Bestimmung von Virulenzfaktoren boviner Shiga-Toxin-bildender Escherichia-coli-(STEC)-Stämme als Bewertungsgrundlage ihrer klinischen Bedeutung für Rind und Mensch:
Gespeichert in:
| 1. Verfasser: | |
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| Format: | Buch |
| Sprache: | German |
| Veröffentlicht: |
Aachen
Shaker
1997
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| Ausgabe: | Als Ms. gedr. |
| Schriftenreihe: | Berichte aus der Veterinärmedizin
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| Schlagworte: | |
| Online-Zugang: | Inhaltsverzeichnis |
| Beschreibung: | Zugl.: Giessen, Univ., Habil.-Schr., 1996 |
| Beschreibung: | VIII, 194 S. Ill., graph. Darst. |
| ISBN: | 3826523075 |
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INHALTSVERZEICHNIS
VERZEICHNIS
DER
ABKUERZUNGEN
VI
1.
EINLEITUNG
1
2.
SCHRIFTTUM
3
2.1.
ESCHERICHIA
COZZ-BEDINGTE
ENTEROPATHIEN
3
2.2.
ADHAESIONSFAKTOREN
DARMPATHOGENER
ZYTOTOXIN-BILDENDER
10
ESCHERICHIA
COZI-STAEMME
2.2.1.
FIMBRIENANTIGENE
HUMANER
SHIGA-TOXIN-BILDENDER
11
ESCHERICHIA
COZI-STAEMME
2.2.2.
AEUSSERE
MEMBRAN-PROTEINE
HUMANER
SHIGA-TOXIN
13
BILDENDER
ESCHERICHIA
COZI-STAEMME
2.2.3.
FIMBRIENANTIGENE DER
OEDEMKRANKHEITS-ERREGER
17
2.2.4
FIMBRIENANTIGENE
ENTEROAGGREGATIVER
ESCHERICHIA COLI
19
STAEMME
2.2.S.
FIMBRIENANTIGENE
NEKROTOXISCHER
ESCHERICHIA
COZI-STAEMME
20
EIGENE
UNTERSUCHUNGEN
23
3.
MATERIAL
UND
METHODEN
23
3.1.
ESCHERICHIA
COZI-REFERENZ
UND
KONTROLLSTAEMME
23
3.2.
PLASMIDVEKTOREN
UND
ESCHERICHIA
COLI-LABORSTAEMME
25
3.3.
EUKARYOTISCHE
ZELLKULTUREN
26
3.4.
ANALYTISCHE
TESTMETHODEN
ZUM
ANTIGEN
UND
GEN
28
NACHWEIS
BEI
ESCHERICHIA
COZI-STAEMMEN
3.4.1.
PROTEIN-ANALYTIK
28
3.4.I.I.
PRAEPARATION
AEUSSERER
MEMBRAN-PROTEINE
(OMP-PRAEPARATION)
28
3.4.I.2.
TRICINE-NATRIUM-DODECYL-SULFAT-POLYACRYLAMID-GELELEKTRO
28
PHORESE
(TRICINE-SDS-PAGE)
N
3.4.2.
DESOXYRIBONUKLEINSAEURE-ANALYTIK
29
3.4.2.I.
GEWINNUNG
VON
GENOMISCHER
DESOXYRIBONUKLEINSAEURE
29
HITZE-LYSE
29
PHENOL-CHLOROFBNN-EXTRAKTION
29
3.4.2.2.
GEWINNUNG
VON
PLASMID-DESOXYRIBONUKLEINSAEURE
30
ANIONEN-AUSTAUSCH-CHROMATOGRAPHIE
30
ALKALISCHE
LYSE
31
3.4.2.3.
DESOXYRIBONUKLEINSAEURE-HYBRIDISIERUNGSVERFAHREN
31
HERSTELLUNG
VON
POLYNUKLEOTIDSONDEN
31
DOT-BLOT
32
KOLONIE-BLOT
32
SOUTHERN-BLOT
32
DNS-DNS-HYBRIDISIERUNG
33
BERECHNUNG
DER
HYBRIDISIERUNGSSTRINGENZ
33
3.4.2.4.
CONTOUR-DAMPED
HOMOGENEOUS
ELECTRIC
FIELD
-
PULSFELD
33
GELELEKTROPHORESE
(CHEF-PFGE)
3.4.2.5.
POLYMERASE-KETTENREAKTION
(PCR)
34
OLIGONUKLEOTID-PRIMER
34
REAKTIONSANSAETZE
35
3.4.2.6.
RESTRIKTIONSENDONUKLEASEN-ANALYSE
40
3.4.2.7.
AUTOMATISIERTE
DESOXYRIBONUKLEINSAEURE-SEQUENZANALYSE
40
3.5.
FUNKTIONELLE
TESTSYSTEME
ZUM
NACHWEIS
BIOLOGISCHER
40
AKTIVITAETEN
VON
ESCHERICHIA
COZI-STAEMMEN
3.5.1.
BESTIMMUNG DER
STOFFWECHSELAKTIVITAET
40
3.5.2.
SEROVARBESTIMMUNG
41
3.5.3.
BESTIMMUNG DER
RESISTENZ
GEGEN
ANTIMIKROBIELLE
WIRKSTOFFE
41
3.5.4.
BESTIMMUNG DER
TOXINBILDUNG
41
3.5.4.I.
VEROZELL-ZYTOTOXIZITAETSTEST
41
3.5.4.2.
VEROZELL-NEUTRALISATIONSTEST
42
3.5.4.3.
BESTIMMUNG DER
HAEMOLYTISCHEN
AKTIVITAET
43
3.5.5.
BESTIMMUNG
DER
ADHAESIVITAET
43
M
3.5.5.I.
DECKGLAS-ADHAESIONSTEST
43
3.5.S.2.
MIKROTITERPLATTEN-ADHAESIONSTEST
44
3.S.5.3.
FLUORESZENZ-AKTIN-FAERBUNGSTEST
(FAS-TEST)
45
3.6.
COMPUTERPROGRAMME
46
3.7.
STATISTIK
46
EIGENE
UNTERSUCHUNGEN
47
4.
ERGEBNISSE
47
4.1.
NACHWEIS
SHIGA-TOXIN-BILDENDER
ESCHERICHIA
COLI
47
FELDSTAEMME
4.1.1.
SHIGA-TOXIN-GEN-NACHWEIS
47
4.1.2.
SHIGA-TOXIN-BILDUNG
48
4.1.3.
CHARAKTERISIERUNG
VON
SHIGA-TOXIN-VARIANTEN
49
POLYMERASE-KETTENREAKTION
UND
RESTRIKTIONSENDONUKLEASEN
49
ANALYSE
DESOXYRIBONUKLEINSAEURE-SEQUENZ-ANALYSE
52
4.1.4.
HAEMOLYSIN-BILDUNG
55
4.I.4.I.
NACHWEIS
DES
HAEMOLYSIN-GENS
HLY
E
HEC
55
4.1.5.
NACHWEIS
DER
ESCHERICHIA
COZZ-ENTEROTOXINGENE
ELT-I
UND
EST-I
56
4.1.6.
ADHAESION
IM
ZELLKULTUR-MODELL
57
4.1.7.
"
ATTACHING-AND-EFFACING
"
-EIGENSCHAFTEN
59
4.I.7.I.
NACHWEIS
DER
ESCHERICHIA
COLI-GENE
YYATTACHING-AND-EFFACING
"
60
(EAE)
UND
YYSEZERNIERTES
PROTEIN
B
"
(ESPB)
4.1.8.
NACHWEIS
DER
ESCHERICHIA
COZI-STRUKTURGENE
FUER
DIE
BUENDLE
64
FORMING
PILI
(BFPA)
UND
DIE
F18AB-FIMBRIEN
(FEDA)
4.1.9.
SEROVARE
64
4.2.
VERGLEICHENDE
CHARAKTERISIERUNG
DER
STAEMME
VON
NICHT
67
DURCHFALLKRANKEN
UND
DURCHFALLKRANKEN
KAELBERN
4.2.1.
SHIGA-TOXINE
67
4.2.2.
EHEC-HAEMOLYSIN-BILDUNG
68
4.2.3.
SEROVARE
68
IV
4.2.4.
ADHAESIVE
EIGENSCHAFTEN
70
4.2.5.
YYATTACHING-AND-EFFACING
"
-EIGENSCHAFTEN
74
4.2.5.I.
VERGLEICH
DER
ADHAESIVEN
EIGENSCHAFTEN
MIT
DEN
YYATTACHING
77
AND-EFFACING
"
-EIGENSCHAFTEN
4.2.OE.2.
ESCHERICHIA
COLI-GENE
YYATTACHING-AND-EFFACING
"
78
(EAE)
UND
YYSEZERNIERTES
PROTEIN
B
"
(ESPB)
4.2.S.3.
EAE,
ESPB
UND
YYATTACHING-AND-EFFACING
"
-
EIGENSCHAFT
79
4.2.S.4.
EAE,
ESPB,
STX
UND
HLY
E
HEC
19
4.2.5.5.
SEROVARE
UND
EAE
SOWIE
ESPB-GENE
81
4.2.5.6.
SEQUENTIELLE
POLYMERASE-KETTENREAKTION
ZUR
DIFFERENZIERUNG
83
DER
EAE-GENE
4.3.
VERGLEICHENDE
CHARAKTERISIERUNG
BOVINER
UND HUMANER
88
SHIGA-TOXIN-BILDENDER
ESCHERICHIA
COZI-STAEMME
SOWIE
HUMANER
ENTEROPATHOGENER
ESCHERICHIA
COZI-STAEMME
4.3.1.
NACHWEIS
VON
PLASMIDEN
88
4.3.2.
NACHWEIS
DER
ADHAESIVITAET
UND
DER
YYATTACHING-AND-EFFACING
"
-
91
EIGENSCHAFT
4.4.
UNTERSUCHUNGEN
ZUR
BEDEUTUNG
DES
GROSSEN
EHEC-VIRULENZ
95
PLASMIDS
FUER
DIE
ADHAESIVEN
EIGENSCHAFTEN
IN
VITRO
4.4.1.
CHARAKTERISIERUNG
ISOGENER
EHEC-VIRULENZPLASMID-VARIANTEN
95
4.4.2.
FUNKTION
DES
GROSSEN
EHEC-VIRULENZPLASMIDS
FUER
DIE
ADHAESION
97
4.4.3.
FUNKTION
DES
GROSSEN
EHEC-VIRULENZPLASMIDS
FUER
DIE
103
AUSLOESUNG DER
YYATTACHING-AND-EFFACING
"
-LAESION
4.5.
UNTERSUCHUNGEN
ZUR
KLONALEN
VERWANDTSCHAFT
BOVINER
108
SHIGA-TOXIN-BILDENDER
ESCHERICHIA
COZI-STAEMME
DER
O-GRUPPE
118
4.5.1.
VIRULENZFAKTOREN
108
4.5.2.
RESISTENZ
GEGEN
ANTIMIKROBIELLE
WIRKSTOFFE
110
4.5.3.
PLASMIDPROFIL-ANALYSE
112
4.5.4.
MAKRO-RESTRIKTIONSENDONUKLEASEN-ANAIYSE
116
4.5.5.
REPETITIVE
ELEMENT-POLYMERASE-KETTENREAKTION
119
V
5.
BESPRECHUNG
DER
ERGEBNISSE
120
6.
ZUSAMMENFASSUNG
138
SUMMARY
142
7.
LITERATURVERZEICHNIS
145
ANHANG
188
DANKSAGUNG
194 |
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| author | Wieler, Lothar H. 1961- |
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