Methodische Untersuchungen zur Bestimmung von apo- und gesamt-CRABP in normalem und dysplastischem Epithel der Zervix:
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1. Verfasser: | |
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Format: | Abschlussarbeit Buch |
Sprache: | German |
Veröffentlicht: |
Berlin
Köster
1997
|
Ausgabe: | 1. Aufl. |
Schriftenreihe: | Wissenschaftliche Schriftenreihe biologische Chemie und Ernährungswissenschaft
9 |
Schlagworte: | |
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I
INHALTSVERZEICHNIS
1
EINLEITUNG
1
1.1
RETINOIDE
1
1.2
EPITHEL
5
2
ZIEL
DER
STUDIE
9
3
MATERIAL
UND
METHODEN
10
3.1
MATERIALIEN
10
3.2
ALLGEMEINE
ARBEITSMETHODEN
12
3.2.1
CYTOSOLPRAEPARATION
12
3.2.2
PROTEINBESTIMMUNG
12
3.2.3
REAKTIONEN
AN
FREIEN
SH-GRUPPEN
12
3.3
CRABP-BESTIMMUNG
13
3.3.1
BIOPSIEN
AUS
HUMANEM
ZERVIXEPITHEL
13
3.3.2
INKUBATION
MIT
TRITIIERTER
RETINSAEURE
15
3.3.3
TRITIUMDETEKTION
15
3.3.4
SEPARATION
DES
SPEZIFISCH
GEBUNDENEN
ANTEILS
16
3.3.5
BESTIMMUNG
VON
CRABP
IN
APO
UND
HOLO-FORM
18
3.4
RP-HPLC
20
3.4.1
MICRO-LC
20
3.4.2
ROUTINEANALYTIK
VON
RETINOIDEN
23
4
ERGEBNISTEIL
24
4.1
CRABP
24
4.1.1
BESTIMMUNG
VON
APO
UND
GESAMT-CRABP
24
4.1.1.1
ZERVIX
24
4.1.1.2
TESTES
28
4.1.1.3
AUSTAUSCHKOEFFIZIENT
AT-RA
X
CRABP
MIT
'
H-RA
29
4.1.1.4
REAKTIONEN
AN
FREIEN
SH-GRUPPEN
30
4.1.2
SEPARATION
DER
SPEZIFISCH
VON
DER
UNSPEZIFISCH
GEBUNDENEN
TRITIIERTEN
RETINSAEURE
UND
DEREN
DETEKTION
31
4.1.2.1
AUSSCHLUSSCHROMATOGRAPHIE
31
4.1.2.2
ELEKTROPHORESE
37
4.1.3
WIEDERFINDUNG
TRITIIERTER
RETINSAEURE
39
4.1.4
BESTIMMUNG
DER
SPEZIFISCHEN
BINDUNG
40
4.2
MICRO-HPLC
44
4.2.1
EINFLUSS
DES
INJEKTIONSVENTILS
46
4.2.2
FOKUSSIERUNG
VON
AT-RA
48
II
5
DISKUSSION
50
5.1
CRABP-BESTIMMUNG
50
5.1.1
PROBENMATERIAL
50
5.1.2
DISKUSSION
DER
EIGENEN
ERGEBNISSE
51
5.1.3
DISKUSSION
DER
HIER
ANGEWANDTEN
METHODE
55
5.1.3.1
SEPARATION
DES
SPEZIFISCH
GEBUNDENEN
LIGANDEN
57
5.1.3.2
QUANTIFIZIERUNG
VON
APO
UND
GESAMT-CRABP
60
5.2
RETINOIDBESTIMMUNG
MITTELS
MICRO-HPLC
63
5.3
AUSBLICK
66
5.4
ZUSAMMENFASSUNG
67
6
LITERATURVERZEICHNIS
68
7
ANHANG
75
7.1
RECHENSCHEMA
FUER
DIE
BESTIMMUNG
DES
CRABP-GEHALTES
75
7.2
ERGEBNISSE
DER
CRABP-BESTIMMUNG
VON
ZERVIXBIOPSIEN
75
7.3
AUSGEWAEHLTE
LITERATURERGEBNISSE
VON
CRABP-BESTIMMUNGEN
IN
EPITHELIALEM
GEWEBE
78
7.4
MIKRO-HPLC
80
7.4.1
PEAKFLAECHEN,
-HOEHEN
UND
RETENTIONSZEITEN
BEI
UNTERSCHIEDLICHEN
FLIESSMITTELN
80
7.4.2
THEORIE
81
7.5
ERMITTLUNG
DES
EFFIZIENZFAKTORS
BEI
DER
ON-LINE-DETEKTION
83
7.6
FINNENVERZEICHNIS
84 |
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