Die Strukturen von cAMP- und cGMP-abhängiger Proteinkinase:
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1996
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INHALT SEITE
INHALTSVERZEICHNIS.2
ABKUERZUNGEN.4
1. EINLEITUNG
1.1. DIE SUPERFAMILIE DER EUKARYONTISCHEN PROTEINKINASEN.5
1.2. DIE ZELLULAEREN FUNKTIONEN VON PROTEINKINASEN.7
1.3. CYCLO-NUKLEOTIDE UND DAS 'SECOND-MESSENGER' KONZEPT.8
1.4. DIE FAMILIE DER CYCLO-NUKLEOTID REGULIERTEN PROTEINKINASEN.9
1.5. ZIELE DER ARBEIT.YY.14
2. METHODEN
2.1 MOLEKULARBIOLOGISCHE UND ZELLBIOLOGISCHE METHODEN
2.1.1. KONSTRUKTION OLIGO-NUKLEOTID GESTEUERTER MUTANTEN. 15
2.1.2. PROKARYONTISCHE EXPRESSION.17
2.1.3. EUKARYONTISCHE EXPRESSION.17
2.2. BIOCHEMISCHE METHODEN
2.2.1. REINIGUNG DER UEBEREXPREMIERTEN PROTEINE.18
2.2.2. GELELEKTROPHORESE UND IMMUNOBLOTS.19
2.2.3. BESTIMMUNG DER KATALYTISCHEN AKTIVITAET.20
2.2.4. CYCLO-NUKLEOTID BINDUNG UND DISSOZIATION.21
2.2.5. REKONSTITUTION DER UNTEREINHEITEN.22
2.2.6. PEPTID-BIBLIOTHEKEN UND SUBSTRATPEPTID MAPPING.22
2.2.7. SUCROSE-DICHTE ULTRAZENTRIFUGATION.23
2.2.8. ANALYTISCHE FPLC-GELFILTRATION.23
2.2.9. HARNSTOFF-DENATURIERUNG.23
2.2.10. SURFACE-PLASMON-RESONANZ SPEKTROSKOPIE.24
2.3. STRUKTURANALYTISCHE METHODEN
2.3.1. DIE X-RAY KRISTALLSTRUKTUR DER REGULATORISCHEN UNTEREINHEIT DER
CAMP-KINASE.25
2.3.2. COMPUTER-GESTUETZTE STRUKTURANALYSE DER CGMP-KINASE.25
BIBLIOGRAFISCHE INFORMATIONEN
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3. ERGEBNISSE UND DISKUSSION
3.1. DIE CAMP-ABHAENGIGE PROTEINKINASE
3.1.1. DER MECHANISMUS DER KOOPERATIVEN AKTIVIERUNG DER CAMP-KINASE.26
3.1.2. ALA^35 IST ESSENTIELL FUER DIE HOCHAFFINE CAMP-BINDUNG IN DER
REGULATORISCHEN
UNTEREINHEIT DER CAMP-KINASE.32
3.1.3. DER N-TERMINUS DER REGULATORISCHEN UNTEREINHEIT DER CAMP-KINASE
MODELIERT
CAMP BINDUNG UND HOLOENZYMFORMIERUNG .36
3.1.4. DIE KRISTALLSTRUKTUR DER REGULATORISCHEN UNTEREINHEIT DER
CAMP-KINASE.39
3.2. DIE CGMP-ABHAENGIGE PROTEINKINASE
3.2.1. LOKALISATION DER HOCH- UND NIEDERAFFINEN CGMP-BINDUNGSTASCHEN IN
DER CGMP-KINASE.48
3.2.2. DIE N- UND C-TERMINI DER CGMP-KINASE REGULIEREN DIE KINETISCHEN
EIGENSCHAFTEN
DER CGMP-BINDUNGSTASCHEN.52
3.2.3. DAS STRUKTURMODELL DER REGULATORISCHEN DOMAENE DER CGMP-KINASE.56
3.2.4. DAS STRUKTURMODELL DER KATALYTISCHEN DOMAENE DER CGMP-KINASE.61
3.2.5. ENTWICKLUNG EINES SPEZIFISCHEN PEPTIDSUBSTRATS FUER DIE
CGMP-KINASE.65
3.2.6. ANALYSE DER SUBSTRAT-KONFORMATIONEN IN DER CGMP-KINASE.70
4. LITERATURVERZEICHNIS.73
5. ZUSAMMENFASSUNG.83 |
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