Molekulargenetische Untersuchung von sporadischen Mamma- und Ovarialtumoren auf Verlust von Allelen auf Chromosom 17 mittels Mikrosatelliten-Längen-Polymorphismus-Analysen:
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1996
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INHALTSVERZEICHNIS
SEITE
1. ABKUERZUNGEN 1
2. EINLEITUNG 2
2. 1. EPIDEMIOLOGIE DES MAMMA-UND OVARIALKARZINOMS * 2
2. 2. MOLEKULARGENETIK VON TUMOREN 2
2.3. LOH-ANALYSEN UND MIKROSATELLITEN-LAENGEN-POLYMORPHISMEN 4
2. 4. ZYTOGENETISCHE VERAENDERUNGEN IN MAMMAKARZINOMEN S
2. 5. ZYTOGENETISCHE VERAENDERUNGEN IN OVARIALKARZMOMEN 7
3. ZIEL DER ARBEIT 8
4. MATERIAL UND METHODEN 9
4. 1 VERWENDETES MATERIAL 9
4. 2 PUFFER UND LOESUNGEN 12
4. 3 PATIENTINNEN 15
4.3.1 ALLGEMEINE ANGABEN 15
4.3.2 KLINISCH-PATHOHISTOLOGISCHE PARAMETER DER TUMOREN 15
4.4 DNA-ISOLIERUNG AUS BLUT 18
4.4.1 VORBEREITENDE SCHRITTE 18
4.4.2 ISOLIERUNG DER ZELLKERNE 18
4.4.3 DNA-ISOLIERUNG AUS ZELLKERNEN 18
4.5 DNA-ISOLIERUNG AUS GEWEBE 19
4.5.1 VORBEREITENDE SCHRITTE 19
4.5.2 PHENOL-CHLOROPHORM-EXTRAKTION VON DNA AUS GEWEBE 20
4. 6 KONZENTRATIONSBESTIMMUNG DER DNAS 20
4.6.1 PHOTOMETRISCHE VERMESSUNG 20
4.6.2 KONZENTRATIONSBSTIMMUNG IN 0,8% AGAROSEGELEN 21
BIBLIOGRAFISCHE INFORMATIONEN
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4. 7 POLYMERASE-KETTEN-REAKTION 22
4.7.1 GRUNDLAGEN DER PCR-METHODE 22
4.7.2 PCR-VORBEREITUNG 22
4.7.3 PCR-PROGRAMME 23
4. 8 KONTROLLE DER PCR-REAKTION IN 2% AGAROSEGELEN 23
4. 9 AUFTRENNUNG DER ALLELE 25
4.9.1 GELELEKTROPHORESE VON DL7S5 25
4.9.2 VORBEREITUNG DER SEQUENZGELE 25
4.9.3 LADEN DER SEQUENZGELE 26
4. 10 SOUTHERN BLOT VON DL7S5 26
4. 11 BLOTTEN DER SEQUENZGELE 27
4. 12 RADIOAKTIV-MARKIERUNG DER OLIGONUKLEOTIDE 28
4.12.1 5-ENDE-MARIDERUNG MIT T4-POLYNUKLEOTID-KINASE 28
4.12.2 BESTIMMUNG DER EINBAUEFFIZIENZ 28
4. 13 HYBRIDISIERUNG 29
4. 14 ERSTELLEN DER AUTORADIOGRAPHIEN UND LOH-ANALYSE 30
4. 15 KORRELATIONSANALYSE 30
5. ERGEBNISSE 31
5.1 VERLUST DER HETEROZYGOTIE AN 6 LOCI AUF CHROMOSOM 17 31
IN DEN MAMMA- UND OVARIALTUMOREN
5.2 MAMMAKARZINOME 39
5.2.1 LOH BEI DEN MAMMAKARZINOMEN 39
5.2.2 ERGEBNISSE DER KORRELATIONSANALYSE 43
5. 3 OVARIALKARZINOME 50
6. DISKUSSION 53
6. 1 METHODE 53
6. 2 LOH-ANALYSE BEI DEN MAMMAKARZINOMEN 54
6. 3 ERGEBNISSE DER KORRELATIONSANALYSE 58
6. 4 LOH-ANALYSE BEI DEN OVARIALTUMOREN 59
6. 5 SCHLUSSFOLGERUNGEN 60
7. ZUSAMMENFASSUNG
62
8. LITERATURVERZEICHNIS
64
9. TABELLARISCHER ANHANG
79
10. LEBENSLAUF
87
11. DANKSAGUNG
88 |
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