Untersuchungen zum Abwehrverhalten der Fichte (Picea abies) während der Mykorrhizierung und bei Befall mit Pathogenpilzen:
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| Format: | Abschlussarbeit Buch |
| Sprache: | German |
| Veröffentlicht: |
1996
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INHALTSVERZEICHNIS
1.
EINLEITUNG
.
1
1.1
ENTDECKUNGSGESCHICHTE
UND
KLASSIFIZIERUNG
DER
MYKORRHIZA
.
1
1.2.
SIGNALAUSTAUSCH ZWISCHEN
MYKORRHIZAPILZ
UND
PFLANZE
.
3
1.3
GEMEINSAME
GRUNDLAGEN
DER
SIGNALERKENNUNG
.
4
1
4
EINFLUSS
DER
MYKORRHIZIERUNG
AUF
VERAENDERUNGEN
IN
DER
PFLANZE
.
5
1
5.
HORMONHAUSHALT
UND
MYKORRHIZIERUNG
.
7
1.6.
BEFALL
DER
FTCHTE
MIT
SCHADPILZEN
.
8
1.7
ABWEHRREAKTION
DER
PFLANZE
.
9
1.8.
INDUKTION
DER
PFLANZLICHEN
ABWEHR
.
13
1.9.
CHALKONSYNTHASE,
STILBENSYNTHASE
UND
PAL
BEI
DER
PFLANZLICHEN
ABWEHR
.
14
1.10.
CHITINASEN
UND
GLUCANASEN
BEI
DER
PFLANZLICHEN
ABWEHR
.
17
1.11.
ABWEHRREAKTIONEN
DER
PFLANZE
WAEHREND
DER
MYKORRHIZIERUNG
.
19
1.12
MYKORRHIZAPILZE
UND
HEATSHOCK
.
20
1.13.
KONKURRENZVERHALTEN
DER
MYKORRHIZAPILZE
IM
OEKOSYSTEM
.
21
1
14.
ABWEHRREAKTIONEN
IN
SUSPENSIONSKULTUREN
AUS
PINUS
UND
PICEA.
22
1.15
MOLEKULARBIOLOGIE
UND
IN
VRTRO-KULTUR
DER
GYMNOSPERMEN
.
23
1.16.
ZIELSETZUNG
.
25
2.
MATERIAL
UND
METHODEN
.
26
2.1.
BIOLOGISCHES
MATERIAL
.
26
2
11.
VERWENDETE
MYKORRHIZA
UND
PATHOGENPILZE
.
26
2
1.2.
PFLANZENMATERIAL
.
26
2.1.3
BAKTERIENSTAEMME
.
26
2.1.4.
PLASMIDE
.
26
2.1.5
ANTIKOERPER
.
27
2.1.6.
PRIMER
FUER
DIE
PCR-REAKTION
.
28
2.2.
KULTURMETHODEN
FUER
BAKTERIEN,
PFLANZEN,
PILZE
.
29
2.2.1.
BAKTERIENKULTUR
.
29
2.2.2
PFLANZENKULTUR
IN
VITRO
.
29
2.2.3
PFLANZENKULTUR
IN
SITU
.
29
2.2.4
ANLEGEN
EINER
KALLUS
/
SUSPENSIONSKULTUR
.
30
2.2.5.
PILZKULTUR IN
VITRO
.
30
2.2.6.
MYKORRHIZAKULTUR
IN
VITRO
.
31
2
3.
INDUKTION
DER
FICHTE
(NACH
FLIEGMANN
ET
AL.,
1992
MODIFIZIERT)
.
32
2.3.1.
ELICITOR-PRAEPARATION
.
32
2.3.2.
TESTEN
DER
INDUKTION
DURCH
ELICITOR
.
33
2.4.
ISOLIERUNG
VON
DNA
/
RNA
.
33
2.4.1
ISOLIERUNG
VON
GESAMT-DNA
AUS
FICHTE-SUSPENSIONSKULTUREN.
33
2.4.2.
ISOLIERUNG
VON
GESAMT-RNA
AUS
FICHTE-SUSPENSIONSKULTUREN.
.
34
2.4.3
ISOLIERUNG
VON
GESAMT-RNA
AUS
FICHTE-SAEMLINGEN
.
34
2.4
4
ISOLIERUNG
VON
PLASMID-DNA
AUS
BAKTERIEN
.
35
2.5.
CHARAKTERISIERUNG
VON
DNA
UND
RNA
.
36
2.5
1
RESTRIKTIONSABBAUTEN
.
36
2.5.2.
DNA-ELEKTROPHORESE-TECHMKEN
.
37
2.5.3.
SOUTHERN-BLOT
.
37
2.5.4.
ELUTION
DER
DNA
AUS
GELEN
.
38
II
2
5.5
RNA-ELEKTROPHORESE-TECHNIKEN
.
39
2.5
6
NORTHERN-BLOT
.
39
2.5.7
SLOT-BLOT
.
39
2.5
8
UV-CROSSLINKING
.
39
2
5
9.
HYBRIDISIERUNG
MIT
"
P-MARKIERTEN
PROBEN
.
39
2
5.10.
HYBRIDISIERUNG
DER
DNA
AUF
EINER
NYLONMEMBRAN
.
41
2.5
11.
ABWASCHEN
DER
FILTER
(STRIPPING)
.
41
2.6
AMPLIFIKATION
VON
DNA-FRAGMENTEN
MIT
PCR
.
42
2.7.
KLONIERUNGSTECHNIKEN
.
43
2.7.1.
LIGATION
.
43
2.7.2.
TRANSFORMATION
.
43
2.7.3.
KOLONIEFILTERHYBRIDISIERUNG
.
44
2
8
DNA-SEQUENZIERUNG
MIT
ALF
.
44
2.9
CHARAKTERISIERUNG
VON
PROTEINEN
.
44
2.9.1
PROTEINAUFSCHLUSS
FUER
WESTEM-BLOTS
.
44
2.9
2
SDS
POLYACRYLAMID
GELELEKTROPHORESE
(PAGE)
ZUR
AUFTRENNUNG
VON
GESAMTPROTEINEN
.
45
2.9
3.
WESTEM-BLOT
.
46
2.10.
RNASE-AKTIVITAETSGELE
.
46
2.11.
DATENBANKEN
UND
COMPUTERPROGRAMME
.
48
2
12.
PUFFER
UND
LOESUNGEN
.
48
2.12.1.
ISOLIERUNG
VON
DNA/RNA
.48
2.12.2.
DNA-CHARAKTERISIERUNG
.
49
2.12.3.
MARKIERUNGS
UND
HYBRIDISIERUNGSTECHNIKEN
.
50
2.12.4.
KLONIERUNGSTECHNIKEN
.
51
2.12.5.
PROTEINCHARAKTERISIERUNG
.
51
2.12.6.
RNA-STAINING
.
53
2.13.
MEDIEN
FUER
DIE
ANZUCHT
VON
PFLANZEN
UND
PILZEN
.
54
2
13.1.
MMNC-MEDIUM
(PILZKULTUR)
.54
2.13.2.
MMNC
1/10MEDIUM
(MYKORRHIZAKULTUR)
.
54
2.13.3
BENECKE-MEDIUM
(FICHTEKULTUR)
.
55
2.13.4.
STAMMLOESUNGEN
FUER
FICHTE
/
PILZ
/
MYKORRHIZAKULTUR
.55
2.14
CHEMIKALIEN,
ENZYME,
VERBRAUCHSMATERIAL
.
57
2.15.
ABKUERZUNGEN
.59
3.
ERGEBNISSE
.
61
3.1
EINFLUSS
DER
PILZE
AUF
DAS
WACHSTUM
VON
FICHTENKEIMLINGEN
.
61
3.2
PROTEINEXPRESSION
NACH
DEM
ERSTEN
KONTAKT
DER
FICHTENKEIMLINGE
MIT
DEM
PILZ
UND
NACH
AUSBILDUNG
DER
MYKORRHIZA
BZW
NACH
PATHOGENBEFALL
.
62
3.2.1.
PROTEINEXPRESSION
NACH
DEM
ERSTEN
KONTAKT
DER
FICHTENKEIMLINGE
MIT
DEM
PILZ
.
62
3.2
2
DETEKTION
DER
PROTEINEXPRESSION
.
63
3.3.
EXPRESSION
VON
HITZESCHOCKPROTEINEN
WAEHREND
DER
MYKORRHIZIERUNG
83
3
4.
UNTERSUCHUNG
DER
GENEXPRESSION
.
86
3.5
HYBRIDISIERUNGS-SONDEN
ZUM
NACHWEIS
DER GENEXPRESSION
IN
PICEA
ABIES
.
86
3.5.1.
PCR-AMPLIFIKATION
DER
HYBRIDSIERUNGS-SONDE
VON
STS
.
88
3.5
2.
GENEXPRESSION
BEI
SUSPENSIONSKULTUREN
.
95
3.5
3.
ANLEGEN
NEUER
KALLUS
UND
SUSPENSIONSKULTUREN
AUS
PICEA
ABIES
UND
PINUS
SYLVESTRIS
.
100
3.6.
GENEXPRESSION
BEI
FICHTEKULTUREN
.
101
3.6.1
EXPRESSION
DER
CHS
UND
DER
PAL-GENE
IM
GESAMTEN
KEIMLING
.
102
3.6.2.
EXPRESSION
DER
CHS
UND
DER
PAL-GENE
IN
DER
WURZEL
UND
IM
SPROSS
.
105
3.7
UNTERSUCHUNG
DES
PHAENOMENS:
DEGRADIERUNG
DER
GESAMT
RNA
VON
FICHTENKEIMLINGEN,
DIE
MIT
HEBELOMA
CRUSTULINIFORME
INDUZIERT
WURDEN
.
110
3.7.1
QUALITAET
DER
GESAMT-RNA
AUS
FICHTENKEIMLINGEN,
DIE
MIT
MYKORRHIZA
BZW.
PATHOGENPILZEN
BEHANDELT
WURDEN
.
110
3.7.2
ZEITLICHER
VERLAUF
DER
RNA-DEGRADIERUNG
NACH
INDUKTION
DER
KEIMLINGE
MIT
HEBELOMA
CRUSTULINIFORME
.
112
3.7.3.
RNASE-AKTIVITAET
VON
ELICITOREN
UND
SUSPENSIONSKULTUREN
DER
PILZE
.
113
3.7.4.
UEBERPRUEFEN DES
RNA-AUFSCHLUSS
.
115
3.7
5.
AKTIVITAETSFAERBUNG
DER
RNASEN
IN
PAG
.
116
3
8.
ABWEHRREAKTIONEN
DER
MYKORRHIZAPILZE
GEGENUEBER
KONKURRENZ
PILZEN
.
118
3.8.1
WELCHE
FRAGMENTE
DER
MYKORRHIZAPILZE
SIND
NOETIG,
UM
DAS
WACHSTUM
VON
PATHOGENPILZEN
ZU
REPRIMIEREN'?
.
122
3.8.2
REAKTIONEN
DER
PATHOGENPILZE
AUF
FRISCHEN
UEBERSTAND
AUS
SUSPENSIONSKULTUREN
DER
MYKORRHIZAPILZE
.
125
4.
DISKUSSION
.
128
4.1
ABWEHRREAKTIONEN
DER
FICHTE
GEGENUEBER
MYKORRHIZA
UND
PATHOGENPILZEN
.
129
4.1.1
PROTEINEXPRESSION
DER
FICHTENKEIMLINGE
BEI
KONTAKT
MIT
PILZEN
.
129
4.2.
EXPRESSION
VON
HITZESCHOCKPROTEINEN
WAEHREND
DER
MYKORRHIZIERUNG
.
132
4.2.1
AUSWAHL
DER
SONDEN
ZUR
UNTERSUCHUNG
DER
PFLANZLICHEN
ABWEHRREAKTION
.
133
4.2.2.
SUSPENSIONSKULTUREN
ALS
MODELLSYSTEM
.
135
4
2
3.
GENEXPRESSION
VON
FICHTENKEIMLINGEN
BEI
PILZKONTAKT
138
4.3.
DEGRADIERUNG
DER
GESAMT-RNA
.
141
4.4
KONKURRENZ
ZWISCHEN
PATHOGEN-UND
MYKORRHIZAPILZEN
.
144
5.
ZUSAMMENFASSUNG
.
148
6.
LITERATURVERZEICHNIS
.
150 |
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| title_full | Untersuchungen zum Abwehrverhalten der Fichte (Picea abies) während der Mykorrhizierung und bei Befall mit Pathogenpilzen vorgelegt von Joachim Nerz |
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