Individueller Paarungs- und Fortpflanzungserfolg bei der Laubheuschrecke Poecilimon hoelzeli: ein molekulargenetischer Ansatz
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| Format: | Abschlussarbeit Buch |
| Sprache: | German |
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1996
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INHALTSVERZEICHNIS
ABKUERZUNGEN
1
I.
EINLEITUNG
2
2.
THEORETISCHE
GRUNDLAGEN
6
2.1.
GENETISCHER
HINTERGRUND
.
6
2.2.
DNA-MIKROSATELLITEN-ANALYSE.
7
3.
MATERIAL
UND
METHODEN
10
3.1.
KAEFIGEXPERIMENT
MIT
POECILIMON
HOELZELI
.
10
3.1.1.
POECILIMON
HOELZELI
.
10
3.1.2.
DURCHFUEHRUNG
DES KAEFIGEXPERIMENTS
.
11
3.1.3.GEMESSENE
PARAMETER
.
12
3.1.4.
STATISTIK
.
15
3.2.
MOLEKULARGENETISCHE
METHODEN
UND
ARBEITSPROTOKOLLE
.
16
3.2.1.
ALLGEMEINE
METHODEN
.
16
CHEMIKALIEN,
HILFSMITTEL,
GERAETE
UND
ENZYME
.
16
ARBEITEN
MIT
BAKTERIEN
.
19
ANZUCHT
VON
BAKTERIEN
IN
FLUESSIGKULTUREN
.
19
ANZUCHT
VON
BAKTERIEN
UND
BAKTERIOPHAGEN
AUF
FESTMEDIEN
.
20
PRAEZIPITATION
VON
DNA
AUS
WAESSRIGEN
LOESUNGEN
.
20
DNA-QUANTIFIZIERUNGEN.
21
AGAROSEGEL-ELEKTROPHORESE
.
21
ANFERTIGUNG
VON
SPERMATHEKEN-SEKTIONEN
.
22
3.2.2.
DNA-ISOLIERUNG
AUS
EUKARYONTISCHEM
GEWEBE
.
22
DNA-ISOLIERUNG
MIT
NACL
.
23
DNA-ISOLIERUNG
ZUR
HERSTELLUNG
EINER
GENBANK
.
24
3.2.3.
DNA-ISOLIERUNG
AUS
BAKTERIEN
UND
BAKTERIOPHAGEN
.
26
ISOLIERUNG
VON
PBLUESCRIPT
II-DNA
NACH
DER
ALKALISCHEN
LYSE-METHODE
(MINI-
PRAEPARATION)
.
26
ISOLIERUNG
VON
PBLUESCRIPT
II-DNA
NACH
DER
ALKALISCHEN
LYSE-METHODE
(MAXI-PRAEPARATION)
.
27
ISOLIERUNG
VON
M13
SS-DNA
(MINI-PRAEPARATION)
.
28
3.2.4.
KLONIERUNG
VON
DNA-MIKROSATELLITEN
.
30
RESTRIKTIONSVERDAU
CHROMOSOMALER
HEUSCHRECKEN-DNA
.
31
ISOLIERUNG
VON
DNA-FRAGMENTEN
AUS
AGAROSEGELEN
UEBER
ELEKTROELUTION
.
31
ISOLIERUNG
VON
DNA-FRAGMENTEN
AUS
AGAROSEGELEN
UEBER
ADSORPTION
AN
EINE
SILICA-MATRIX
.
33
BEREITSTELLUNG
VON
LINEARISIERTER,
DEPHOSPHORYLIERTER
PBLUESCRIPT
II
ODER
M13MPL8-DNA
.
33
N
INHALTSVERZEICHNIS
LIGATION
VON
DNA-FRAGMENTEN
.
34
HERSTELLUNG
KOMPETENTER
BAKTERIEN
ZUR
TRANSFORMATION
MIT
PLASMID
ODER
M13-DNA
.
36
TRANSFORMATION
KOMPETENTER
BAKTERIENZELLEN
MIT
PLASMID
ODER
M13-DNA
.
37
3.2.5.
IDENTIFIZIERUNG
VON
DNA-MIKROSATELLITEN
AUS
EINER
SUBGENOMISCHEN
GENBANK
VON
POECILIMON
HOELZELI
.
38
PLAQUE
UND
KOLONIE-LIFT
AUF
NYLONMEMBRANEN
.
38
KOLONIE
UND
PLAQUEHYBRIDISIERUNG
MIT
RADIOAKTIVEN
DNA-SONDEN
.
39
3.2.6.
DNA
SEQUENZIERUNG
VON
KLONIERTEN
DNA-MIKROSATELLITEN
.
42
EINZELSTRANG-DNA-SEQUENZIERUNG
MIT
SEQUENASE
2.0
.
42
DOPPELSTRANG-DNA-SEQUENZIERUNG
MIT
SEQUENASE
2.0
.
44
3.2.7.
AMPLIFIKATION
VON
DNA-MIKROSATELLITEN
AUS
CHROMOSOMALER
DNA
.
46
RADIOAKTIVE
ENDMARKIERUNG
VON
PRIMERN
.
46
AMPLIFIKATION
VON
DNA-MIKROSATELLITEN
AUS
CHROMOSOMALER
DNA
.
46
POLYACRYLAMIDGEL-ELEKTROPHORESE
ZUR
ANALYSE
VON
SEQUENZIERUNGSREAKTIONEN
UND
DER
VARIABILITAET
VON
DNA-MIKROSATELLITEN.
48
3.3.
BESTIMMUNG
DER
ELTERNSCHAFT
MIT
HILFE
VON
DNA-MIKROSATELLITEN
.
50
3.3.1.
AUSWERTUNG
DER
AUTORADIOGRAPHIEN
.
50
3.3.2.
AUSSCHLUSS
POTENTIELLER
MUETTER
UND
VAETER
VON
DER
ELTERNSCHAFT
.
50
3.3.3.
BESTIMMUNG
DER
ELTERN
UEBER
INDIVIDUENSPEZIFISCHE
ALLELE
.
53
3.3.4.
BERECHNUNG
DER
EXKLUSIONSWAHRSCHEINLICHKEIT
EINES
GENETISCHEN
MARKERS
MIT
K
KODOTNINANTEN
ALLELEN
FUER
DEN
FALL
"KEIN
ELTER
BEKANNT"
.
54
4.
ERGEBNISSE
56
4.1.
DNA-MIKROSATELLITEN
BEI
POECILIMON
HOELZELI
.
56
4.1.1.
ISOLIERUNG
VON
DNA-MIKROSATELLITEN
.
56
4.1.2.
CHARAKTERISIERUNG
VON
DNA-MIKROSATELLITEN
.
56
4.1.3.
AMPLIFIKATION
UND
VARIABILITAET
DER
DNA-MIKROSATELLITEN
.
58
4.1.4.
NACHWEIS
EINES
DNA-MIKROSATELLITEN
MIT
NULL-ALLEL
.
62
4.1.5.
X-CHROMOSOMALE
DNA-MIKROSATELLITEN
.
62
4.2.
NACHWEIS
DER
ELTERNSCHAFT
MIT
HILFE
VON
DNA-MIKROSATELLITEN
.
64
4.2.1.
AUSSCHLUSS
POTENTIELLER
ELTERN
VON
DER
ELTERNSCHAFT
.
64
4.2.2.
WIEVIELE
MIKROSATELLITEN-MARKER
MUESSEN
UNTERSUCHT
WERDEN,
UM
IN
EINER
GROESSEREN
POPULATION
DIE
ELTERNSCHAFT
DER
NACHKOMMEN
ZU
BESTIMMEN?
.
66
4.3.
INDIVIDUELLER
PAARUNGS
UND
FORTPFLANZUNGSERFOLG
IN
EINER
KAEFIGPOPULATION
VON
POECILIMON
HOELZELI
.
68
4.3.1.
PAARUNGSERFOLG
DER
CF
CF
.
68
4.3.2.
FORTPFLANZUNGSERFOLG
DER
CFCT
.
72
4.3.3.
PAARUNGSERFOLG
DER
Q
Q
.
73
4.3.4.
FORTPFLANZUNGSERFOLG
DER
Q
Q
.
74
4.4.
SPERMIENKONKURRENZ
BEI
POECILIMON
HOELZELI
.
76
4.4.1.
EINFLUSS
VON
MEHRFACHPAARUNGEN
AUF
DEN
BEFRUCHTUNGSERFOLG
EINZELNER
CF
CF
.
76
4.4.2.
TYPISIERUNG
DER
SPERMIEN
IN
SPENNATHEKEN
MIT
HILFE
DER
DNA
MIKROSATELLITEN-ANALYSE
.
80
INHALTSVERZEICHNIS
M
5.
DISKUSSION
83
5.1.
DNA-MIKROSATELLITEN
BEI
POECILIMON
HOELZELI
.
83
5.1.1.
ISOLIERUNG
VON
DNA-MIKROSATELLITEN
.
83
5.1.2.
CHARAKTERISIERUNG
VON
DNA-MIKROSATELLITEN
AUS
POECILIMON
HOELZELI
.
86
5.1.3.
VARIABILITAET
VON
DNA-MIKROSATELLITEN
BEI
POECILIMON
HOELZELI
.
86
5.1.4.
NULL-ALLELE
BEI
DNA-MIKROSATELLITEN
.
87
4.1.5.
X-CHROMOSOMALE
DNA-MIKROSATELLITEN
.
88
5.2.
DNA-MIKROSATELLITEN
ZUR
BESTIMMUNG
VON
MUTTER
UND
VATERSCHAFT
BEI
POECILIMON
HOELZELI
.
89
5.2.1.
EFFEKTIVITAET
DER
DNA-MIKROSATELLITEN-ANALYSE
BEI
DER
BESTIMMUNG
VON
ELTERN
.89
5.2.2.
NACHWEIS
VON
PARTHENOGENETISCHER
FORTPFLANZUNG
BEI
POECILIMON
HOELZELI
.
91
5.3.
INDIVIDUELLER
PAARUNGS
UND
FORTPFLANZUNGSERFOLG
IN
EINER
KAEFIGPOPULATION
VON
POECILIMON
HOELZELI
.
92
5.3.1.
EINFLUSSGROESSEN
FUER
DEN
INDIVIDUELLEN
PAARUNGSERFOLG
DER
CF
CF
.
92
5.3.2.
FORTPFLANZUNGSERFOLG
DER
CF
F
.
97
5.3.3.
PAARUNGS
UND
FORTPFLANZUNGSERFOLG
DER
9
9
.
98
5.3.
SPERMIENKONKURRENZ
BEI
POECILIMON
HOELZELI
.
100
5.3.1.
SPERMIENNUTZUNG
BEI
VIELFACHPAARUNGEN
.
100
5.3.2.
VARIABILITAET
IM
BEFRUCHTUNGSERFOLG
DER
LETZTEN
O"
D"
.
100
5.3.3.
WELCHE
PROZESSE
FUHREN
ZU
EINEM
HOEHEREN
FORTPFLANZUNGSERFOLG
DES
LETZTEN
CF?
.
102
5.4.
AUSBLICK
.
103
6.
ZUSAMMENFASSUNG
105
7.
LITERATURVERZEICHNIS
107
DANKSAGUNG
119
LEBENSLAUF
120 |
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