Immunmodulierende Effekte von Umweltschadstoffen auf humane Zellpopulationen in vitro:
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1996
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INHALTSVERZEICHNIS
SEITE
ABKUERZUNGSVERZEICHNIS 1
1. EINLEITUNG 3
1.1. ALLERGISCHE ERKRANKUNGEN DURCH SCHADSTOFFBELASTUNG 3
1.2. ALLERGIEN GEGEN UMWELTCHEMIKALIEN 7
1.2.1. RESPIRATORISCHE ALLERGIE 8
1.2.2. BEDEUTUNG DER T-LYMPHOZYTEN BEI EINER ALLERGIE 8
1.3. ZIELSETZUNG DER ARBEIT ~ 11
2. MATERIAL UND METHODEN 13
2.1. MATERIAL 13
2.1.1. PUFFER, LOESUNGEN UND KULTURMEDIEN 13
2.1.1.1. PUFFER UND LOESUNGEN FUER IMMUNBIOLOGISCHE ARBEITEN 13
2.1.1.2 KULTURMEDIUM 15
2.1.2. ANTIKOERPER UND ZYTOKINE 15
2.1.2.1. ANTIKOERPER 15
2.1.2.2. IMMUNGLOBULINISOTYP-STANDARDS 17
2.1.2.3. REKOMBINANTE ZYTOKINE 17
2.1.2.4. KOMMERZIELLE ELISA-TESTKITS 18
2.1.3 MITOGENE 18
2.2. METHODEN 19
2.2.1. IMMUNBIOLOGISCHE METHODEN 19
2.2.1.1. PRAEPARATION MONONUKLEAERER ZELLEN AUS VOLLBLUT 19
1 .^1. ^^1 ^JLRUR^LLUN^J CL^^R 19
BIBLIOGRAFISCHE INFORMATIONEN
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2.2.1.3. SRBC - ROSETTIERUNG 19
2.2.1.4. LYSE DER SCHAFSERYTHROZYTEN 20
2.2.1.5. ISOLIERUNG VON B-LYMPHOZYTEN UND MONOZYTEN AUS BUFFY COAT 20
2.2.1.6. KULTURBEDINGUNGEN FUER DIE IGE-SYNTHESE IN VITRO 21
2.2.1.7. IMMUNGLOBULIN E-BESTIMMUNG MITTELS ELISA 21
2.2.1.8. IGG-, IGA- UND IGM-ELISA 22
2.2.1.9. NACHWEIS VON LOESLICHEM CD23 IN LOESLICHEN IGE-CD23-KOMPLEXEN 23
2.2.1.10. FLUORESZENZFARBUNG VON LYMPHOZYTEN FUER DIE DURCHFLUSSZYTOMETRIE
23
2.2.1.11. SCHADSTOFFE . YY 24
2.2.1.12. LYMPHOZYTENTRANSFORMATIONSTEST - LTT 25
2.2.1.13. MESSUNG DES OXYDATIVEN BURSTS VON MONOZYTEN/MAKROPHAGEN 25
2.2.1.14. MESSUNG DES OXYDATIVEN ABBAUS VON BAKTERIEN DURCH MONOZYTEN 26
2.2.1.15. UNTERSUCHUNG DER PHAGOZYTOSE VON MONOZYTEN 26
2.2.2. STATISTISCHE METHODIK 27
3. ERGEBNISSE 28
3.1 IN VITRO MODELL ZUR IGE-PRODUKTION VON HUMANEN B-LYMPHOZYTEN 28
3.1.1. VISUELLE CHARAKTERISIERUNG DER ZUR IGE-SYNTHESE STIMULIERTEN 28
KULTUREN
3.1.2. IL-4/ANTICD40MAK-ABHAENGIGE IGE-PRODUKTION IN VITRO 30
3.1.3. IG-PRODUKTION UNTER IL-4- UND ANTICD40MAK- STIMULATION 3 2
3.1.4. EINFLUSS VON MONOZYTEN AUF DIE INDUZIERTE IGE-SYNTHESE VON 3 3
B-LYMPHOZYTEN
3.1.5 EINFLUSS VON T-LYMPHOZYTEN AUF DIE INDUZIERTE IGE-SYNTHESE VON 35
B-LYMPHOZYTEN
3.1.6. IL4/ANTICD40MAK-INDUZIERTE FREISETZUNG VON LOESLICHEM CD23 36
(SCD23)
3.1.7. LTT DER ZUR IGE-SYNTHESE STIMULIERTEN KULTUREN 38
3.1.8. OBERFLAEEHENMARKEREXPRESSION IN UNTERSCHIEDLICH STIMULIERTEN 40
KULTURSYSTEMEN
3.2. IGE-SEKRETION UNTER SCHADSTOFFEINWIRKUNG 44
3.2.1 EFFEKTE VON REINSTSCHADSTOFFEN AUF DIE IN VITRO IGE-PRODUKTION 44
3.2.2 EFFEKTE DER AUS DEN KEHRSTAEUBEN ISOLIERTEN SCHADSTOFFGEMISCHE AN
47
PAKS AUF DIE IN VITRO IGE-SEKRETION
3.3. EINFLUSS VON STANDARDSCHADSTOFFEN AUF DEN OXYDATIVEN BURST VON SO
MONOZYTEN
3 .4. WIRKUNG VON IL-4 AUF DEN OXYDATIVEN BURST VON MONOZYTEN 54
3.5. EINFLUSS VON SCHADSTOFFEN AUF DIE PHAGOZYTOSE 5 5
3.6. TNF-ALPHA-SEKRETION DER MONOZYTEN UNTER SCHADSTOFFEINWIRKUNG 56
4. DISKUSSION 58
4.1. IN VITRO MODELL ZUR SPEZIFISCHEN IGE-SEKRETION 5 8
4.1.1. AUSWAHL EINES IN VITRO MODELLS ZUR SPEZIFISCHEN IGE-SEKRETION 5 8
4.1.2. EINSATZ VON HOCHAUFGEREINIGTEN B-LYMPHOZYTEN 59
4.1.3. EINSATZ VON MONOZYTEN UND T-LYMPHOZYTEN 60
4.2. WAHL DER IN DIE UNTERSUCHUNGEN EINBEZOGENEN SCHADSTOFFE 61
4.3. SCHADSTOFFKONZENTRATIONEN 64
4.4. EFFEKTE VON STANDARDSCHADSTOFFEN AUF DIE IL-4/ANTICD40MAK- 65
INDUZIERTE IGE-SYNTHESE
4.5. EFFEKTE VON SCHADSTOFFGEMISCHEN AUF DIE IL-4/ANTICD40MAK- 66
INDUZIERTE IGE-SYNTHESE
4.7. IGE-MODULATION 67
5. ZUSAMMENFASSUNG 68
6. LITERATURVERZEICHNIS 70
7. TABELLARISCHER ANHANG 79 |
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