Der hepatische Interleukin-6-Rezeptor: Bedeutung und Regulation der a-Rezeptoruntereinheit
Gespeichert in:
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| Format: | Buch |
| Sprache: | German |
| Veröffentlicht: |
1996
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| Beschreibung: | Aachen, Techn. Hochsch., Diss., 1996 |
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INHALTSVERZEICHNIS
1
EINLEITUNG
1
2
MATERIAL
UND
METHODEN
14
2.1
CHEMIKALIEN
I
4
2.2
ZELLKULTUR
15
2.3
BINDUNGSSTUDIEN
16
2.4
INTEMAHSIERUNGSSTUDIEN
1
7
2.5
DEGRADATIONSSTUDIEN
17
2.6
ZELLKEMPRAEPARATION
18
2.7
STUDIEN
ZUR
HEMMUNG
DER
INTERNALISIERUNG
VIA
"COATED
PITS"
18
2.8
RNA
-PRDPARATION
19
2
8
1
RNA-PRAEPARATION
AUS
EUKARYONTISCHEN
ZELLEN
(ROSE-JOHN
ET
AL
,1987)
19
2
8
2
RNA-KONZENTRATIONSBESTIMMUNG
20
2.9
NORTHERN
BLOT
20
2
9
1
AUFTRENNUNG
DER
RNA
20
2
9
2
UEBERTRAGEN
DER
RNA
AUF
GENE
SCREEN
PLUS
MEMBRANEN
21
2
9
3
HYBNDISIERUNG
NUT
DER
RADIOAKTIVEN
SONDE
21
2
9
4
RADIOAKTIVE
MARKIERUNG
VON
DNA-FRAGMENTEN
DURCH
"
RANDOM
PNMING"
22
2
10
JODIERUNG
VON
IRITERLEUKIN-6
(MARKWELL,
1982)
22
2.11
GEWINNUNG
DES
LOESLICHEN
ALL-6-REZEPTORS
(SAIL-6-R.EZEPTOR)
AUS
NIH/3T3
ZELLUEBERSTAENDEN
23
3
ERGEBNISSE
24
3.
1
NACHWEIS
DES
IL-6-REZEPTORS
AUF
DER
ZELLOBERFLAECHE
VON
NICHT
TRANSFIZIERTEN
UND
TRANSFIZIERTEN
HEPG2-ZELLEN
24
3
I
1
NACHWEIS
VON
IL-6-REZEPTOREN
AUF
DER
OBERFLAECHE
VON
HEPG2-ZELLEN
DURCH
UNTERSUCHUNGEN
ZUR
EQUIHBNERUNGSKINETIK
24
3
1
2
NACHWEIS
VON
LL-6-REZEPTOREN
AUF
DER
OBERFLAECHE
VON
HEPG2-80KDA-ZELLEN
DURCH
UNTERSUCHUNGEN
ZUR
EQUIHBNERUNGSKMETIK
25
3
1
3
VERGLEICH
DER
EQUILIBNERUNGSSTUDIEN
VON
HEPG2
UND
HEPG2-80KDA-ZELLEN
26
3.2
UNTERSUCHUNGEN
ZUR
OBETFLACHENEXPRESSION
VON
GP
SO
AUF
TRANSFIZIERTEN
HEPG2-80KDA-ZELLEN
27
3
2
I
INDUKTION
DES
GP80
IN
HEPG2-80KDA-ZELLEN
27
3
2.2
HALBWERTSZEIT
DES
GP8O
IN
HEPG2-80KDA-ZELLEN
29
3.3
UNTERSUCHUNGEN
ZU
DEN
BINDUNGSAFFINITATEN
AN
UNSTIMUHERTEN
UND
STIMULIERTEN
HEPG2
UND
HEPG2-80KDA-ZELLEN
30
3
3
1
BESTIMMUNG
DER
DISSOZIATIONSKONSTANTEN
AN
UNSTIMULIERTEN
HEPG2-ZELLEN
30
3
3
2
BESTIMMUNG
DER
DISSOZIATIONSKONSTANTEN
AN
HEPG2-80KDA-ZELLEN
31
3
3
2
1
HEPG2-80KDA-ZEILEN
OHNE
ZNCL2-STIMULATION
31
3
3.2
2
HEPG2-80KDA-ZELLEN
MIT
ZNCL2-STIMULATION
32
3
3
3
BESTIMMUNG
DER
DISSOZIATIONSKONSTANTEN
AN
STIMULIERTEN
HEPG2-ZELIEN
32
3
3
3
1
HEPG2-ZELLEN,
DIE
MIT
DEXAMETHASON
STIMULIERT
WURDEN
32
3
3
3
2
HEPG2-ZELLEN,
DIE
MIT
PMA
STIMULIERT
WURDEN
33
3
3
3
3
HEPG2-ZELLEN,
DIE
MIT
DEXAMETHASON
UND
PMA
STIMULIERT
WURDEN
34
3
3
4
VERGLEICH
DER
DISSOZIATIONSKONSTANTEN
BEI
VERSCHIEDEN
STIMULIERTEN
UND
TRANSFIZIERTEN
HEPG2-ZELLEN
34
3.4
COMPETITIONSSTUDIEN
AN
HEPG2-80KDA-ZELLEN
MIT
DEM
IL-6
ANTAGONISTEN
3C9
36
3.5
INTERNALISIERUNG
VON
'
2S
J-LL-6
NACH
2-STUNDIGEM
VORBINDEN
BEI
4C
UND
ANSCHLIESSENDEM
ENTFERNEN
DES
LIGANDEN
(
"SINGLE
COHORT
")
39
3
5
1
HEPG2-ZELLEN
39
3
5
2
HEPG2-80KDA-ZELLEN
41
3.5.3
VERGLEICH
DER
INTEMALISIERUNGSEFFIZIENZEN
VON
HEPG2
UND
HEPG2-80KDA-ZELLEN
42
3
5
4.1
UNTERSUCHUNG
DES
ZELLUBERSTANDES
VON
HEPG2-80KDA-ZELLEN
NACH
INTERNALISIERUNG
BA
37C
42
3
5
4
2
UNTERSUCHUNG
DES
ZELLUEBERSTANDES
VON
HEPG2-80KDA-ZELLEN
BA
4C
43
I2S
3.6
INTERNALISIERUNG
VON
J-IL-6
IN
STAENDIGER
ANWESENHEIT
DES
LIGANDEN
44
3
6
1
HEPG2-ZELLEN
45
3
6
2
HEPG2-80KDA-ZELLEN
46
3.6
3
VERGLEICH
DER
INTEMALISIERUNGSSTUDIEN
47
3.7
STUDIEN
ZUR
DEGRADATION
VON
U.-6
AN
HEPG2-80KDA-ZELLEN
48
3.8
UNTERSUCHUNGEN
ZUM
SCHICKSAL
DES
IL-6-REZEPTORS
49
3
8
1
PH-ABHAENGIGKEIT
DER
IL-6
BINDUNG
50
3.8.2
NACHWEIS
DER
'
DOWN-REGULATION
"
DES
IL-6-REZEPTORS
DURCH
INTERNALISIERUNG
VON
IL-6
5
1
3.9
UNTERSUCHUNGEN
ZUR
TRANSLOKATION
DES
INTERNALISIERTEN
IL-6
IN
DEN
KEM
AN
HEPG2-80KDA-ZELLEN
53
3.10
STUDIE
ZUR
HEMMUNG
DER
INTERNALISIERUNG
VIA
"COATED
PITS
"
DURCH
A
MILORID
55
3.11
INTERNALISIERUNG
VON
IL-6
DURCH
HEPG2-ZELIEN IN
ANWESENHEIT
DES
LOESLICHEN
A-IL-6-REZEPTORS
57
4.
DISKUSSION
ST
4.1
BEDEUTUNG
DER
BEIDEN
IL-6-REZEPTORUNTEREINHEITEN
59
4.2
REGULATION
DER
BEIDEN
IL-6-REZEPTORUNTEREINHEITEN
60
4.3
LIGANDEN-INDUZIERTE
"DOWN-RPGULATION
"
DES
IL-6-REZEPTORS
63
4.4
BEDEUTUNG
DER
A-UNTEREINHEIT
DES
LL-6-REZEPTORS
IM
PROZESS
DER
INTERNALISIERUNG
66
5
ZUSAMMENFASSUNG
7#
6
LITERATUR
72
7
ABKUERZUNGSVERZEICHNIS
88 |
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