Der Einfluss von Flavonoiden auf die Aktivität und Kinetik ausgewählter Cytochrom P450-Enzyme bei Mensch und Maus:
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| Format: | Buch |
| Sprache: | German |
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1996
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2
DER EINFLUSS VON FLAVONOIDEN AUF DIE AKTIVITAET UND KINETIK AUSGEWAEHLTER
CYTOCHROM P450-ENZYME BEI MENSCH UND MAUS
DISSERTATION
ZUR ERLANGUNG DES AKADEMISCHEN GRADES
DOCTOR RERUM NATURALIUM (DR. RER. NAT.)
VORGELEGT DER
MATHEMATISCH-NATURWISSENSCHAFTLICH-TECHNISCHEN FAKULTAET
(FACHBEREICH PHARMAZIE)
DER MARTIN-LUTHER-UNIVERSITAET HALLE-WITTENBERG
VON FRAU UTE MERKEL
GEB. AM: 30.10.1966 IN: JENA
GUTACHTER:
1.
2.
3.
HALLE (SAALE),
IMAGE 2
INHALTSVERZEICHNIS
INHALTSVERZEICHNIS
ABKUERZUNGSVERZEICHNIS
1 EINLEITUNG 1
1.1 DAS CYTOCHROM P450-ENZYMSYSTEM 1
1.2 FLAVONOIDE 5
1.3 COUMARIN 7
1.4 PROBLEMSTELLUNG 9
2 MATERIAL UND METHODIK 10
2.1 CHEMIKALIEN, ARZNEISTOFFE UND TESTSUBSTANZEN 10
2.2 REAGENZIEN UND PUFFERLOESUNGEN 10
2.3 GERAETE 11
2.4 BEEINFLUSSUNG DER COUMARIN-EXKRETION DURCH GRAPEFRUITSAFT 11
2.4.1 CHARAKTERISIERUNG DER PROBANDENGRUPPE 11
2.4.2 STUDIENDURCHFUEHRUNG 12
2.4.3 BESTIMMUNG VON 7-HYDROXYCOUMARIN IM URIN 13
2.4.3.1 PROBENAUFARBEITUNG 13
2.4.3.2 VALIDIERUNG 13
2.4.4 PHARMAKOKINETISCHE UND STATISTISCHE AUSWERTUNG 14
2.5 ENZYMKINETISCHE UNTERSUCHUNGEN 15
2.5.1 CHARAKTERISIERUNG DER LEBERPROBEN 15
2.5.2 MICROSOMENPRAEPARATION 16
2.5.3 BESTIMMUNGSMETHODEN 16
2.5.3.1 COUMARIN 7-HYDROXYLASE-ASSAY 16
2.5.3.2 7-ETHOXYCOUMARINDEETHYLASE-ASSAY 17
2.5.3.3 7-ETHOXYRESORUFINDEETHYLASE-ASSAY 17
2.5.3.4 VALIDIERUNG DERASSAYS 18
IMAGE 3
INHALTSVERZEICHNIS
2.5.3.5 PROTEINBESTIMMUNG 19
2.5.4 KINETIK DER ENZYMREAKTIONEN 19
2.5.5 EINFLUSS VON FLAVONOIDEN AUF DIE ENZYMREAKTIONEN 20
2.5.6 ENZYMKINETISCHE BERECHNUNGEN 20
2.5.6.1 IC50 20
2.5.6.2 ENZYMKINETISCHE PARAMETER 22
2.5.6.3 HEMMKINETIKEN 23
2.5.7 STATISTISCHE AUSWERTUNG 23
3 ERGEBNISSE 24
3.1 IN VIVO UNTERSUCHUNG - BEEINFLUSSUNG DER COUMARIN-EXKRETION DURCH
GRAPEFRUITSAFT 24
3.1.1 KUMULATIVE AUSSCHEIDUNG VON 7-HYDROXYCOUMARIN 24
3.1.2 MITTLERE VERWEILDAUER VON 7-HYDROXYCOUMARIN 27
3.2 IN VITRO UNTERSUCHUNGEN 29
3.2.1 COUMARIN 7-HYDROXYLASE 29
3.2.1.1 KINETIK DER COUMARIN 7-HYDROXYLASE 29
3.2.1.2 DER EINFLUSS VON FLAVONOIDEN AUF DIE COUMARIN 7-HYDROXYLASE 32
3.2.1.2.1 BESTIMMUNG DER IC50 32
3.2.1.2.2 BESTIMMUNG DER HEMMKINETIK 36
3.2.1.2.3 INDIVIDUELLER VERGLEICH DER HEMMEFFEKTE 41
3.2.2 7-ETHOXYCOUMARINDEETHYLASE 43
3.2.2.1 KINETIK DER 7-ETHOXYCOUMARINDEETHYLASE 43
3.2.2.2 EINFLUSS VON FLAVONOIDEN AUF DIE 7-ETHOXYCOUMARINDEETHYLASE 44
3.2.2.2.1 BESTIMMUNG DER IC50 44
3.2.2.2.2 INDIVIDUELLER VERGLEICH DER HEMMEFFEKTE 48
3.2.3 7-ETHOXYRESORUFINDEETHYLASE 49
3.2.3.1 KINETIK DER 7-ETHOXYRESORUFINDEETHYLASE 49
3.2.3.2 EINFLUSS VON FLAVONOIDEN AUF DIE 7-ETHOXYRESORUFINDEETHYLASE 52
3.2.3.2.1 BESTIMMUNG DER IC50 52
3.2.3.2.2 BESTIMMUNG DER HEMMKINETIK 54
3.2.3.2.3 INDIVIDUELLER VERGLEICH DER HEMMEFFEKTE 59
IMAGE 4
I N HAITSVERZEICH N IS
4 DISKUSSION 61
4.1 IN VIVO UNTERSUCHUNG 61
4.2 IN VITRO UNTERSUCHUNG 66
4.3 IN VIVO-IN VITRO VERGLEICH 79
5 ZUSAMMENFASSUNG 81
6 LITERATURVERZEICHNIS 84
7 ANHANG 101
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