Die humorale Immunantwort gegen das menschliche Cytomegalovirus: immunologische und molekulare Aspekte
Gespeichert in:
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| Format: | Abschlussarbeit Buch |
| Sprache: | German |
| Veröffentlicht: |
1996
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INHALTSVERZEICHNIS
L
ZUSAMMENFASSUNG
.
1
H.
EINLEITUNG
.
2
1.
BIOLOGISCHES
MATERIAL
.
10
2.
VEKTORSYSTEME
UND
AUSGANGSPLASMIDE
.
11
3.
OLIGONUKLEOTIDE
.
11
4.
MONOKLONALE
AD
1
SPEZIFISCHE
ANTIKOERPER
.
11
5.
REKOMBINATE
ANTIGENE
.
12
6.
ENZYME
.
14
7.
REAGENZIEN
.
14
8.
MEDIEN
UND
PUFFER
.
15
IV.
METHODEN
.
16
1.
ZELLKULTURVERFAHREN
.
16
1.1.
KULTIVIERUNG
HUMANER
VORHAUTFIBROBLASTEN
.
16
1.2.
VERMEHRUNG
UND
REINIGUNG
VON
HCMV
.
16
1
3.
KULTIVIERUNG
VON
HYBRIDOMZELLEN
UND
FUSIONSZELLINIEN
.
16
2.
IN
VITRO
REKOMBINATION
UND
ANALYSE
VON
DNA
.
16
2.1.
ANALYTISCHE
REINIGUNG
VON
DNA
.
16
2.2.
PRAEPARATIVE
REINIGUNG
VON
DNA
.
17
2
3.
DNA-SPALTUNG
MIT
RESTRIKTIONSENZYMEN
.
17
2.4.
GELELEKTROPHORESE
VON
DNA
.
17
2.5
ISOLIERUNG
VON
DNA-FRAGMENTEN
.
17
2.6.
POLYMERASE-KETTEN-REAKTION
(PCR)
.
17
2.7
KLONIERUNG
VON
DNA-FRAGMENTEN
.
18
2.8.
CHIMAERISIERUNG
VON
MURINEN
ANTIKOERPERN
.
18
2.9.
COMPUTERAUSWERTUNG
VON
SEQUENZDATEN
.
18
3.
HERSTELLUNG
UND
ANALYSE
VON
PROTEINEN
.
IS)
3.1.
SYNTHESE
VON
FUSIONSPROTEINEN
IN
E.COLI
.
19
3
2.
ANREICHERUNG
VON
SS-GALAKTOSIDASE
FUSIONSPROTEINEN
.
19
3.3
ANREICHERUNG
VON
TRYPTOPHANSYNTHETASE
FUSIONSPROTEINEN
.
20
3.4.
SDS-POLYACRYLAMIDGEL-ELEKTROPHORESE
VON
PROTEINEN
.
20
3.5.
COOMASSIE-BLAU-FAERBUNG
.
20
3.6.
QUANTITATIVE
PROTEINBESTIMMUNG
.
20
3.7
ANREICHERUNG
VON
ANTIKOERPERN
AUS
KULTURUEBERSTAENDEN
.
21
4.
IMMUNOLOGISCHE
METHODEN
.
21
4.1.
IMMUNOBLOT-ANALYSE
.
21
4.2.
INUNUNADSORPTIONSTEST (ELISA)
.
21
4.3.
NEUTRALISATIONSANALYSEN
.
23
4.4.
IMMUNHISTOLOGISCHE
ANALYSEN
.
24
4.5.
ISOLIERUNG
VON
HUMANEN
PERIPHEREN
BLUTLYMPHOZYTEN
(PBL)
.
24
4.6.
ISOLIERUNG
VON
T-ZELLEN
UND
B-ZELLEN
AUS
PBL
.
25
4.7.
DURCHFLUSS-FLUORESZENZ
ANALYSE
.
25
4.8.
PRECURSOR-FREQUENZANALYSEN
VON
HCMV-SPEZIFISCHEN
B-ZELLEN
.
26
5.
IMMUNISIERUNG
VON
MAEUSEN
.
27
V.
ERGEBNISSE
.
28
1.
UNTERSUCHUNG
DER
ANTIKOERPERPRAEVALENZ
GEGEN
AD-1
IM
VERGLEICH
ZU
ANDEREN
STRUKTU
RELLEN
UND
NICHT-STRUKTURELLEN
PROTEINEN
VON
HCMV
.
28
2.
CHARAKTERISIERUNG
DER
ANTIGEN-ANTIKOERPER-INTERAKTION
AN
DER
IMMUNDOMINANTEN
REGION
AD-1
VON
GB
.
31
2.1.
KARTIERUNG
VON
ANTIGENEN
SUBSTRUKTUREN
INNERHALB
VON
AD-1
.
32
2.2
ANALYSEN
ZUR
AVIDITAET
AD-1
BINDENDER
ANTIKOERPER
.
36
2.3.
UNTERSUCHUNG
DER
BEDEUTUNG
DES
KONSTANTEN
TEILS
EINES
AD-1
BINDENDEN
ANTIKOERPERS
.
39
2.3.1
CHIMAERISIERUNG
VON
DREI
MURINEN
MONOKLONALEN
ANTIKOERPERN
NACH
IGGL
HUMAN
.
39
2
3
2.
CHARAKTERISIERUNG
DER
BIOLOGISCHEN
AKTIVITAET
CHIMAERER
AD-1
BINDENDER
ANTIKOERPER
.
40
3.
ANALYSEN
ZUR
ONTOGENESE
DER
AD-1
SPEZIFISCHEN
ANTIKOERPERANTWORT
NACH
HCMV
INFEKTION
.
45
3.1.
ANALYSEN
ZUM
URSPRUNG
EINER
AD-1
SPEZIFISCHEN
ANTIKOERPERANTWORT
.
45
3.2
CHARAKTERISIERUNG
DER
ANTIKOERPERANTWORT
NACH
EINER
PRIMAEREN
HCMV-INFEKTION.
.
49
3.3.
CHARAKTERISIERUNG
DER
ANTIKORPERANTWORT
NACH
EINER
HCMV-REAKTIVIERUNG
BZW.
REINFEKTION
.
50
3.4.
ANALYSE
DER
FREQUENZ
HUMANER
VORLAEUFER-B-ZELLEN
GEGEN
PHOSPHOPROTEIN
UND
GLYKOPROTEIN-SPEZIFISCHE
ANTIGENE
.
53
3.5.
CHARAKTERISIERUNG
DER
HCMV-SPEZIFISCHEN
HUMORALEN
IMMUNANTWORT
NACH
ALLOGENER
KMT
.
56
3.5.1.
ANALYSEN
DER
HUMORALEN
IMMUNANTWORT
GEGEN
HCMV
FRUEH
NACH
KMT
.
58
3.5.2.
ANALYSEN
DER
GEDAECHTNIS-B-ZELL
VERMITTELTEN
ANTIKOERPERANTWORT
NACH
KMT.
60
4.
BEDEUTUNG
AD-1
SPEZIFISCHER
ANTIKOERPER
FUER
DEN
VERLAUF
EINER
HCMV-INFEKTION
.
63
VL
DISKUSSION
.
66
VH.
ABKUERZUNGSVERZEICHNIS
.
76
VFFL.
LITERATURVERZEICHNIS
.
77 |
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