Entwicklung von HPLC-Verfahren mit Säulenschaltung zur Charakterisierung und Bestimmung von Metaboliten Polyzyklischer Aromatischer Kohlenwasserstoffe in Urin:
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1996
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Beschreibung: | München, Techn. Univ., Diss., 1996 |
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INHALTSVERZEICHNIS
1
EINLEITUNG
UND ZIELSETZUNG
1
2
POLYZYKLISCHE
AROMATISCHE
KOHLENWASSERSTOFFE
5
2.1
ENTSTEHUNG
UND
VORKOMMEN
5
2.2
AUFNAHME
DURCH
DEN
MENSCHEN
5
23
METABOUESIERUNG
10
2.4
EXPOSITION
GEGENUEBER
PAK
13
2.4.1
MEDIZINISCH
BEDINGTE
EXPOSITION
13
2.4.2
BERUFSBEDINGTE
EXPOSITION
14
23
MONITORING
DER
EXPOSITION
GEGENUEBER
PAK
15
2.5.1
UMWELTMONITORING
17
2.5.2
BIOLOGISCHES
MONITORING
18
2.5.3
BIOLOGISCHES
EFFEKT
MONITORING
20
3
ANALYTIK
VON
PAK
METABOLITEN
AUS
URIN
22
3.1
URIN
ALS
PROBENMATRIX
22
3.1.1
ZUSAMMENSETZUNG
22
3.1.2
KREATININWERT
22
3.1.3
ANFORDERUNGEN
AN
DIE
ANALYTIK
24
3.2
DUENNSCHICHT
UND
PAPIERCHROMATOGRAPHIE
24
33
IMMUNAFFINITAETSCHROMATOGRAPHIE
25
3.4
GASCHROMATOGRAPHIE
26
33
HOCHLEISTUNGSFLUESSIG-CHROMATOGRAPHIE
28
3.5.1
VERFAHREN
MIT
MANUELLER
PROBENAUFBEREITUNG
29
3.5.2
VERFAHREN
MIT
SYSTEMINTEGRIERTER
PROBENAUFBEREITUNG
33
4
DAS
VORSAEULENPACKUNGSMATERIAL
34
4.1
EXTRAKTION
MUTAGENER
SUBSTANZEN
AUS
BIOLOGISCHEN
MATRIZES
UNTER
ANWENDUNG
KUPFERPHTHALOCYANIN-MODIFIZIERTER
MATERIALIEN
34
N
4.2
MODIFIKATION
DES
VERWENDETEN
KIESELGELS
35
4.3
DIE
VORSAEULE
37
4.4
PUBLIZIERTE
HPLC-VERFAHREN
MIT
SYSTEMINTERNER
PROBENAUFBEREITUNG
AUF
BASIS
KUPFERPHTHALOCYANIN-MODIFIZIERTER
PACKUNGSMATERIALIEN
38
5
DETEKTION
DER
ANALYTEN
40
6
HOCHLEISTUNGSFLUESSIG-CHROMATOGRAPHISCHE
TRENNUNG
VON
ISOMEREN
HYDROXYLIERTEN
PHENANTHRENEN,
CHRYSENEN
UND
BENZO[A]PYRENEN
44
7
ERPROBUNG
UND
ENTWICKLUNG
VON
SAEULENSCHALTTECHNIKEN
FUER
DIE
HPLC-ANALYTIK
HYDROXYLIERTER
PAK
48
7.1
KONVENTIONELLE
SAEULENSCHALTUNG
48
7.1.1
INSTRUMENTELLER
AUFBAU
UND
ANALYSENPROGRAMM
48
7.1.2
ANALYSENZYKLUS
51
7.1.3
WIEDERFMDUNG
VON
METABOLITEN
HOEHERKONDENSIERTER
PAK
54
7.2
EINFACHE
SAEULENSCHALTUNG
MIT
THERMOTRANSFER
56
7.2.1
THERMODESORPTION
IN
DER
HPLC
56
7.2.2
INSTRUMENTELLER
AUFBAU
UND
ANALYSENPROGRAMM
57
7.2.3
ANALYSENZYKLUS
60
7.2.4
WIEDERFMDUNG
VON
METABOLITEN
HOEHERKONDENSIERTER
PAK
60
7.3
ERWEITERTE
SAEULENSCHALTUNG
62
7.3.1
APPARATIVER
AUFBAU
UND
ANALYSENPROGRAMM
62
7.3.2
ANALYSENZYKLUS
66
7.3.3
WIEDERFMDUNG
VON
METABOLITEN
HOEHERKONDENSIERTER
PAK
67
7.4
ERWEITERTE
SAEULENSCHALTUNG
MIT
ZWEI
SCHALTVENTILEN
69
7.4.1
APPARATIVER
AUFBAU
UND
ANALYSENPROGRAMM
69
7.4.2
ANALYSENZYKLUS
72
7.4.3
WIEDERFMDUNG
VON
METABOLITEN
HOEHERKONDENSIERTER
PAK
73
7.5
ENDGUELTIGES
HPLC-VERFAHREN
ZUR
BESTIMMUNG
VON
PAK-METABOLITEN
77
7.6
KONDITIONIERUNG
NEUER
VORSAEULEN
77
IN
8
URINANALYTIK
80
8.1
UNSPEZIFISCHE
ADSORPTION
VON
MATRIXBESTANDTEILEN
AM
VORSAEULENPACKUNGSMATERIAL
82
8.1.1
VERBESSERUNG
DER
DETEKTIONSSELEKTIVITAET
83
8.1.2
OPTIMIERUNG
DER
PROBENAUFBEREITUNG
83
8.2
WIEDERFINDUNG
VON
OH-PAK
IN
URINEN
NICHT
PAK-BELASTETER
PERSONEN
85
8.2.1
WIEDERFINDUNG
IN
ABHAENGIGKEIT
DES
KREATININWERTES
86
8.2.2
WIEDERFINDUNG
BEI
DOTIEREN
VOR
UND
NACH
DER
ENZYMATISCHEN
HYDROLYSE
87
8.2.3
WIEDERFINDUNG
VON
METABOLITEN
HOEHERKONDENSIERTER
PAK
BEI
DOTIEREN
VON
NATIVEN
UND
PARTIKELFIEIEN
PROBEN
90
8.2.4
WIEDERFINDUNG
VON
HYDROXYLIERTEN
PHENANTHRENEN
UND
1-HYDROXYPYREN
IN
NATIVEN
UND
PARTIKELFREIEN
PROBEN
92
8.3
THEORIEN
ZUM
ANALYTVERLUST
94
8.3.1
DEGRADATION
94
8.3.1.1
MIKROBIELLER
ABBAU
94
8.3.1.2
AUTOXIDATION
95
8.3.2
VERHALTEN
IN
MEHRPHASENSYSTEMEN
96
8.3.2.1
ADSORPTION
AN
PARTIKELN
UND
AN
NICHT
ABZENTRIFUGIERBAREN
SCHWEBSTOFFEN
96
8.3.2.2
ADSORPTION
AN
GEFAESSWAENDEN
97
8.4
VERSUCHE
ZUR
VERBESSERUNG
DER
WIEDERFINDUNG
97
8.4.1
UNTERDRUECKUNG
AUTOXIDATIVER
VORGAENGE
97
8.4.1.1
WIRKUNG
VON
ANTIOXIDANTIEN
IN
MODELLOESUNG
98
8.4.1.2
ANTIOXIDANTIEN
ZUR
STABILISIERUNG
VON
OH-BENZO[A]PYREN
IN
URIN
104
8.4.1.3
STABILITAET
VON
3-HYDROXYBENZO[A]PYREN
UNTER
ARGONATMOSPHAERE
105
8.4.2
VARIATION
DES
GEFAESSMATERIALS
WAEHREND
DER
ENZYMATISCHEN
HYDROLYSE
106
8.4.3
ALKOHOLE
ALS
LOESUNGSVERMITTLER
108
8.4.3.1
ENZYMAKTIVITAET
BEI
UNTERSCHIEDLICHEN
ALKOHOLKONZENTRATIONEN
108
8.4.3.2
VERSCHIEDENE
ALKOHOLE
UND
VARIIERENDE
ALKOHOLANTEILE
ALS
ZUSATZ
VOR
DER
HYDROLYSE
109
8.4.4
ADDITIVE
VOR
DER
HYDROLYSE
112
8.4.4.1
WIEDERFINDUNG
IN
ABHAENGIGKEIT
DER
SS-CYCLODEXTRIN
KONZENTRATION
116
8.4.5
MODELLRECHNUNG
ZU
GRENZFLAECHENEFFEKTEN
122
83
ZUSAMMENFASSUNG
123
IV
9
UNTERSUCHUNG
VON
URINPROBEN
BERUFLICH
PAK-BELASTETER
PERSONEN
125
9.1
VERGLEICH
VERSCHIEDENER
HYDROLYSEBEDINGUNGEN
127
9.1.1
2-PROPANOL
ALS
ZUSATZ
VOR
DER
HYDROLYSE
127
9.1.2
SS-CYCLODEXTRIN
ALS
ZUSATZ
VOR
DER
HYDROLYSE
129
9.2
FLUESSIG-FLUESSIG
EXTRAKTION
ENZYMATISCH
HYDROLYSIERTER
PROBEN
131
9.3
VERSUCHE
ZUR
IDENTIFIZIERUNG
VON
CHRYSEN
UND
BENZO[A]PYREN
METABOLITEN
IN
URINPROBEN
VON
KOKEREIARBEITERN
134
9.3.1
HPLC-ANALYSE
BEI
UNTERSCHIEDLICHEN
TRENNTEMPERATUREN
134
9.3.2
IDENTIFIZIERUNG
UEBER
FLUORESZENZEIGENSCHAFTEN
142
9.3.3
VERGLEICH
VERSCHIEDENER
ANALYTISCHER
SAEULEN
144
9.4
ZUSAMMENFASSUNG
UND
DISKUSSION
146
10
BESTIMMUNG
VON
OH-PHENANTHRENEN
UND
1-HYDROXYPYREN
IM
URIN
VON
KOKEREIARBEITERN
148
10.1
ANALYTISCHES
VERFAHREN
148
10.2
KALIBRIERUNG
DES
ANALYSENSYSTEMS
150
10.3
ERGEBNISSE
DER
URINUNTERSUCHUNGEN
153
10.4
STATISTISCHE
AUSWERTUNG
154
105
ZUSAMMENFASSUNG
UND
DISKUSSION
165
11
ALLGEMEINE
EXPERIMENTELLE
ANGABEN
168
11.1
GERAETE,
MATERIALIEN,
CHEMIKALIEN
168
11.2
METHODEN
170
11.2.1
ENZYMATISCHE
HYDROLYSE
170
11.2.2
KREATININWERTBESTIMMUNG
170
11.2.3
STABILITAETSVERSUCHE
UNTER
ARGONATMOSPHAERE
170
11.2.4
SILANISIEREN
VON
PROBENGEFOESSEN
UND
AUTOSAMPLERVIALS
171
11.2.5
BESTIMMUNG
DER
AKTIVITAET
VON
SS-GLUCURONIDASE
UND
ARYLSULFATASE
BEI
UNTERSCHIEDLICHEN
ALKOHOLKONZENTRATIONEN
171
12
ZUSAMMENFASSUNG
174
V
13
LITERATURVERZEICHNIS
176
14
ANHANG
A.
STATISTIK
195
195
B.
EXPERIMENTELLE
DATEN
197
C.
ABKUERZUNGEN
209 |
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