTHESERATE
36
2.3
PROTEINBESTIMMUNG
37
2.4
BESTIMMUNG
DER
FREIEN
INTRAZELLULAEREN
CA
2+
-
KONZENTRATION
([CA
2+
]I)
37
2.5
REZEPTOR-BINDUNGSSTUDIEN
AN
KONFLUENT
GEWACHSENEN
HUMANEN
ENDOTHELZELLEN
39
2.6
NACHWEIS
DER
EGR-L-MRNA-EXPRESSION
MITTELS
NOTHERN
BLOTTING
41
2.6.1
STIMULATION
DER
HUMANEN
ARTERIELLEN
ENDOTHELZELLEN
41
2.6.2
ISOLIERUNG
UND
QUANTIFIZIERUNG
DER
GESAMT-RNA
41
2.6.3
RNA-GELELEKTROPHERESE
43
2.6.4
BLOTTEN
44
6
SEXTE
2.6.5
PRAEHYBRIDISIERUNG
45
2.6.6
RADIOAKTIVE
MARKIERUNG
DER
CDNA-SONDEN
MIT
[
32
P]-DCTP
45
2.6.7
HYBRIDISIERUNG
46
2.6.8
DENSITOMETRISCHE
ANALYSE
46
2.7
NACHWEIS
DER
EGR-L-MRNA
UND
PRAEPRO-ENDOTHELIN-L-MRNA
EXPRESSION
MITTELS
RT/PCR
47
2.7.1
HERSTELLUNG
DER
"FIRST-STRAND"-CDNA
MIT
HILFE
DER
REVERSEN
TRANSKRIPTASE-REAKTION
(RT)
47
2.7.2
DIE
POLYMERASE-KETTENREAKTION
(PCR)
48
2.7.3
BESTIMMUNG
DER
EXPONENTIELLEN
PHASE
DER
PCR
49
2.7.4
SOUTHERN
BLOTTING
DES
PCR-PRODUKTES
50
2.8
STATISTIK
51
2.9
MATERIALIEN
52
3.
ERGEBNISSE
56
3.1
CHARAKTERISIERUNG
VON
MENSCHLICHEN
ARTERIELLEN
ENDOTHELZELLEN
56
3.1.1
MORPHOLOGISCHE
CHARAKTERISIERUNG
56
3.1.2
IMMUNCYTOCHEMISCHE
CHARAKTERISIERUNG
58
3.2
EINFLUSS
VON
ANGIOTENSIN
II
AUF
DIE
INKORPORATION
VON
[
3
H]-THYMIDIN
IN
DIE
DNA
VON
HUAEC
59
3.3
EINFLUSS
VON
ANGIOTENSIN
II
AUF
DIE
[CA
2+
]I
62
3.4
REZEPTOR-BINDUNG
VON
ANGIOTENSIN
II
AUF
HUAEC
67
3.5
INDUKTION
DES
"EARLY
GROWTH
RESPONSE
GENE-1"
(EGR-1)
DURCH
ANGIOTENSIN
II
UND
BRADYKININ
73
3.6
INDUKTION
DER
PRAEPRO-ENDOTHELIN
-
1-MRNA
DURCH
ANGIOTENSIN
II
79
4.
DISKUSSION
84
4.1
WIRKUNG
VON
ANGIOTENSIN
II
AUF
DIE
PROLIFERATION
HUMANER
ARTERIELLER
ENDOTHELZELLEN
84
1
SEITE
4.2
WIRKUNG
VON
ANGIOTENSIN
II
AUF
DIE
FREIE
INTRAZELLULAERE
CA
2+
-KONZENTRATION
(
[CA
2+
]I
)
86
4.3
BINDUNG
VON
ANGIOTENSIN
II
AUF
HUAEC
90
4.4
INDUKTION
DER
EGR-L-MRNA-EXPRESSION
DURCH
ANGIOTENSIN
II
IN
HUAEC
94
4.5
INDUKTION
DER
PRAEPRO-ENDOTHELIN-L-MRNA
DURCH
ANGIOTENSIN
II
IN
HUAEC
96
5.
ZUSAMMENFASSUNG
99
LITERATURVERZEICHNIS
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