Mikroheterogenität von Untereinheiten des chloroplastidären Kopplungsfaktors 1:
Gespeichert in:
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| Format: | Buch |
| Sprache: | German |
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1996
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A.
INHALTSVERZEICHNIS
SEITE
L
EINLEITUNG
1
LI.
ATP
UND
F-ATPASEN
1
L2.
MIKROHETEROGENITAET
VON
PROTEINEN
UNTER
DEM
BESONDEREN
ASPEKT
DES
CFI
8
1.3.
PROBLEM
UND
AUFGABENSTELLUNG
12
N.
MATERIAL
UND
METHODEN
13
N.I.
CHEMIKALIEN
UND
GERAETE
13
11.2.
ANTISEREN
UND
KANINCHENIMMUNISIERUNG
13
N.3.
PFLANZEN
UND
ALGENMATERIAL
UND
ANZUCHTBEDINGUNGEN
14
N.4.
PRAEPARATIVE
METHODEN
14
N.4.1.
PRAEPARATION
DES
CFI-KOMPLEXES
AUS
SPINAT
14
N.4.2.
PRAEPARATION
DES
CFI-KOMPLEXES
AUS
MAIS,
HIRSE
UND
WEIZEN
UND
15
ERBSENPFLANZEN
N.4.3.
REINIGUNG
DES
CFT-KOMPLEXES
AUS
YY
ROH-CFI
"
AUS
II.4.1.
16
N.4.3.1.
REINIGUNG
UEBER
EINE
ANIONENAUSTAUSCHCHROMATOGRAPHIE
16
N.4.3.2.
REINIGUNG
UEBER
EINEMETALLCHELATAFFINITAETSCHROMATOGRAPHIE
(IMAC)
16
N.4.4.
PRAEPARATION
DER
UNTEREINHEIT
8
DES
CFI
UND
CFI(-8)
AUS
SPINAT
17
N.4.5.
PRAEPARATION
DER
UNTEREINHEIT
8
DES
CFI
AUS
SPINAT
IM
ZENTRALEN
18
ISOTOPENLABOR
DER
RUHR-UNIVERSITAET
BOCHUM
N.4.6.
EXPRESSION
VON
CFIS
AUS
SPINAT
IN
ESCHERICHIA
COLI
UND
DIE
REINIGUNG
18
DES
REKOMBINANTEN
PROTEINS
N.4.7.
PRAEPARATION
DER
UNTEREINHEIT
S
DES
CFI
UND
CFI(-E)
AUS
SPINAT
19
N.4.8.
ISOLIERUNG
VON
MESOPHYLLPROTOPLASTEN
UND
BUENDELSCHEIDENZELLEN
AUS
MAIS
20
N.4.9.
RADIOAKTIVE
MARKIERUNG
VON
THYLAKOIDPROTEINEN
20
N.4.9.1.
PHOSPHORYLIERUNGEN
MIT
Y-[
32
P]-ATP
IN
VITRO
20
N.4.9.2.
PHOSPHORYLIERUNGEN
MIT
[
32
P]-H
J
PO4
IN
VIVO
21
N.4.9.3.
EINBAU
VON
[
4
C]-LEUCIN
IN
THYLAKOIDPROTEINE
21
N.5.
ANALYTISCHE
METHODEN
22
II.5.1.
CHLOROPHYLLBESTIMMUNG
22
II.5.2.
QUANTITATIVE
PROTEINBESTIMMUNG
I
22
N.5.3.
QUANTITATIVE
PROTEINBESTIMMUNG
II
22
II.5.4.
BROMCYANSPALTUNG
VON
PROTEINEN
23
II.5.5.
ISOELEKTRISCHE
FOKUSSIERUNG
23
N.5.6.
SDS-GELELEKTROPHORESE
26
II
A.
INHALTSVERZEICHNIS
II.5.7.
ZWEIDIMENSIONALE
GELELEKTROPHORESE
(2D-ELEKTROPHORESE)
27
II.5.8.
ANFAERBUNG
VON
PROTEINEN
IN
PAA-GELEN
27
II.5.8.1.
FAERBUNG
MIT
COOMASSIE-FARBSTOFFEN
27
II.5.8.2.
SILBERFAERBUNG
27
II.5.9.
ELEKTROTRANSFER
VON
PROTEINEN
AUF
FILTERMEMBRANEN
(WESTERN
BLOT)
28
II.5.10.
IMMUNNACHWEIS
VON
PROTEINEN
AUF
NITROCELLULOSEMEMBRANEN
29
II.5.11.
ANALYSE
DES
EINBAUES
RADIOAKTIVER
ISOTOPE
IN
THYLAKOIDPROTEINE
29
II.5.12.
MASSENSPEKTROSKOPISCHE
UNTERSUCHUNGEN
VON
CFI-PROTEINEN
29
III.
ERGEBNISSE
31
III
.
1.
OPTIMIERUNG
DER
2D-ELEKTROPHORESE
ZUR
ANALYSE
DER
MIKROHETEROGENITAET
31
VON
PROTEINEN
DES
CF
YY
III.2.
DARSTELLUNG
DER
MIKROHETEROGENITAET
VON
SPINAT
CF
(-UNTEREINHEITEN
33
IN
DER
2D-ELEKTROPHORESE
III.
3.
ISOFORMEN
DER
E
UNTEREINHEIT
DES
CFI
AUS
SPINAT
35
III
.4.
UNTERSUCHUNG
DER
MIKROHETEROGENITAET
DER
CFI
8
UNTEREINHEIT
38
BEI
SPINACEA
OLERACEA
III.4
.1.
BIOCHEMISCHE,
BIOPHYSIKALISCHE
UND
IMMUNOLOGISCHE
CHARAKTERISIERUNG
40
DER
MIKROHETEROGENITAET
DER
8-PROTEINE
IN
SPINACEA
OLERACEA
III
.4.1.1.
UNTERSUCHUNGEN
ZU
MOEGLICHEN
ARTEFAKTBILDUNGEN
40
III
.4.1.2.
AMINOTERMINALE
SEQUENZIERUNG
DER
8|,
8N
UND
8M
PROTEINE
42
III.4.1.3.
UNTERSUCHUNG
DES
C-TERMINALEN
BEREICHS
DER
8-PROTEINE
43
M.4.1.4.
MASSENSPEKTOMETRISCHE
UNTERSUCHUNG
DER
CF(-UNTEREINHEITEN
43
AUS
SPINACEA
OLERACEA
M.4.1.5.
UNTERSUCHUNGEN
ZUR
MARKIERUNG
DER
UNTEREINHEIT
8
MIT
46
[
32
P]-ORTHOPHOSPHAT
III
.4.1.6.
UNTERSUCHUNG
DER
8-ISOFORMEN
MIT
EINER
ALKALISCHEN
PHOSPHATASE
49
III
.4.2.
UNTERSUCHUNG
DER
RELEVANZ
DER
MIKROHETEROGENITAET
DER
8
UNTEREINHEIT
51
DES
CF(
AUS
SPINACEA
OLERACEA
M.4.2.
1.
UNTERSUCHUNGEN
ZUR
IN
SITU
MARKIERUNG
VON
CFI
8
MIT
Y-[
32
P]-ATP
51
III.4.2.2.
MARKIERUNG
DES
8I,
SN
UND
8M
PROTEINS
MIT
[
14
C]-LEUCIN
51
III.4.2.3.
NACHWEIS
DER
8-ISOFORMEN
IN
UNTERSCHIEDLICH
ALTEN
SPINATBLAETTEM
54
III.4.3
.
ZUSAMMENFASSUNG
DER
ERGEBNISSE
ZUR
MIKROHETEROGENITAET
VON
CF(8
55
AUS
SPINACEA
OLERACEA
III.5.
UNTERSUCHUNG
DER
MIKROHETEROGENITAET
VON
CF
(8
AUS
ZEAMAYS
56
III.6.
IDENTIFIZIERUNG
VERSCHIEDENER
ISOFORMEN
DER
CFI-8-UNTEREINHEIT
56
BEI
ZEA
MAYS
A.
INHALTSVERZEICHNIS
_
III
M.6.I.
BIOCHEMISCHE
UND
BIOPHYSIKALISCHE
CHARAKTERISIERUNG
DER
BEIDEN
S-FORMEN
AUS
ZEA
MAYS
59
RA.6.I.I.
UNTERSUCHUNGEN
ZUR
LOKALISIERUNG
DES
8
A
-
UND
DES
OEA-PROTEINS
AUF
DEN
THYLAKOIDEN
59
M.6.1.2.
AMINOTERMINALE
SEQUENZIERUNG
DER
8
A
-
UND
8A-ISOFORM
60
RA.6.I.3.
UNTERSUCHUNG
ZUR
LOKALISATION
DER
METHIONINE
IN
DEN
8
A
-
UND
SS-ISOFONNEN
61
M.6.1.4.
MASSENSPEKTOMETRISCHE
UNTERSUCHUNG
DER
CFIS-PROTEINE
AUS
ZEA
MAYS
61
RA.6.I.5.
UNTERSUCHUNGEN
ZUR
MARKIERUNG
DER
8-ISOFORMEN
MIT
[
32
P]-ORTHOPHOSPHAT
64
M.6.2.
UNTERSUCHUNGEN
ZUR
RELEVANZ
DER
HETEROGENITAET
DER
3-PROTEINE
AUS
ZEA
MAYS
67
M.6.2.1.
LOKALISATION
DER
CFI-8
ISOFORMEN
IN
MESOPHYLL
UND
BUENDELSCHEIDENZELLEN
VON
MAIS
67
M.6.2.2.
MARKIERUNG
DER
8
A
-
UND
8
B
-
PROTEINE
AUS
MAIS
MIT
[
14
C]-LEUCIN
67
M.6.3.
ZUSAMMENFASSUNG
DER
ERGEBNISSE
ZUR
MIKROHETEROGENITAET
VON
CF]8
AUSZEA
MAYS
69
RA.7.
MIKROHETEROGENITAET
DER
CFIS-UNTEREINHEIT
IN
VERSCHIEDENEN
SPEZIES
69
IV.
DISKUSSION
71
V.
ZUSAMMENFASSUNG
/
SNMMARY
91/92
VI.
LITERATUR
93 |
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