Proteincarbonyle: Entwicklung einer Methode zur Identifizierung von oxidierten Proteinen im menschlichen Stratum corneum und deren Abhängigkeit von biologischen Parametern
Gespeichert in:
| 1. Verfasser: | |
|---|---|
| Format: | Abschlussarbeit Buch |
| Sprache: | German |
| Veröffentlicht: |
1996
|
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| Online-Zugang: | Inhaltsverzeichnis |
| Beschreibung: | 152, [12] S. Ill., graph. Darst. |
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Datensatz im Suchindex
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INHALTSVERZEICHNIS
1.
EINLEITUNG
.
1
1.1.
METALLKATALYSIERTE
MODIFIKATIONEN
VON
PROTEINEN
.
1
1.2.
AUFBAU
DER
MENSCHLICHEN
HAUT
.
2
1.2.1.
HAUTTYPEN
.
4
1
2.1.1.
HAUTFEUCHTIGKEITSKLASSIFIZIERUNG
.
4
1.2.1.2.
PHOTOTYPEN
.
4
1.2
1.3.
HAUTFARBE
.
5
1
3.
PROTEINE
DES
MENSCHLICHEN
STRATUM
COMEUMS
.
5
1.4.
DIE
WIRKUNGEN
DER
SONNENSTRAHLEN
.
6
1
5.
PHYSIOLOGISCHE
BEDEUTUNG
DER
OXIDIERTEN
PROTEINE
.
7
1
6
ANALYTIK
DER
OXIDIERTEN
PROTEINE
.
8
2.
LITERATURIIBERSICHT
UND
PROBLEMSTELLUNG.
10
2
1.
LITERATURUEBERSICHT
.
10
2
2.
PROBLEMSTELLUNG
.
11
3.
UNTERSUCHUNGSMATERIALIEN
.
15
4.
METHODEN
.
16
4.1.
GEWINNUNG
DER
COMEOCYTEN
.
16
4
1.1.
GEWINNUNG
DER
COMEOCYTEN
DURCH"SCHABSELN"
.
16
4
1
2
PROBENGEWINNUNG
MIT
TRITON
X-100
.
17
4
1.3.
PROBENGEWINNUNG
MIT
CYANOACRYLATSTRIPS
.
17
4.1
4
PROBENGEWINNUNG
MIT
TESASTRIPS
.
17
4.15.
PROBENGEWINNUNG
MIT
HANSFOL
2209
.
18
4.
1
6.
PROBENGEWINNUNG
MIT
EINEM
WASSERLOESLICHEM
KLEBEBAND
.
18
4.1.7.
PROBENGEWINNUNG
MIT
SAUGBLASEN
.
18
4
1
8.
KERATINGEWINNUNGAUSSCHWEINEHAUT
.
19
4.2.
ISOLIERUNG
DER
KERATINE
.
19
4
2
1
AUFSCHLUSS
MIT
HARNSTOFF.
.
19
4
2.2.
AUFSCHLUSS
MIT
EINEM
LYSISPUFFER
.
20
4
3.
DERIVATISIERUNG
DER
OXIDIERTEN
PROTEINE
.
20
4.3
1
DERIVATISIERUNG
MIT
DANSYLHYDRAZIN
.
20
4.3.2.
DERIVATISIERUNG
MIT
2,4-DINITROPHENYLHYDRAZIN
.
21
4.4
FLUORESZENZ-/
UV-MESSUNG
.
22
4
4.1.
LUMINESZENZSPEKTROMETER
(LS
50)
.
22
4
4
2
CYTOFLUOR
.
22
4.4
3
UV-MESSUNG
.
23
4
4.3.1.
BESTIMMUNG
DES
CAIBONYLANTEILS
PRO
PROTEINMOLEKUEL
.
23
4.5
BESTIMMUNG
DER
WIEDERFINDUNG
.
23
4
6.
NORMIERUNG
/
REFERENZPROTEIN
.
24
4
7.
OXIDATION
DER
PROTEINE
.
24
4
8.
HOCHDRUCKFLUESSIGKEITSCHROMATOGRAPHIE
.
25
4
8
1
MILLIPORE
CONSEPYY
LC
100
BIOCHROMATOGRAPHIE
SYSTEM
.
26
4.8
2.
SMART
SYSTEM
VON
PHARMACIA
.
28
4.8
3.
MERCK/HITACHI
CHROMATOGRAPHIEANLAGE
.
31
4.9.
SDS-PAGE
.
32
4.9.1.
KOMBINATION
SMART
/
SDS-PAGE
.
35
4.10.
WESTERN
BLOT
.
36
4.11.
MALDI
TOF-MASSENSPEKTROMETRIE
.
39
4.11.1.
QUALITATIVE
ANALYSE
DER
PROTEINZUSAMMENSETZUNG
.
39
4.11.2.
PEPTIDANALYSE
.
40
4.11.3.
AMINOSAEURENANALYSE
.
40
4.12.
BIOLOGISCHE
PARAMETER
.
42
4.12.1.
AUFNAHME
VON
HAUTSPEKTREN
.
42
4
12.1
1.
REFLEXIONSSPEKTREN
.
42
4.12.1.2.
FOURIER-TRANSFORMIERTE
INFRAROT-SPEKTREN
.
43
,
4.12.1.3.
CHEMILUMINESZENZ-MESSUNG
.
44
4.12.2.
UV-BESTRAHLUNG
.
45
4.12
2.1.
UVA-BESTRAHLUNG
.
45
4.12.2.2
UVB-BESTRAHLUNG
.
45
4.12.3
CARBONYLPROTEINGEHALT
IM
BEZUG
ZUM
CHRONOLOGISCHEM
ALTER
.
44
4.12.4.
JAHRESZEITLICHE
SCHWANKUNGEN
IM
CARBONYLPROTEINGEHALT
.
44
4.12.5.
UNTERSUCHUNG
UNTERSCHIEDLICHER
HAUTSCHICHTEN
AUF
IHREN
GEHALT
AN
CARBONYLPROTEINEN
NACH
UV-BESTRAHLUNG
.
46
4.12.6.
MESSUNG
DERHAUTFEUCHTIGKEIT
.
47
4.12.7.
BESTIMMUNG
DES
CARBONYLGEHALTES
VON
UNTERSCHIEDLICHEN
PHOTOTYPEN.47
4.12
8.
SUCHE
NACH
EINEM
ENDOGENEN
FLUORESZENZQUENCHER
.
48
4.12.9
BESTIMMUNG
DER
EISEN
UND
CITRONENSAEUREGEHALTE
DER
HAUT
.
48
4.12.10.
BESTIMMUNG
DES
EINFLUSSES
VON
HAUTKRANKHEITEN
AUF
DEN
CARBONYL
PROTEINGEHALT
DER
HAUT
.
49
4.13.
BESTIMMUNG
DES
EINFLUSSES
TOPISCH
APPLIZIERTER
WIRKSTOFFE
.
50
4.13.1.
BESTIMMUNG
DES
EINFLUSSES
VON
UVA-FILTER
AUF
DIE
CARBONYLPROTEIN
BILDUNG
.
50
4.13.2.
UEBERPRUEFUNG
DES
EINFLUSSES
VON
ANTIOXIDANTIEN
AUF
DIE
CARBONYL
PROTEINBILDUNG
.
50
4.13.3.
BESTIMMUNG
DES
EINFLUSSES
VON
EISENCHELATOREN
AUF
DIE
CARBONYL
PROTEINBILDUNG
.
51
4.13.4.
BESTIMMUNG
DES
EINFLUSSES
VON
ENZYMINHIBITOREN
AUF
DIE
CARBONYL
PROTEINBILDUNG
.
51
4.13.5.
BESTIMMUNG
DER
WIRKUNG
VERSCHIEDENER
HAUTPFLEGEPRODUKTE
.
52
4.13.6.
BESTIMMUNG
DES
EINFLUSSES
DER
HAUTFEUCHTIGKEIT
AUF
DIE
CARBONYL
PROTEINBILDUNG
NACH
UV-BESTRAHLUNG
.
53
4.13.7.
BESTIMMUNG
DES
EINFLUSSES
VON
ARGININ
UND
HARNSTOFF
AUF
DIE
CARBO
NYLPROTEINBILDUNG
.
53
4.14.
BESTIMMUNG
VON
OXIDIERTEN
PROTEINEN
IN
HACAT-ZELLEN
.
54
4.14.1.
UV-BETRAHLUNG
DER
HACAT-ZELLEN
.
54
4.14.2.
BESTIMMUNG
DES
EINFLUSSES
VON
ANTIOXIDANTIEN
AUF
DIE
BILDUNG
VON
OXIDIERTEN
PROTEINEN
IN
HACAT-ZELLEN
.
55
4.14.3.
.BESTIMMUNG
DES
EINFLUSSES
VON
BUTHIOMINSULFOXIMIN
AUF
DIE
CARBONYL
PROTEINBILDUNG
IN
HACAT-ZELLEN
.
55
5.
ERGEBNISSE
.
56
5.1.
METHODENENTWICKLUNG
.
56
5.1.1.
PROBENGEWINNUNG
MIT
TRITON
X-100
.
56
5.
1
.2.
PROBENGEWINNUNG
MIT
KLEBSTOFFABRISSEN
.
57
5.1.3.
WAHL
DER
AUFSCHLUSSMETHODE
.
57
5.1.4.
DERIVATISIERUNG
DER
CARBONYLPROTEINE
.
57
5.1.5.
OPTIMIERUNG
DER
MESSPARAMTER
.
58
5.1.5.1.
WAHL
DES
FLUORIMETERS
.
58
5.1.5
2
WAHL
DER
MESSPLATTEN
.
58
5.1.5.3
EINSATZ
VON
GUANIDINIUMCHLORID
UND
HARNSTOFF.
.
59
5.1.6.
GESAMTCARBONYLGEHALT
.
59
5.1.7.
WIEDERFINDUNGSRATE
.
60
5.1.8.
ERGEBNISSE
DER
OXIDATIONSTESTS
.
60
5.1.9.
SPEKTREN
.
60
5.1.10
CHEMILUMINESZENZ
.
61
5.2.
KERATINZUSAMMENSETZUNG
.
63
5.2
1
CHROMATOGRAPHIE-ERGEBNISSE
.
63
5.2
1.1.
CONSEP-ERGEBNISSE
.
63
5.2.1.2
SMART-ERGEBNISSE
.
64
5.2.1.3.
MERCK/HITACHI-ERGEBNISSE
.
64
5.2.2.
ELEKTROPHORESE-ERGEBNI
SSE
.
64
5.2.2
1.
KOMBINATION
SDS-PAGE
/
SMART-FRAKTIONIERUNG
.
65
5.2.3
WESTERN
BLOT-ERGEBNISSE
.
65
5.2.4.
MALDI
TOF-MASSENSPEKTROSKOPIE
ERGEBNISSE
.
65
5
2
4.1.
ERGEBNISSE
DER
KERATINANALYSEN
.
65
5
2.4.2.
ERGEBNISSE
DER
PEPTIDANALYSEN
.
66
5
2.4
3
ERGEBNISSE
DER
AMINOSAEURENANALYSEN
.
66
5.3.
BIOLOGISCHE
PARAMETER
.
66
5.3.1
UV-ERGEBNISSE
.
67
5.3.1.1
ERGEBNISSE
DER
UVA-BESTRAHLUNG
.
67
5.3.1.2
ABHAENGIGKEIT
DES
CARBONYLPROTEINGEHALTES
VON
DER
EINGE
STRAHLTEN
UVA-DOSIS
.
67
5
3.13
ERGEBNISSE
EINER
PERMANENTEN
UV-EXPOSITION
.
68
5.3
2
4
ERGEBNISSE
DER
UVB-BESTRAHLUNG
.
69
5.3.2.
ABHAENGIGKEIT
DES
CARBONYLPROTEINGEHALTES
VOM
ALTER
.
69
5
3
3.
JAHRESZEITLICHE
SCHWANKUNGEN
.
70
5.3
4.
HAUTSCHICHTENABHAENGIGKEIT
.
70
5.3
5.
EINFLUSS
DER
HAUTFEUCHTIGKEIT
.
70
5.3.6
EINFLUSS
DES
PHOTOTYPS
UND
DER
HAUTFARBE
.
71
5.3
7.
FLUORESZENZQUENCHER
.
72
5.3
8.
EINFLUSS
DER
EISEN
UND
CITRONENSAEUREGEHALTE
.
73
5
3
9.
EINFLUSS
VON
HAUTKRANKHEITEN
.
74
5
4.
EINFLUSS
VON
TOPISCH
APPLIZIERTE
WIRKSTOFFE
.
74
5
4.1.
EINFLUSS
VON
UVA-FILTER
.
74
5.4
2
EINFLUSS
VON
ANTIOXIDANTIEN
AUF
DIE
CARBONYLPROTEINBILDUNG
.
75
5.4.3.
EINFLUSS
VON
EISENCHELATOREN
AUF
DIE
CAIBONYLPROTEINBILDUNG
.
75
5.4.4.
EINFLUSS
VON
ENZYMINHIBITOREN
AUF
DIE
CARBONYLPROTEINBILDUNG
.
76
5.4.5.
EINFLUSS
VON
FEUCHTIGKEITSCREMES
AUF
DIE
CARBONYLPROTEINBILDUNG
.
77
5.4.6
UVA-SCHUTZ
DURCH
FEUCHTIGKEITSCREMES
.
77
5.4
6
WIRKUNG
VON
HARNSTOFF
UND
ARGININ
.
78
5.5.
ERGEBNISSE
DER
HACAT-ZELLEN-TESTREIHEN
.
78
5.5.1
ERGEBNISSE
DER
UV-EXPOSITION
.
78
5
5.2.
WIRKUNG
VON
ANTIOXIDANTIEN
.
80
5.5.3.
WIRKUNG
VON
BUTHIOMINSULFOXIM
.
80
6.
DISKUSSION
.
81
6.1.
METHODENETABLIERUNG
.
81
6.1.1.
SPEKTREN
.
83
6.1.2.
CHEMIIUMINESZENZ-MESSUNG
.
83
6.2.
BIOLOGISCHE
PARAMETER
.
84
6.2.1
EINFLUSS
VON
UV-STRAHLUNG
.
84
6.2.2.
UV-DOSIS-ABHAENGIGKEIT
.
85
6.2.3.
PERMANENTE
UV-EXPOSITION
.
85
6.2.4.
UVB-BESTRAHLUNG
.
86
6.2.5.
EINFLUSS
VON
"FEHLPLAZIERTEM
EISEN"
.
86
6.2.6.
ALTERSABHAENGIGKEIT
.
87
6.2.7.
EINFLUSS
DER
HAUTFEUCHTIGKEIT
.
87
6.3.
TOPISCH
APPLIZIERTE WIRKSTOFFE
.
88
6.4.
HAUTKRANKHEITEN
.
88
6.5.
HACAT-ZELLEN
.
89
7.
ZUSAMMENFASSUNG
.
90
8.
ANHANG
.
92
8.1.
GERAETE
.
92
8.2.
CHEMIKALIEN
UND
VERBRAUCHSMATERIAL
.
93
8.3.
PUFFER
UND
LOESUNGEN
.
96
8.4.
ARBEITSVORSCHRIFTEN
.
98
8.4.1.
GEWINNUNG
DER
CORNEOCYTEN
.
98
8.4.1.
1.
GEWINNUNG
DER
CORNEOCYTEN
MIT
TRITON
X-100
.
98
8.4
1.2
GEWINNUNG
DER
CORNEOCYTEN
MIT
KLEBEBAENDERN
.
98
8.4.1.3.
SUCTION-BLISTER-GEWINNUNG
.
99
8.4.2.
ISOLIERUNG
DER
KERATINE
.
99
8.4.3
DERIVATISIERUNG
MIT
HYDRAZINEN
.
100
8.4
4.
FLUORESZENZ
/
UV-MESSUNG
.
100
8.4.4.1.
LS
50
.100
8.4
4.2.
CYTOFLUOR
.100
8.4.4.3.
LAMBDA
7
.100
8.4.4.4
BERECHNUNG
DES
CARBONYLANTEILS
.
100
8.4.5.
NORMIERUNG
/
GESAMTPROTEINBESTIMMUNG
.
101
8.4.6
BESTIMMUNG
DER
WIEDERFINDUNG
.
102
8.4.7.
OXIDATION
DER
PROTEINE
.
102
8.5.
MESSPARAMETER
.
104
8.5.1.
HOCHDRUCKFLUESSIGKEITSCHROMATOGRAPHIE
.
104
8.5.1.1.
CONSEP-SYSTEM
.
104
8.5.1.2.
SMART-SYSTEM
.
105
8.5.1.3
MERCK/HITACHI-SYSTEM
.
106
8.5.2.
ELEKTROPHORESE
.
107
8
5.2.1.
HORIZONTALE
ELEKTROPHORESE
MIT
HOMOGENEN
SDS-GELEN
.
107
8.5.2.2.
VERTIKALE
ELEKTROPHORESE
MIT
DISKONTINUIERLICHEN
SDS-GELEN.
108
8.5.3.
WESTERN
BLOT
.
109
8.5.4.
MALDI
TOF-MASSENSPEKTROSKOPIE
.
112
8.5.5.
SPEKTRENAUFNAHME
.
112
8.5.5.1.
REFLEXIONSSPEKTREN
.
112
8.5.5.2.
FT-IR-SPEKTREN
.
113
8.5.6.
CHEMILUMINESZENZMESSUNG
.
114
8.6.
PROBANDEN-TESTS
.
115
8.6
1.
AUSWAHL
DER
PROBANDEN
.
115
8.6.2.
UEBERSICHTSCHEMA
DER
AUFARBEITUNG
DER
CARBONYLPROTEINE
FUER
DIE
PROBANDEN-TESTS
.
115
8.6.3.
UV-TESTS
.
116
8
6.3.1.
UVA-BESTRAHLUNG
.
116
8
6.3.2.
UVA-DOSIS-ABHAENGIGKEIT
.
116
8.6.33
UVB-BESTRAHLUNG
.
116
8.6.3
4.
PERMANENTE
UV-EXPOSITION
.
116
8
6.3.5.
CHROMA-METER-MESSUNG
.
117
8.6.2.
CARBONYLGEHALT
IM
BEZUG
ZUM
CHRONOLOGISCHEM
ALTER
.
117
8.6.3.
JAHRESZEITLICHE
SCHWANKUNGEN
.
117
8.64
HISTOLOGISCHE
SCHNITTE
.
118
8.6.5:
BESTIMMUNG
DER
EISENSALZE
UND
CITRONENSAEUREGEHALTE
.
118
8.6
6.
SUCHE
NACH
EINEM
FLUORESZENZQUENCHER
.
118
8
6
7.
TOPISCH
APPLIZIERTE WIRKSTOFFE
.
119
8
7.
ANZUCHT
DER
KERATINOCYTEN
.
119
8
7.1.
UV-BESTRAHLUNG
DER
HACAT-ZELLEN
.
120
8
7.2.
KINETIK
DER
CARBONYLPROTEINBILDUNG
.
120
8.7.3
APPLIKATION
VON
WIRKSTOFFEN
IN
DIE
HACAT-ZELLEN
.
120
8
8
TABELLEN
.
121
8
9.
CHROMATOGRAMME
UND
SPEKTREN
.
132
8.10.
VERBRAUCHSMENGEN
DER
EINGESETZTEN
CHEMIKALIEN
UND
EINWEGARTIKEL
.
141
9.
LITERATURVERZEICHNIS
.
145 |
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