Untersuchungen zur Antigenexpression, Proliferation und Zytotoxizität von CD56+33+ Zellen:
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Sprache: | German |
Veröffentlicht: |
1996
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Beschreibung: | Tübingen, Univ., Diss., 1996 (Nur beschränkt für den Austausch) |
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INHALTSVERZEICHNIS
1
EINLEITUNG
1
1.1
DIE
ROLLE
DES
IMMUNSYSTEMS
IN
DER
TUMORSBWEHR
1
1.2
NATUERLICHE
KILLERZEILEN
2
1.3
ZIELSETZUNG
DIESER
ARBEIT
8
2
GERAETE
UND
MATERIALIEN
10
2.1
GERAETE
10
2.2
EINWEGVERBRAUCHSMATERIAL
10
2.3
MEDIEN
UND
REAGENZIEN
11
2.3.1
KULTURMEDIUM
FUER
PMNC,
NK-ZELLEN
UND
TUMORZELLEN
11
2.3.2
REAGENZIEN
11
2.4
ZYTOKINE
12
2.5
ZUR
OBERFLAECHENIMMUNFLUORESZENZ
VERWENDETE
MONOKLONALE
ANTIKOERPER
(MOAK)
13
2.5.1
INDIREKTE
ANREICHERUNG
DER
NK-ZELLEN
13
2.5.2
INDIREKTE
DOPPELMARKIERUNG
ZUR
FACS-SORTIERUNG
13
2.5.3
DIREKTE
EINFACH-,
DOPPEL
UND
DREIFACHMARKIERUNGEN
14
2.5.3.1
MIT
T-LYMPHOZYTEN
REAGIERENDE
MOAK
14
2.5.3.2
MIT
B-LYMPHOZYTEN
REAGIERENDE
MOAK
14
2.5.3.3
MIT
NATUERLICHEN
KILLERZELLEN
REAGIERENDE
MOAK
14
INHALTSVERZEICHNIS
2.5.3.4
MIT
MONOZYTEN/MAKROPHAGEN
UND
GRANULOZYTEN
REAGIERENDE
MOAK
15
2.5.3.5
ANTI-HPCA,
ANTI-HUMAN
PROGENITOR
CELL
ANTIGEN
15
2.53.6
MIT
ZELL-ADHAESIONS-MOLEKUELEN
REAGIERENDE
MOAK15
2.5.3.7
MIT
ZELL-AKTIVIERUNGS
UND
PROLIFERATIONS-ANTIGENEN
REAGIERENDE
MOAK
16
2.5.3.8
MIT
DEM
HAUPTHISTOKOMPATIBILITAETSKOMPLEX
REAGIERENDE
MOAK
16
2.5.3.9
ZUR
INTEGRIN-SUPERFAMILIE
GEHOERENDE
MOAK
16
3
METHODEN
17
3.1
UNTERSUCHUNGSMATERIAL
17
3.1.1
ANMERKUNG
ZUR
NABELSCHNURBLUTENTNAHME
17
3.2
ISOLIERUNG
DER
MONONUKLEAEREN
ZELLEN
18
3.3
ANREICHERUNG
VON
NK-ZELLEN
AUS
MNC
18
3.3.1
METHODE
DER
ADHAERENZ
UEBER
NYLONWOLLE
18
3.3.2
IMMUNOMAGNETISCHE
SEPARATION
19
3.4
OBERFLAECHENMARKIERUNG
MIT
MOAK
20
3.4.1
DIREKTE
EINFACH-,
DOPPEL
UND
DREIFACHMARKIERUNGEN
21
3.4.2
INDIREKTE
DOPPELMARKIERUNGEN
21
3.5
DURCHFLUSSZYTOMETRIE
22
3.5.1
AUFBAU
EINES
DURCHFLUSSZYTOMETERS
(FACSCAN)
22
3.5.2
"CELL-SORTER"
FACSTARPLUS
22
3.5.3
FLUORESZENZAKTIVIERTE
ZELL-ANALYSE/SORTIERUNG
23
II
INHALTSVERZEICHNIS
3.6
MESSUNG
DER
ZYTOTOXIZITAET
VON
EFFEKTORZELLEN
MIT
DEM
51
-CHROM-FREISETZUNGSTEST
(CHROMIUM
RELESSE
ASSAY)
24
3.7
MESAUNG
DER
PROLIFERATION
MONONUKLEAERER
ZELLEN
NACH
STIMULATION
MIT
VERACHLEDENEN
ZYTOKINEN
25
3.7.1
BESTIMMUNG
DER
PROLIFERATION
VON
CD56+
NK-ZELLEN
AUS
NSB
UND
PERIPHERBLUT
ERWACHSENER
25
3.7.2
BESTIMMUNG
DER
PROLIFERATION
VON
CD56+
LEUKAEMIE
ZELLEN
AUS
DER
PROBE
DES
PATIENTEN
KLE
25
3.7.3
TESTANSATZ
FUER
DEN
TRITIUM-THYMIDINEINBAUTEST
26
3.8
LANGZEITKULTUREN
26
3.8.1
ZELLKULTUREN
AUS
NSB-PROBEN
26
3.8.2
LANGZEITKULTUREN
DER
MYELOMONOZYTAEREN
LEUKAEMIE
ZELLEN
DES
PATIENTEN
KLE
27
4
ERGEBNISSE
28
4.1
NABELSCHNURBLUT
28
4.1.1
ANREICHERUNG
VON
NK-ZELLEN
AUS
NABELSCHNURBLUT
28
4.1.2
CD56+
NK-ZELLEN
IM
NABELSCHNURBLUT
29
4.1.3
CD56+33+NK-ZELLEN
IM
NABELSCHNURBLUT
31
4.1.4
PHAENOTYPISIERUNG
VON
CD56+33+
NK-ZELLEN
AUS
NSB
33
4.1.5
ELEKTRONENMIKROSKOPISCHE
MORPHOLOGIE
NICHT
STIMULIERTER
CD56+33+
NK-ZELLEN
AUS
NSB
34
4.1.6
PROLIFERATION
UND
WACHSTUM
VON
ANGEREICHERTEN
NK-ZELLEN
AUS
NSB
36
4.1.6.1
EINFLUSS
VON
MONOZYTEN
AUF
NK-ZELL-PROLIFERATION
36
III
INHALTSVERZEICHNIS
4.1.6.2
FLUORESZENZAKTIVIERTE
ZELLANALYSE
VON
CD56+
BZW.
CD56+33+NK-ZELLEN
AUS
NSB-LANGZEITKULTUREN
39
4.1.6.3
PHAENOTYPISIERUNG
VON
IL2-STIMULIERTEN
CD56+33+
NK-ZELLEN
42
4.1.6.4
PROLIFERATION
UND
WACHSTUM
SORTIERTER
NK-ZELL-
SUBPOPULATIONEN
AUS
NABELSCHNURBLUT
44
4.1.7
ZYTOTOXISCHE
AKTIVITAET
VERSCHIEDEN
SORTIERTER
NK-ZELL-SUBPOPULATIONEN
AUS
NABELSCHNURBLUT
44
4.1.7.1
ZYTOTOXISCHE
AKTIVITAET
FRISCH
ANGEREICHERTER,
SORTIERTER
CD56+33+,
CD56+33-,
CD56BRIGHT+33-,
CD56DIM+
UND
CD56-33+
ZELLEN
44
4.1.7.2
EINFLUSS
VON
IL2
AUF
DIE
ZYTOTOXISCHE
AKTIVITAET
DER
NK-ZELLEN
GEGENUEBER
DEN
K562-TUMORZELLEN
45
4.2
PERIPHERBLUT
VON
GESUNDEN
ERWACHSENEN
49
4.2.1
CD56+33+
NK-ZELLEN
IM
PERIPHERBLUT
VON
GESUNDEN
ERWACHSENEN
49
4.2.2
PHAENOTYPISIERUNG
VON
NICHT
STIMULIERTEN
CD56+33+
NK-ZELLEN
AUS
DER
PERIPHEREN
BLUTPROBE
T.C.
49
4.2.3
PROLIFERATION
UND
WACHSTUM
VERSCHIEDEN
SORTIERTER
NK-ZELL-SUBPOPULATIONEN
AUS
PERIPHERBLUT
GESUNDER
ERWACHSENER
51
4.3
PERIPHERBLUT
VON
PATIENTEN
NACH
ABSCT
52
4.3.1
CD56+33+
NK-ZELLEN
IM
PERIPHERBLUT
VON
NEUROBLASTOM
PATIENTEN
NACH
ABSCT
UND
IL2-THERAPIE
52
4.3.2
PHAENOTYPISIERUNG
VON
NICHT
STIMULIERTEN
CD56+33+
NK-ZELLEN
AUS
PERIPHERBLUT
DES
PATIENTEN
V.S.
53
4.3.3
PHAENOTYPISIERUNG
VON
NICHT
STIMULIERTEN
CD56+33+
NK-ZELLEN
AUS
PERIPHERBLUT
DES
PATIENTEN
S.R.
55
IV
INHALTSVERZEICHNIS
4.4
PERIPHERBLUT
EINES
PATIENTEN
MIT
MYELOMONO
ZYTAERER
LEUKAEMIE
57
4.4.1
PHAENOTYPISIERUNG
VON
NICHT
STIMULIERTEN
MYELOMONO
ZYTAEREN
LEUKAEMIEZELLEN
57
4.4.2
PHAENOTYPISIERUNG
VON
NICHT
STIMULIERTEN
CD56+33+
LEUKAEMIEZELLEN
DES
PATIENTEN
KLE
60
4.4.3
PROLIFERATION
UND
WACHSTUM
DER
MYELOMONOZYTAEREN
LEUKAEMIEZELLEN
62
4.4.4
PHAENOTYPISIERUNG
DER
MYELOMONOZYTAEREN
LEUKAEMIEZELLEN
WAEHREND
DER
LANGZEITKULTIVIERUNG
66
4.4.5
EXPANSION
DER
MYELOMONOZYTAEREN
LEUKAEMIEZELLEN
DURCH
IL2-STIMULATION
69
4.4.6
PHAENOTYPISIERUNG
DER
MYELOMONOZYTAEREN
LEUKAEMIEZELLEN
NACH
81
TAEGIGER
KULTIVIERUNG
IN
IL2
70
4.4.7
ZYTOTOXISCHE
AKTIVITAET
DER
MYELOMONOZYTAEREN
ZELLEN
71
4.4.8
MORPHOLOGIE
DER
MYELOMONOZYTAEREN
LEUKAEMIEZELLEN
72
5
DISKUSSION
75
5.1
NK-ZELLEN
AUS
NSB
UND
AUS
PERIPHERBLUT
GESUNDER
ERWACHSENER
*
75
5.2
PHAENOTYPISIERUNG
DER
CD56+33+
NK-ZEILEN
AUS
NSB
UND
AUS
PERIPHERBLUT
GESUNDER
ERWACHSENER
80
5.3
WACHSTUM
UND
PROLIFERATION
DER
CD56+33+
NK-ZELLEN
AUS
NSB
UND
AUS
PERIPHERBLUT
GESUNDER
ERWACHSENER
80
5.4
ZYTOTOXISCHE
AKTIVITAET
DER
NK-ZELLEN
AUS
NSB
63
V
INHALTSVERZEICHNIS
5.5
PHAENOTYPISIERUNG
DER
CD56+33+
NK-ZELLEN
AUS
PERIPHERBLUT
VON
PATIENTEN
NACH
ABSCT
85
5.5.1
CD56+33+
NK-ZELLEN
DES
PATIENTEN
V.S.
NACH
ABSCT
UND
IL2-THERAPIE
85
5.5.2
CD56+33+
NK-ZELLEN
DES
PATIENTEN
S.R.
NACH
ABSCT
86
5.6
PHAENOTYPISIERUNG
DER
CD56+33+
LEUKAEMIE
ZELLEN
AUS
PERIPHERBIUT
DES
PATIENTEN
KLE
87
5.7
MOEGLICHKEITEN
FUER
DIE
ZUKUNFT
90
6
ZUSAMMENFASSUNG
91
7
LITERATURVERZEICHNIS
93
8
ANHANG
107
8.1
ABBILDUNGSVERZEICHNIS
107
8.2
TABELLENVERZEICHNIS
112
8.3
VERZEICHNIS
DER
ABKUERZUNGEN
114
VI |
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author | Frank, Daniela Maria Renate |
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