Struktur und Funktion des Assimilat-Ferntransportsystems der marinen Rotalge Delesseria sanguinea:
Gespeichert in:
| 1. Verfasser: | |
|---|---|
| Format: | Abschlussarbeit Buch |
| Sprache: | German |
| Veröffentlicht: |
1996
|
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| Online-Zugang: | Inhaltsverzeichnis |
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I
NHALTSVERZEICHNIS
INHALTSVERZEICHNIS
SEITE
VERZEICHNIS
DER
ABBILDUNGEN
UND
BILDTAFELN
.
VII
VERZEICHNIS
DER
TABELLEN
.
XV
ABKUERZUNGSVERZEICHNIS
.
XVI
ABKUERZUNGSVERZEICHNIS:
BILDTAFELN
.
XVIII
1.
EINLEITUNG
.
1
2.
MATERIAL
UND
METHODEN
.
8
2.1.
LISTE
DER
VERWENDETEN
CHEMIKALIEN
UND
PRODUKTE
.
8
2.2.
PFLANZENMATERIAL
UND
HAELTERUNGSBEDINGUNGEN
.
10
23.
LICHTMIKROSKOPIE,
TRANSMISSIONS-UND
RASTERELEKTRONENMIKROSKOPIE.
10
2.3.1.
LICHTMIKROSKOPISCHE
UNTERSUCHUNGEN
AN
HANDSCHNITTEN
.
11
2.3.1.1.
VITALITAETSKONTROLLEN
VON
TRANSPORTZELLEN
.
11
2.3.1.2.
DARSTELLUNG
DER
ZENTRALVAKUOLE
.
11
23.1.3.
KEMZAEHLUNG
IN
TRANSPORTZELLEN
.
11
2.3.1.4.
AUTOFLUORESZENZ
.
12
2.3.2.
LICHTMIKROSKOPIE
(LM)
UND
TRANSMISSIONSELEKTRONENMIKROSKOPIE
(TEM)
FIXIERTER
UND
EINGEBETTETER
GEWEBESCHNITTE
.
12
23.2.1.
FIXIERUNG
UND
EINBETTUNG
.
12
2.3.2.I.I.
FIXIERUNG
DER
ONTOGENETISCH
JUNGEN
PHYLLOIDSPITZEN
UND
DER
MITTELALTEN
PHYLLOIDBEREICHE
.
12
2.3.2.I.2.
FIXIERUNG
UND
EINBETTUNG
VON
AUSDIFFERENZIERTEN
DIESJAEHRIGEN
UND
VORJAEHRIGEN
MITTELRIPPEN
.
13
23.2.2.
SEMI
UND
ULTRADUENNSCHNITTE
.
14
2.3.23.
FAERBUNG
VON
SEMIDUENNSCHNITTEN
.
14
23.2.4.
NACHKONTRASTIERUNG
VON
ULTRADUENNSCHNITTEN
.
14
2.3.3.
MIKROAUTORADIOGRAPHIE
.
15
2.33.1.
KRYOFIXIERUNG,
GEFRIERSUBSTITUTION
UND
EINBETTUNG
.
15
23.3.2.
PRAEPARATION
DER
SCHNITTE
.
15
I
NHALTSVERZEICHNIS
SEITE
2.3.4.
RASTER-ELEKTRONEMNIKROSKOPIE
.
17
2.3.4.1
.
FIXIERUNG
UND
KRITISCHE-PUNKT-TROCKNUNG
FUER
DIE
RASTER
ELEKTRONEMNIKROSKOPIE
.
17
2.3.4.2.
AUFBRECHEN
UND
GOLDBEDAMPFUNG
VON
GEWEBEPROBEN
FUER
DIE
RASTER-ELEKTRONENMIKROSKOPIE
.
17
2.3.5.
INUNUNCYTOCHEMISCHER
NACHWEIS
VON
TUBULIN
.
18
2.3.5.1.
FIXIERUNG
UND
EINBETTUNG
.
18
2.3.5.2.
POSTEMBEDDING-TECHNIK
ZUR
ANTI-TUBULIN
UND
ANTI-MAP
IMMUNOGOLD-ELEKTRONENMIKROSKOPIE
.
19
2.3.6.
NEGATIV
KONTRASTIERUNG
VON
IN
VITRO
POLYMERISIERTEM
TUBULIN
.
19
2.4.
14
C-TRANSPORTVERSNCHE.YY.20
2.4.1.
VERSUCHSAUFBAU
UND
VERSUCHSBEDINGUNGEN
.
20
2.4.1.1.
TRANSPORTVERSUCHE
MIT
GANZEN
PFLANZEN
.
21
2.4.I.2.
TRANSPORTVERSUCHE
MIT
ABGETRENNTEN
PHYLLOIDEN
.
23
2.4.2.
AUTORADIOGRAPHIE
VON
GESAMTEN
PFLANZEN
(MAKROAUTORADIOGRAPHIE)
.
23
2.4.3.
ANALYSE
DES
U
C-GEHALTES
DER
PROBEN
.
24
2.4.3.1.
ALKOHOLEXTRAKTION
.
24
2.4.3.2.
RUECKSTANDSANALYSE
.
25
2.4.3.3.
,4
C-GESAMTBESTIMMUNG
.
26
2.5.
C-PHOTOASSIMILATION
UNTER
KURZZEITPHOTOSYNTHESEBEDINGUNGEN
.
26
2.6.
13
C-PHOTOASSIMILATION,
1J
C-,
*H-NMR
_
26
2.7.
HEMMSTOFFVERSUCHEYYYYYYYYYYYYYYYYYYYYYYYYYYYYYYYY.YYYYYYYY.YYYYYY.YY.YYYYYYYYYYYYYYYYYYYYYYYYYY.YYYY.YYYY.YYYY.YY27
2.8.
CHROMATOGRAPHISCHE
METHODEN
.28
2.8.1.
DUENNSCHICHTCHROMATOGRAPHIE
.
28
2.8.2.
LONENAUSTAUSCHCHROMATOGRAPHIE
.
29
2.8.3.
AUFTRENNUNG
DER
NEUTRALEN
ZUCKERFRAKTION
DURCH
EINDIMENSIONALE
DC
.
29
2.8.4.
AUFTRENNUNG
DER
NEUTRALEN
ZUCKERFRAKTION
DURCH
HPLC
.
30
2.8.4.1.
ANREICHERUNG
DER
DISACCHARIDFRAKTION
.
30
2.8.5.
IDENTITAETSKONTROLLE
DER
ANGEREICHERTEN
DISACCHARIDFRAKTION
DURCH
(GC-MS)
.
30
2.9.
ENZYMATISCHE
HYDROLYSE
DER
ANGEREICHERTEN
DISACCHARIDFRAKTION
.31
2.10.
ISOLIERUNG
VON
TUBULIN
.31
2.10.1.
DEAE
SEPHADEX-ANIONENAUSTAUSCH
CHROMATOGRAPHIE
.
32
2.10.2.
AMMONIUMSULFATFAELLUNG
UND
ENTSALZUNG
.
32
2.10.3.
PROTEINBESTIMMUNG
.
32
2.11.
IN
VIFRO-POLYMERISATION
VON
TUBULIN
.33
II
I
NHALTSVERZEICHNIS
SEITE
2.12.
ELEKTROPHORETISCHE
METHODEN
NND
FAERBUNGEN
YYYYYYYY
YYYYYYYYYYYYYYYYYYYYYYYYYYYYYYYYYYYYYYYYYYYYYYYYYYYY
33
2.12.1.
SDS-POLYACRYLAMIDGELELEKTROPHORESE
(SDS-PAGE)
.
33
2.12.1.1.
HERSTELLUNG
DER
GELE
.
33
2.12.1.2.
PROBENVORBEREITUNG
.
34
2.12.1.3.
ELEKTROPHORESE
.
35
2.12.2.
SILBERFAERBUNG
DER
GELE
.
35
2.12.3.
WESTERN
BLOT
.
36
2.12.3.1.
INDIA-INK-FAERBUNG
VON
PROTEINEN
.
37
2.13.
IMMUNOBLOT
.38
3.
ERGEBNISSE
3.1.
AUTORADIOGRAPHISCHER
NACHWEIS
DES
ASSIMILATTRANSPORTS
.
39
3.1.1.
MAKROAUTORADIOGRAPHIE
.
39
3.1.2.
MIKROAUTORADIOGRAPHIE
.
39
3.2.
DIE
ONTOGENETISCHE
ENTWICKLUNG
DER
TRANSPORTZELLEN
.41
3.2.1.
DIE
TRANSPORTZELLEN
VON
BIS
ZU
1
MM
BASAL
DER
PHYLLOIDSPITZE
.
43
3.2.1.1.
CYTOPLASMA
.
43
3.2.1.2.
VESIKEL
UND
AUSBILDUNG
EINER
ZENTRALVAKUOLE
.
44
3.2.I.3.
MIKROTUBULI
.
45
3.2.I.4.
ORGANELLEN
.
46
3.2.I.4.I.
CHLOROPLASTEN
.
46
3.2.1.4.2.
ZELLKERNE
.
50
3.2.1.4.3.
MITOCHONDRIEN
.
50
3.2.1.5.
ENDOPLASMATISCHES
RETICULUM
(ER)
.
51
3.2.I.6.
DICTYOSOMEN
.
52
3.2.I.7.
SPEICHERSTOFFE
.
52
3.2.1.7.1.
PROTEINKRISTALLE
.
52
3.2.1.7.2.
STAERKEKOERNER
.
53
3.2.I.8.
TUEPFEL
.
53
3.2.1.9.
ORGANISATION
DES
PROTOPLASTEN
AM
ENDE
DIESES
DIFFERENZIERUNGS
STADIUMS
.
54
3.2.2.
TRANSPORTZELLEN
1
-
4
MM
VON
DER
PHYLLOIDSPITZE
ENTFERNT
.
56
3.2.2.1.
CYTOPLASMA
UND
VAKUOLE,
AUSBILDUNG
EINES
MICTOPLASMAS
.
56
3.2.2.2.
MIKROTUBULI
.
57
3.2.2.3.
ORGANELLEN
.
58
M
I
NHALTSVERZEICHNIS
SEITE
3.2.2.3.I.
CHLOROPLASTEN
.
58
3.2.2.S.2.
ZELLKERNE
.
58
3.2.2.4.
ENDOMEMBRANSYSTEM
.
59
3.2.2.5.
TUEPFEL
.
59
3.2.2.6.
DIE
ORGANISATION
DER
PROTOPLASTEN
DIESES
2.
DIFFERENZIERUNGSSTADIUMS.
59
3.2.3.
TRANSPORTZELLEN
4-10
MM
VON
DER
PHYLLOIDSPITZE
ENTFERNT
.
61
3.2.3.1.
MICTOPLASMA
.
61
3.2.3.2.
MIKROTUBULI
.
61
3.2.3.3.
ORGANELLEN
.
63
3.2.3.3.1.
CHLOROPLASTEN
.
63
3.2.3.3.2.
ZELLKERNE
.
67
3.2.3.4.
ENDOPLASMATISCHES
RETICULUM
.
67
3.2.3.5.
DICTYOSOMEN
.
67
3.2.3.6.
TUEPFEL
.
68
3.2.3.7.
DIE
ORGANISATION
DES
PROTOPLASTEN
AM
ENDE
DIESER
3.
ENTWICK
LUNGSPHASE
.
68
3.2.4.
TRANSPORTZELLEN
DER
REIFEN
MITTELRIPPE
BEI
MEHR
ALS
10
MM
ENTFERNUNG
VON
DER
SPITZE
.
70
3.2.4.1.
MICTOPLASMA
.
70
3.2.4.2.
MIKROTUBULI
.
70
3.2.4.3.
ORGANELLEN
.
71
3.2.4.3.I.
CHLOROPLASTEN
.
71
3.2.4.3.2.
ZELLKERNE
.
71
3.2.4.4.
ENDOMEMBRANSYSTEM
.
72
3.2.4.5.
RESERVESTOFFE
.
73
3.2.4.5.I.
PROTEINKRISTALLE
.
73
3.3.4.5.2.
STAERKEKOERNER
.
73
3.2.4.6.
TUEPFEL
.
73
3.2.4.7.
DIE
ORGANISATION
DES
PROTOPLASTEN
DER
REIFEN
TRANSPORTZELLEN
.
74
3.2.5.
TRANSPORTZELLEN
IN
MITTELRIPPEN
DER
VORJAHRE
.
74
3.2.6.
ZUSAMMENFASSUNG
DER
ONTOGENETISCHEN
ENTWICKLUNG
DER
TIANSPORTZELLEN
.
76
33.
L4
C-PHOTOASSHNILATION
UNTER
KURZZEITPHOTOSYNTHESEBEDINGUNGEN
YYYYOEEENAOEOEOOAOA
79
3.3.1.
PHOTOSYNTHETISCHER
EINBAU
VON
RADIOAKTIVEM
KOHLENSTOFF
.
79
3.3.2.
SPEKTRUM
DER
U
C-ASSIMILATE
.
80
3.3.3.
KINETIK
DER
14
C-MARIDERUNG
.
81
3.3.3.1
.
VERTEILUNG
DES
14
C
AUF
LOESLICHE
UND
UNLOESLICHE
FRAKTIONEN
.
81
IV
I
NHALTSVERZEICHNIS
SEITE
3.3.3.2.
14
C-MARKIERTE
PHOTOSYNTHESEINTERMEDIATE
UND
FOLGEPRODUKTE
.
81
3.4.
FERNTRANSPORT
VON
I4
C-PHOTOASSIMILATEN
.
.
85
3.4.1.
TRANSPORTRICHTUNG
UND-RATE
.
85
3.4.1.1.
VERTEILUNG
DER
RADIOAKTIVITAET
IN
DEN
PFLANZEN
NACH
14
C-EXPOSITION
EINER
PHYLLOIDSPITZE
.
86
3.4.I.2.
14
C-EXPOSITION
DER
PHYLLOIDMITTE
.
92
3.4.2.
TRANSPORTGUT
.
93
3.5.
MIKROAUTORADIOGRAPHISCHE
UNTERSUCHUNG
DER
TRANSPORTZELLEN.
108
3.6.
FERNTRANSPORT
VON
L-LEUCIN-U
14
C
.
_
.
_
.
110
3.7.
REVERSIBLE
HEMMUNG
DES
ASSIMILATTRANSPORTS
.YYYYYYYYYYYYYYYYYYYYYYYYYYYYYYYYYYYYYYYYYYYYYYYYYYYYYYYY
111
3.7.1.
TRANSPORTRATEN
.
111
3.7.2.
AUSWIRKUNGEN
DER
HEMMSTOFFE
AUF
DIE
FEINSTRUKTUR
VON
TRANSPORTZELLEN
.
113
3.8.
IMMUNOGOLDELEKTRONENMIKROSKOPIE
.
116
3.9.
TUBULINISOLIERUNG
UND
IN
VI/RO-POLYMERISATION
.
.
117
4.
DISKUSSION
.
119
4.1.
FRAGESTELLUNG
.
-
.
.
119
4.2.
ZUM
AUTORADIOGRAPHISCHEN
NACHWEIS
DES
FERNTRANSPORTS
14
C-MARKIERTER
PHOTOASSIMILATE
.
.
120
4.2.1.
MAKROAUTORADIOGRAPHIE
.
120
4.2.2.
MIKROAUTORADIOGRAPHIE
.
121
4.2.2.I.
KRITISCHE
WERTUNG
DER
METHODEN
.
121
4.2.2.2.
DIE
GROSSEN,
LANGGESTRECKTEN
ZELLEN
DER
MITTELRIPPEN
UND
SEITENNERVEN
SIND
DIE
TRANSPORTIERENDEN
ZELLEN.
.
123
4.3.
DIE
FEINSTRUKTUR
UND
ONTOGENETISCHE
ENTWICKLUNG
DER
TRANSPORTZELLEN
.
125
4.3.1.
QUALITAET
DER
FIXIERUNGEN
.
125
4.3.2.
PROBLEME
BEI
DER
FAERBUNG
DER
HANDSCHNITTE
MIT
VITALFARBSTOFFEN
.
127
4.3.3.
DIE
FEINSTRUKTUR
DER
TRANSPORTZELLEN:
DIE
ANATOMISCHEN
VOR
AUSSETZUNGEN
FUER
EINEN
FERNTRANSPORT
WERDEN
IM
VERLAUF
DER
ONTOGENETISCHEN
ENTWICKLUNG
GESCHAFFEN
.
127
4.3.3.1.
AUSBILDUNG
EINES
KOMPLEXEN
TIANSPORTSYSTEMS
AUS
MITEINANDER
UEBER
TUEPFELVERBINDUNGEN
VERBUNDENEN
ZELLEN
.
128
4.3.3.2.
ENTSTEHUNG
EINES
MICTOPLASMAS
.
132
4.3.3.3.
DAS
MIKROTUBULUSSYSTEM
DER
TRANSPORTZELLEN
.
133
V
I
NHALTSVERZEICHNIS
SETTE
4.3.3.4.
DIE
ORGANELLEN
DER
TRANSPORTZELLEN
.
136
4.3.3.5.
DAS
ENDOPLASMATISCHE
RETICULUM
UND
DICTYOSOMEN
.
140
4.4.
DIE
CHARAKTERISTIKA
DES
FERNTRANSPORTS
ORGANISCHER
SUBSTANZEN
IN
DELESSERIA
SANGUINEA
.
-
.
141
4.4.1.
DIE
TRANSPORTRICHTUNG
.
141
4.4.2.
DIE
TRANSPORTGESCHWINDIGKEIT
UND
DIE
TRANSPORTRATE
.
143
4.4.3.
UEBERLEGUNGEN
ZUM
FEMTRANSPORTSYSTEM
IN
DELESSERIA
SANGUINEA
.
148
4.4.3.1.
MODELLVORSTELLUNGEN
DES
INTERZELLULAEREN
TRANSPORTES
UEBER
DIE
TUEPFELPFROPFEN
.
150
4.4.3.2.
DIE
BE
UND
ENTLADUNG
DES
TRANSPORTSYSTEMS
.
153
4.4.4.
DAS
HAUPTTRANSPORTGUT
IST
TREHALOSE
.
156
4.4.4.1.
DIE
PHOTOSYNTHETISCHE
CO
2
-FIXIERUNG
.
156
4.4.4.2.
DIE
NIEDERMOLEKULAREN
ZUCKER
DER
ROTALGEN
.
159
4.4.4.3.
VORKOMMEN
UND
BEDEUTUNG
DER
TREHALOSE
.
160
4.4.4.4.
TREHALOSE
METABOLISMUS
.
161
4.4.5.
TRANSPORTVERSUCHE
MIT
14
C-LEUCIN
.
162
4.4.6.
DIE
REVERSIBLE
HEMMBARKEIT
DES
ASSIMILATTRANSPORTS
.
163
4.4.6.I.
UEBER
DIE
WIRKUNG
UND
SPEZIFITAET
DER
HEMMSTOFFE
.
164
4.4.6.2.
ULTRASTRUKTURELLE
VERAENDERUNGEN
BESTAETIGEN
DIE
WIRKUNG
VON
VINBLASTIN
.
166
4.4.6.3.
UEBER
DIE
BEDEUTUNG
DER
HEMMSTOFFVERSUCHE
FUER
DIE
INTERPRETATION
DES
FERNTRANSPORTES
.
168
4.5.
ZAR
IDENTIFIZIERUNG
DER
MIKROTUBULI.YYYY~YY.169
4.5.1.
DIE
ISOLIERUNG
DES
TUBULINS
UND
IN
VITRO
POLYMERISATION
DER
MIKROTUBULI
.
169
4.5.2.
IMMUNHISTOCHEMISCHER
NACHWEIS
.
170
5.
ZUSAMMENFASSUNG
.
174
6.
LITERATUR
.177
7.
ANHANG
.
A-L
VI |
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