Veränderungen des Tumorsuppressorgens p53 in humanen duktalen Pankreaskarzinom-Zellinien:
Gespeichert in:
| 1. Verfasser: | |
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| Format: | Buch |
| Sprache: | German |
| Veröffentlicht: |
Marburg
Görich & Weiershäuser
1996
|
| Schriftenreihe: | Wissenschaft in Dissertationen
157 |
| Schlagworte: | |
| Online-Zugang: | Inhaltsverzeichnis |
| Beschreibung: | Zugl.: Marburg, Univ., Diss., 1996 |
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INHALTSVERZEICHNIS
SEITE
1.
EINLEITUNG
8
1.5
FRAGESTELLUNG
14
1.1
DAS
PANKREASKARZINOM:
AETIOLOGIE,
EPIDEMIOLOGIE,
KLINIK,
THERAPIE
UND
PROGNOSE
8
1.2
DIE
MULTIGENETISCHE
NATUR
DER
KARZINOGENESE
9
1.3
MOLEKULARE
VERAENDERUNGEN
DES
PANKREASKARZINOMS
11
1.4
DAS
P53-TUMORSUPPRESSORGEN:
STRUKTUR
UND
FUNKTION
11
2.
MATERIAL
16
2.1
ENZYME
16
2.2
KITS
UND
ASSAYS
16
2.3
REAGENZIEN
18
2.4
PLASMID
20
2.5
BAKTERIENSTAMM
20
2.6
CDNA
21
2.7
PANKREASKARZINOM-ZELLINIEN
21
2.8
PRIMER
22
2.9
GERAETE
22
2.10
PUFFER
23
2.11
LOESUNGEN
25
2.12
MEDIEN
27
4
3.
3.1
3.2
3.3
3.4
3.4.1
3.4.2
3.4.3
3.4.4
3.5
3.5.1
3.5.2
3.5.3
3.6
3.6.1
3.6.2
3.6.3
3.6.4
3.6.5
3.6.6
3.7
3.7.1
3.7.2
3.7.3
3.7.4
METHODEN
29
SICHERHEITSBESTIMMUNGEN
UND
VORBEMERKUNGEN
29
EXPERIMENTELLER
AUFBAU
29
ZELLKULTIVIERUNG
31
P53-PROTEINBESTIMMUNG
31
ZELLEXTRAKTHERSTELLUNG
AUS
HUMANEN
PANKREASKARZINOM
ZELLINIEN
31
P53-ELISA
32
GESAMTPROTEINBESTIMMUNG
32
AUSWERTUNG
33
ISOLIERUNG,
REINIGUNG
UND
QUANTIFIZIERUNG
VON
GENOMISCHER
DNA
UND
RNA
AUS
HUMANEN
PANKREASKARZINOM-ZELLINIEN
33
ISOLIERUNG
UND
REINIGUNG
VON
GENOMISCHER
DNA
33
ISOLIERUNG
UND
REINIGUNG
VON
RNA
33
PHOTOMETRISCHE
QUANTIFIZIERUNG
VON
DNA
UND
RNA
34
NORTHEM-BLOT-ANALYSE
35
FORMALDEHYD-GELELEKTROPHORESE
35
NORTHERN-BLOT
35
MARKIERUNG
DER
P53-CDNA
DURCH
"RANDOM
PRIMED
LABELING"
35
1
8S-RRNA-OLIGONUKLEOTID-LABELING
36
HYBRIDISIERUNGSBEDINGUNGEN
DES
NORTHEM-BLOTS
37
DENSITOMETRISCHE
AUSWERTUNG
DES
NORTHEM-BLOTS
37
AMPLIFIZIERUNG
UND
KLONIERUNG
DER
P53-DNA
38
P53-DNA-AMPLIFIZIERUNG
DURCH
DIE
POLYMERASEKETTEN
REAKTION
(PCR)
38
ANALYTISCHE
AGAROSE-GELELEKTROPHORESE
39
RESTRIKTION
VON
AMPLIFIZIERTER
DNA
UND
VEKTORPLASMID
39
REINIGUNG
DER
AMPLIFIZIERTEN
DNA
DURCH
PRAEPARATIVE
AGAROSE-GELELEKTROPHORESE
UND
SAURE
PHENOLEXTRAKTION
40
5
3.7.5
DEPHOSPHORYLIERUNG
DES
VEKTORS
MIT
CALF
INTESTINE
PHOSPHATASE
(CIP)
40
3.7.6
LIGATION
41
3.7.7
TRANSFORMATION
41
3.7.8
VERMEHRUNG
UND
ISOLATION
VON
REKOMBINANTER
DNA
42
3.8
DNA-SEQUENZANALYSE
DER
KLONIERTEN
P53-DNA
43
3.8.1
SEQUENZREAKTION
43
3.8.2
HOCHSPANNUNGS-POLYACRYLAMID-GELELEKTROPHORESE
44
3.8.3
PROZESSIEREN
UND
EXPONIEREN
DER
SEQUENZGELE
44
4.
ERGEBNISSE
45
4.1
ANALYSE
DER
P53-PROTEINEXPRESSION
IN
HUMANEN
PANKREASKARZINOM-ZELLINIEN
45
4.2
ANALYSE
DER
P53-MRNA-EXPRESSION
IN
HUMANEN
PANKREASKARZINOM-ZELLINIEN
46
4.3
VERGLEICH
VON
P53-PROTEIN
UND
P53-MRNA-EXPRESSION
IN
HUMANEN
PANKREASKARZINOM-ZELLINIEN
48
4.4
SEQUENZANALYSE
DES
TUMORSUPPRESSORGENS
P53
IN
HUMANEN
PANKREASKARZINOM-ZELLINIEN
49
5.
DISKUSSION
53
5.1
P53-EXPRESSION
BEIM
DUKTALEN
PANKREASKARZINOM
53
5.2
P53-MRNA-EXPRESSION
BEIM
DUKTALEN
PANKREASKARZINOM
54
5.3
MUTATIONEN
IM
P53-GEN
BEIM
DUKTALEN
PANKREASKARZINOM
55
5.4
VERGLEICH
MIT
ERGEBNISSEN
ANDERER
AUTOREN
56
5.5
P53-MUTATIONEN
UND
THERAPIE
58
5.6
DIE
MULTIGENETISCHE
NATUR
DER
PANKREAS-KARZINOGENESE
59
5.7
SCHLUSSFOLGERUNGEN
60
6
6.
ZUSAMMENFASSUNG
61
7.
ABKUERZUNGSVERZEICHNIS
62
8.
LITERATURVERZEICHNIS
64
7 |
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