Entwicklung und Anwendung einer neuartigen Technik zur Einzelzellisolierung:
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1996
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INHALTSVERZEICHNIS
I
INHALTSVERZEICHNIS
I
EINLEITUNG
_
1
II
MATERIAL
UND
METHODEN
_
11
IL1
BEZUGSQUELLEN
.
11
II.
1.1
CHEMISCHE
SUBSTANZEN
.
11
II.
1.2
SONSTIGE
MATERIALIEN
.
12
IL2
VERWENDETE
ORGANISMEN,
MEDIEN
UND
KULTURBEDINGUNGEN.
13
II.3
STERILISATION
.
13
U.4
MESSUNG
DES
WACHSTUMS
.
13
IL5
PHASENKONTRASTINIKROSKOPIE
.
13
II.6
FOTOGRAFIE
.
14
N.7
DAS
LASERMIKROSKOP
.
,
.
14
H.8
DIE
ISOLIERUNGSEINHEIT
.
17
II.9
ABLAUF
DER
ISOLIERUNG
.
18
II.9.1
ISOLIERUNG
UNTER
AEROBEN
BEDINGUNGEN
.
18
11.9.2
ISOLIERUNG
UNTER
ANNAEHERND
ANAEROBEN
BEDINGUNGEN
.
23
II.9.3
ISOLIERUNG
UNTER
ANAEROBEN
BEDINGUNGEN
.
24
II.9.4
FUER
ANSCHLIESSENDE
PCR-TECHNIK
GEEIGNETE
ISOLIERUNG
.
24
ILIO
KONTROLLEN
FUER
LASERISOLIERUNGSEXPERIMENTE
.
25
II.
10.1
LEBENDZELLZAHLBESTIMMUNG
IN
DER
AUSGANGSKULTUR
.
25
II.
10.2
EINZELZELLNACHWEIS
.
25
II.
10.2.1
PLATTIERUNG
.
25
11.10.2.2
FLUESSIGKULTURPARALLELEN
.
26
11.11
OBJEKTIVKUEHLUNG
.26
N
INHALTSVERZEICHNIS
11.12
FAERBUNGSMETHODEN
ZUR
UNTERSCHEIDUNG
LEBENDER
UND
TOTER
EINZELZELLEN
-
-
.27
II.
12.1
ESTERASESUBSTRATFARBSTOFFE
.
27
II.
12.1.1
UNTERSCHEIDUNGSPRINZIP
.
27
N.12.1.2
VERWENDETE
FLUORESZENZFARBSTOFFE
.
28
H.12.1.3
FAERBUNG
.29
II.
12.2
MEMBRANPOTENTIALSENSITIVE
FARBSTOFFE
.
29
II.12.2.1
UNTERSCHEIDUNGSPRINZIP
.
29
UE.12.2.2
VERWENDETE
FLUORESZENZFARBSTOFFE
.
31
II.12.2.3
FAERBUNG
.
31
11.13
LANGZEITINKUBATION
.
-
.
-
.32
III
ERGEBNISSE
_
33
III.
1
VERBESSERUNG
DES
ISOLIERUNGSSYSTEMS
.
-
.33
III.
1.1
UEBERPRUEFUNG
DER
ZUVERLAESSIGKEIT
DES
ISOLIERUNGSSYSTEMS
.
.
.
33
III.
1.2
TRANSFER
VON
EINZELZELLEN
IN
STERILES
MEDIUM
.
34
III.
1.3
VEREINZELUNGSDAUER
.
35
III
1.4
MEDIENFILTRATION
.
36
III.
1.5
KAPILLARENBESCHICHTUNG
.
36
M.2
EINFLUSS
VON
SAUERSTOFF
UND
WACHSTUMSPHASE
AUF
DEN
ISOLIERUNGSERFOLG.
.
.36
M.3
GEWINNUNG
VON
REINKULTUREN
MIT
DEM
LASERMIKROSKOP
.
37
III.3.1
HYPERTHERMOPHILE
BAKTERIEN
UND
ARCHAEEN
.
37
III.3.2
PROKARYONTEN
MIT
NIEDRIGEREN
WACHSTUMSTEMPERATUREN
.
40
III.3.3
EUKARYONTEN
.
42
III.3.4
ISOLIERUNGSEFFIZIENZ
UND
VERSUCHSDAUER
.
42
III.4
BEITRAG
ZUR
KLAERUNG
MORPHOLOGISCHER
FRAGESTELLUNGEN
.
43
III.4.1
STAPHYLOTHERMUS
MARINUS
-
YYRIESENZELLENPHAENOMEN
"
.
43
III.4.2
YYGOLFSCHLAEGERFORMEN
"
VON
PYROBACULUM
UND
THERMOPROTEUS
.
44
HI.5
WEITERE
EINSATZMOEGLICHKEITEN
DES
LASERMIKROSKOPS
.
.44
III.5.1
EINSATZ
VON
ISOLIERTEN
EINZELZELLEN
FUER
DIE
POLYMERASE-KETTENREAKTION
(PCR)
.
44
III.5.2
ISOLIERUNG
IMMUNOMAGNETISCH
ANGEREICHERTER
ORGANISMEN
.
45
INHALTSVERZEICHNIS
IN
IH.6
UNTERSCHEIDUNG
LEBENDER
UND
TOTER
EINZELZELLEN
HYPERTHERMOPHILER
ORGANISMEN.
46
HI.6.1
ESTERASESUBSTRATFARBSTOFFE
.46
M.6.2
MEMBRANPOTENTIALSENSITIVE
FARBSTOFFE
.47
III.6.2.1
AUSWAHL
EINES
GEEIGNETEN
FLUORESZENZFARBSTOFFES
.47
NI.6.2.2
ABSCHAETZUNG
DES
VERHAELTNISSES
LEBENDER
UND
TOTER
HYPERTHERMOPHILER
KOKKEN
IN
ORIGINALPROBEN
.
48
M.6.2.3
EINSATZ
EINES
FLUORESZENZFARBSTOFFES
BEI
ISOLIERUNGEN
VON
EINZELZELLEN
.49
M.7
LANGZEITINKUBATION
HYPERTHERMOPHILER
BAKTERIEN
UND
ARCHAEEN
.
50
III.
7.1
THERMOTOGA
MARITIMA
.
51
M.7.2
PYROBACULUM
ORGANOTROPHUM
.
51
M.7.3
THERMOCOCCUS
SP.
ISOLAT
RR
2
.
53
M.7.4
METHANOPYRUS
KANDLERI
.
55
IV
DISKUSSION
_.57
V
ZUSAMMENFASSUNG
.
65
VI
LITERATURVERZEICHNIS
_
67 |
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