Entwicklung eines In-vitro-Modellsystems zur Erfassung des atemtraktallergisierenden Potentials von Chemikalien: Projekt F 1398
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1. Verfasser: | |
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Format: | Buch |
Sprache: | German |
Veröffentlicht: |
Dortmund
Bundesanst. für Arbeitsschutz und Arbeitsmedizin
1996
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1
EINLEITUNG
1
1.1
AUFGABEN
DER
IMMUNTOXIKOLOGIE
1
1.2
ANMERKUNGEN
ZU
TIEREXPERIMENTEN
2
1.3
GRUNDLAGEN
DES
FORSCHUNGSPROJEKTES
-BETRACHTUNGEN
ZU
HUMANEN
ZELLMODELLEN
4
2
ERLAEUTERUNG
ZU
DEN
EXPERIMENTALANSAETZEN
UND
MODELLEN
13
2.1
NACHWEIS
VON
PSEUDOALLERGISCHEN
REAKTIONEN:
13
2.2
DIE
ALLERGISCHE
SENSIBILISIERUNG
15
2.3
MIKROBIELLE
INFEKTABWEHR
16
3
WAHL
DER
ZELLMODELLE:
(S.ABB.
3)
16
3.1
AN
NEUTROPHILEN
GRANULOZYTEN
18
3.2
THROMBOZYTEN
18
3.3
LYMPHOZYTEN,
MONOZYTEN,
BASOPHILE
(LMB)
19
3.4
BASOPHILE
19
4
PERIPHERE
ZELLEN
DES
MENSCHEN
-
ATEMWEGSTRAKTSENSIBILISIERENDE
SUBSTANZEN:
UEBERLEGUNGEN
ZUR
AUSWAHL
DER
ZELLPOPULATION
21
5
REAKTIVITAET
VON
HUMANZELLEN
21
6
PRIMING
VON
IMMUNEFFEKTORZELLEN
22
7
AUSWAHL
DER
SUBSTANZEN
26
8
AUSWAHL
DER
GEMESSENEN
PARAMETER:
27
9
MATERIALIEN
29
9.1
GERAETE
29
9.2
KLEINMATERIAL
29
9.3
CHEMIKALIENLISTE
31
V
9.4
RADIOAKTIV
MARKIERTE
SUBSTANZEN
31
9.5
INTERLEUKINE
UND
WACHSTUMSHORMONE
31
9.6
PUFFER
UND
REAGENTIEN
32
10
METHODEN
33
10.1
BLUTAUFTRENNUNG
(
DICHTEGRADIENTENZENTRIFUGATION)
33
10.2
EPITHELZELLEN
34
10.3
HEP-2
ZELLEN
34
10.4
A549
ZELLEN
34
10.5
STIMULATION
VON
RESUSPENDIERTEN
ZELLEN
34
10.6
VORSTIMULATION
VON
ZELLEN
("PRIMING")
34
10.7
PRAEPARATION
DES
RS
V
34
10.8
LACTATDEHYDROGENASE
(LDH)
-
FREISETZUNG
35
10.9
CHEMILUMINESZENZ
35
10.10
LEUKOTRIEN-,
(HETE-,HHT-)
BESTIMMUNG
MITTELS
35
10.11
SEROTONIN
(5HT)
BESTIMMUNG
MITTELS
36
10.12
HISTAMINFREISETZUNG
37
10.13
IL-8
ELISA
37
10.14
TNF-ELISA
38
10.15
"POLYMERASE
CHAIN
REACTION
(PCR)"
39
10.16
NORTHERN-BLOT-VERFAHREN
40
10.17
PROTEINBESTIMMUNGEN
42
10.18
CD-23
ASSAY
42
10.19
IGE-ELISA
44
11
RESULTATE:
45
11.1
PERSULFATE
-
SULFATE
45
VI
11.1.1
UNTERSUCHUNGEN
ZUR
CHEMILUMINESZENZ
AUS
FMLP
STIMULIERTEN
NEUTROPHILEN.
-
45
11.1.2
EINFLUSS
DER
PERSULFATE
AUF
DIE
LEUKOTRIEN
B
4
-FREISETZUNG
AUS
HUMANEN
NEUTROPHI
LEN
NACH
STIMULATION
MIT
DEM
KALZIUM-IONOPHOR
A23
187.
47
11.1.3
EINFLUSS
VON
PERSULFATEN
AUF
DIE
LEUKOTRIEN
B
4
-FREISETZUNG
AUS
HUMANEN
NEUTRO
PHILEN
NACH
STIMULATION
MIT
NATRIUMFLUORID.
47
11.1.4
EINFLUSS
DER
PERSULFATEN
AUF
DIE
BILDUNG
VON
LEUKOTRIEN
B
4
AUS
HUMANEN
NEUTRO
PHILEN
NACH
STIMULATION
MIT
FMLP.
68
11.1.5
EINFLUSS
VON
PERSULFATEN
AUF
DIE
HISTAMINFREISETZUNG
AUS
HUMANEN
LMBS.
69
11.1.6
EINFLUSS
VON
PERSULFAT/SULFAT
AUF
ARACHIDONSAEUREMETABOLITE
69
11.1.7
EINFLUSS
VON
PERSULFAT
AUF
DIE
FREISETZUNG
DER
12-HYDROXYEICOSATETRAENSAEURE
AUS
MENSCHLICHEN
THROMBOZYTEN.
73
11.1.8
EINFLUSS
VON
PERSULFAT
AUF
DIE
THROMBININDUZIERTE
SEROTONINFREISETZUNG
90
11.1.9
EINFLUSS
VON
PERSULFAT/SULFAT
AUF
DAS
ZELLULAERE
,
,PRIMING
"
.
90
11.1.10
EINFLUSS
VON
PERSULFATEN
AUF
DIE
FREISETZUNG
VON
INTERLEUKIN-8
AUS
HUMANEN
NEUTROPHILEN.
95
11.1.11
EINFLUSS
DER
PERSULFATE
AUF
DIE
SYNTHESE
DER
INTERLEUKIN-8-SPEZIFISCHEN
MRNA
DURCH
DEN
NORTHERN
BLOT.
102
11.1.12
EINFLUSS
VON
PERSULFAT/SULFAT
AUF
DIE
SS-AKTIN
MRNA
UND
INTERLEUKIN-6-MRNA.
103
11.1.13
EINFLUSS
VON
PERSULFAT
AUF
DIE
STABILITAET
DES
ZYTOKIN;
DAS
INTERLEUKIN-8
ALS
CHE
MOTAKTISCH
AKTIVES
ZYTOKIN
WIRD
AUS
NEUTROPHILEN
WIE
AUCH
MONOZYTEN
FREIGE
SETZT.
103
11.1.14
EINFLUSS
VON
PERSULFAT/SULFAT
AUF
ZYTOKIN
"
GEPRIMTE
"
HUMANE
EFFEKTORZELLEN.
107
11.1.15
ZUSAMMENFASSUNG:
119
11.1.16
EINFLUSS
DER
VIRALEN
INFEKTION
AUF
ZYTOKIN
"
GEPRIMTE
"
UND
MIT
PERSULFAT/SULFAT
BEHANDELTE
HUMANE
EFFEKTORZELLEN.
120
11.1.17
ZUSAMMENFASSUNG
145
11.1.18
EINFLUSS
DER
KURZFRISTIGEN
EXPOSITION
GEGENUEBER
PERSULFAT
IM
VERGLEICH
ZUR
LAEN
GERFRISTIGEN
EXPOSITION.
146
11.1.19
ZUSAMMENFASSUNG:
156
11.2
UNTERSUCHUNGEN
ZUM
DIPHENYLMETHAN-4,4-DI-ISOCYANAT
(MDI),
4,4
'
DIAMINODIPHENYLMETHAN
(MDA)
UND ZUM
POLYHAMSTOFF
(UREA).
157
VII
11.2.1
UNTERSUCHUNG
VON
MDI,
MDA
UND
UREA
AUF
DIE
VIABILITAET
VON
HUMANEN
EFFEK
TORZELLEN.
157
11.2.2
CHEMILUMINESZENZ:
162
11.2.3
EINFLUSS
VON
MDI
UND
MDA
AUF
DIE
LEUKOTRIENFREISETZUNG.
164
11.2.4
EINFLUSS
VON
MDI,
MDA
AUF
DIE
LIPIDMEDIATORFREISETZUNG
AUS
HUMANEN
THROMBO
ZYTEN.
175
11.2.5
EINFLUSS
VON
MDI
UND
MDA
AUF
DIE
SEROTONINFREISETZUNG
190
11.2.6
EINFLUSS
VON
MDI,
MDA
UND
UREA
AUF
DIE
HISTAMINFREISETZUNG
194
11.2.7
EINFLUSS
VON
MDI,
MDA
UND
UREA
AUF
DIE
INTERLEUKIN-8-FREISETZUNG.
196
11.2.8
EINFLUSS
VON
MDI,
MDA
UND
UREA
AUF
ZYTOKIN
"
GEPRIMTE
"
HUMANE
EFFEKTOR
ZELLEN
-
AKTIVIERUNG
DURCH
FMLP.
199
11.2.9
EINFLUSS
AUF
DIE
TNF-A-FREISETZUNG
206
11.2.
LO
EINFLUSS
DES
VIRALEN
STIMULUS
AUF
DIE
ZYTOKINFREISETZUNG
AUS
HUMANEN
EFFEKTOR
ZELLEN
IN
DER
ANWESENHEIT
VON
ZYTOKINEN.
210
11.2.11
EINFLUSS
VON
MIKROBIELLEN
STIMULI
AUF
DIE
FREISETZUNG
VON
ZYTOKINEN.
235
11.2.12
ZUSAMMENFASSUNG:
235
11.3
UNTERSUCHUNGEN
ZU
PHTALSAEURE-ANHYDRID
(PSA)
UND
PHTALSAEURE
(PS).
242
11.3.1
CHEMILUMINESZENZ:
242
11.3.2
EINFLUSS
VON
PSA/PS
AUF
DIE
FUNKTION
HUMANER
THROMBOZYTEN.
245
11.3.3
EINFLUSS
VON
PSA/PS
AUF
DIE
HISTAMINFREISETZUNG.
253
11.3.4
EINFLUSS
VON
PSA
UND
PS
AUF
DIE
LEUKOTRIENFREISETZUNG
255
11.3.5
EINFLUSS
VON
PSA/PS
AUF
DIE
INTERLEUKIN-8-FREISETZUNG
AUS
HUMANEN
NEUTROPHI
LEN.
257
11.3.6
ZUSAMMENFASSUNG:
257
11.3.7
EINFLUSS
VON
PSA/PS
AUF
ZYTOKINAKTIVIERTE
IMMUNEFFEKTORZELLEN.
260
11.3.8
EINFLUSS
VON
PSA
UND
PS
AUF
ZYTOKINGEPRIMTE
HUMANE
EFFEKTORZELLEN
-
STIMU
LATION
DURCH
RSV.
267
11.3.9
EINFLUSS
VON
MIKROBIELLEN
STIMULI
(RSV,
SEB,
RSV/SEB
SOWIE
PHOSPHOLIPASE
C)
AUF
DIE
ZYTOKINFREISETZUNG.
276
12
EINFLUSS
DER
ATEMWEGSTRAKTSENSIBILISIERENDEN
SUBSTANZEN
AUF
ZELLULAERE
PARAMETER. 277
12.1
CD23
EXPRESSION:
282
VIII
12.2
IL-4
INDUZIERTE
IGE-SYNTHESE
292
12.3
ZUSAMMENFASSUNG:
292
13
AUSBLICK
305
14
ZUSAMMENFASSUNG:
308
15
LITERATURVERZEICHNIS
317 |
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