Isolierung und Charakterisierung eines Hemmstoffes der Na+/K+-ATPase aus Penicillium lagena und Optimierung der Wachstumsbedingungen bezüglich der Bildung von Hemmstoffen der Na+/K+-ATPase in verschiedenen Mikroorganismen:
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1996
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|---|---|
| adam_text | ISOLIERUNG UND CHARAKTERISIERUNG EINES HEMMSTOFFES DER NA + /K + -ATPASE
AUS PENICILLIUM LAGENA UND OPTIMIERUNG DER WACHSTUMSBEDINGUNGEN
BEZUEGLICH DER BILDUNG VON HEMMSTOFFEN DER NA + /K + -ATPASE IN
VERSCHIEDENEN MIKROORGANISMEN DISSERTATION ZUR ERLANGUNG DES
AKADEMISCHEN GRADES DOCTOR RERUM NATURALIUM (DR. RER. NAT.) VORGELEGT
DER MATHEMATISCH-NATURWISSENSCHAFTLICH-TECHNISCHEN FAKULTAET DER
MARTIN-LUTHER-UNIVERSITAET HALLE-WITTENBERG VON DIPLOM-CHEMIKERIN EDDA
FRERICHS GEB. AM 12.04.1966 IN BERLIN GUTACHTER: L.PROF. DR. M. LUCKNER
2. PROF DR. J. LASCH 3. PROF. DR. M.-R. KULA INHALTSVERZEICHNIS 1.
EINLEITUNG 6 1.1 DIE NA7K + -ATPASE ALS TRANSPORTENZYM UND
HERZGLYKOSID-REZEPTOR 6 1.2 HERZGLYKOSIDE UND DIGITALIS-LIKE SUBSTANCES
(DLS) 7 1.3 PLECTOMYCETES UND STREPTOMYCETES 10 1.4 ZIELSTELLUNG 11 2.
TESTVERFAHREN FUER HERZGLYKOSIDE UND DIGITALIS-LIKE SUBSTANCES 12 2. 1
HEMMUNG SOLUBILISIERTER NA7K + -ATPASE (GEKOPPELTER OPTISCHER TEST) 12
2.2 REZEPTORASSAY (RA) 13 2.3 FLUORESZENZPOLARISATIONS-IMMUNOASSAY
(FPIA) 14 2.4 RADIOIMMUNOASSAY (RIA) 15 2.5 ENZYMGEBUNDENER IMMUNOASSAY
(ELISA) 15 2.6 RUBIDIUM-AUFNAHME INTAKTER ZELLEN (PUMPLEISTUNG DER NA +
/K + -ATPASE) 16 2.7 WEITERE TESTMETHODEN AN INTAKTEN ZELLEN 16 3.
MATERIAL UND METHODEN 17 3.1 TESTDURCHFLIHRUNGEN 17 3.1.1 GEKOPPELTER
OPTISCHER TEST 17 3.1.1.1 DURCHFUHRUNG 17 3.1.1.2 AUSWERTUNG 18 3.1.2
FLUORESZENZPOLARISATIONS-IMMUNOASSAY (ABBOTT TDXFLX*) 20 3.1.3
REZEPTORASSAY MIT [ 3 H]-DIGOXIN AN SOLUBILISIERTER NA7K + -ATPASE 20
3.1.4 REZEPTORASSAY AN NA + /K*-ATPASE VON KANINCHEN-ERYTHROZYTEN UND
GHOSTS 21 3.1.4.1 GEWINNUNG DER KANINCHEN-ERYTHROZYTEN 21 3.1.4.2
PRAEPARATION DER ERYTHROZYTEN-GHOSTS NACH BILLAH ET AL. (1976) 21 3.1.4.3
PROTEINBESTIMMUNG NACH BRADFORD (1976) 21 3.1.4.4 HAEMOGLOBINBESTIMMUNG.!
22 3.1.4.5 DURCHFUHRUNG ZUR BESTIMMUNG DER BINDUNGSKAPAZITAET DER
ERYTHROZYTEN.. 22 3.1.4.6 TESTDURCHFUHRUNG MIT ANTHROYLOUABAIN 22
3.1.4.7 DURCHFUEHRUNG ZUR BESTIMMUNG DER BINDUNGSKAPAZITAET DER GHOSTS 23
3.1.4.8 TESTDURCHFUHRUNG MIT [ 3 H]-DIGOXIN 23 3.2 MIKROBIOLOGISCHE
ARBEITEN 23 3.2.1 ANZUCHT DER VORKULTUREN 23 3.2.2 STAMMHALTUNG UND
-KONSERVIERUNG 24 3.2.3 KULTURFUEHRUNG 24 3.2.4 REINHEIT DER STAEMME 25
3.2.5 NAEHRSTOFFBESTIMMUNG IM KULTURMEDIUM 25 3.2.5.1 ZUCKERBESTIMMUNG 25
3.2.5.2 AMMONIUMBESTIMMUNG 25 3.2.5.3 PHOSPHATBESTIMMUNG 26 3.2.6
ZELLGEWINNUNG 26 3.2.7 ERSTELLUNG DER WACHSTUMSKURVEN 26 3.3 OPTIMIERUNG
DER PHYSIKALISCHEN WACHSTUMSPARAMETER 27 3.3.1 PH-WERTE 27 3.3.2
SCHUETTELFREQUENZ 27 3.3.3 TEMPERATUR 27 3.3.4 EINFLUSS VON SCHIKANEN 28
3.3.5 INOKULUM 28 3.4 OPTIMIERUNG EINIGER NAEHRSTOFFPARAMETER 28 3.4.1
GLUKOSEKONZENTRATION 28 3.4.2 HEFEEXTRAKTGEHALT 28 3.4.3 VERSCHIEDENE
NAEHRMEDIEN 29 3.5 GEWINNUNG DER ROHEXTRAKTE (EXTRAKTIONSVERSUCHE) 29 3.6
ADSORPTIONSVERSUCHE 30 3.7 CHROMATOGRAPHISCHE TRENNMETHODEN 31 3.7.1
REVERSED-PHASE-CHROMATOGRAPHIE 31 3.7.2 GELPERMEATIONSCHROMATOGRAPHIE 31
3.7.3 HOCHDRUCKFLUESSIGKEITSCHROMATOGRAPHIE (HPLC) 32 3.7.4
GASCHROMATOGRAPHIE (GC/MS) 33 3.7.5
HOCHLEISTUNGSDUENNSCHICHTCHROMATOGRAPHIE (HPTLC) 33 3.8 METHODEN ZUR
STRUKTURAUFKLAERUNG 34 3.8.1 KERNRESONANZSPEKTROSKOPIE (NMR) 34 3.8.2
MASSENSPEKTROSKOPIE (MS) 34 3.8.3 INFRAROTSPEKTROSKOPIE (IR) 34 3.9
CHEMIKALIEN 34 4. ERGEBNISSE 35 4.1 AUFBAU EINES REZEPTORASSAYS AN
KANINCHEN-ERYTHROZYTEN UND IHREN GHOSTS 35 4.1.1 VERWENDUNG VON
ERYTHROZYTEN UND FLUORESZENZMARKIERTEM OUABAIN (AO) 35 4.1.1.1
BESTIMMUNG DER BINDUNGSKAPAZITAET DER NA7K + -ATPASE VON ERYTHROZYTEN MIT
AO 35 4.1.1.2 BESTIMMUNG DER NACHWEISGRENZE IM GANZZELL-REZEPTORASSAY
MIT AO 36 4.1.2 VERWENDUNG VON ERYTHROZYTEN-GHOSTS UND TRITIUMMARKIERTEM
DIGOXIN 38 4.1.2.1 BESTIMMUNG DER BINDUNGSKAPAZITAET DER NA7K + -ATPASE
VON ERYTHROZYTEN-GHOSTS MIT [ 3 H]-DIGOXIN 38 4.1.2.2 BESTIMMUNG DER
NACHWEISGRENZE IM GANZZELL-REZEPTORASSAY MIT [ 3 H]-DIGOXIN 39 4.2
CHARAKTERISIERUNG VON PENICILLHIM LAGENA UND STREPTOMYCES CALIFORNICUS
40 4.3 OPTIMIERUNG DER WACHSTUMSBEDINGUNGEN BEZUEGLICH DER BILDUNG VON
HEMMSTOFFEN DER NA7K + -ATPASE IN MIKROORGANISMEN 42 4.3.1 VERGLEICH DER
HEMMSTAERKE VON DREI MIKROBEN 42 4.3.2 PENICILLHIM LAGENA UND
STREPTOMYCES CALIFORNICUS 43 4.3 . 2.1 PH-WERT 44 4.3.2.2 TEMPERATUR 46
4.3.2.3 UMDREHUNGSZAHL DES KREISSCHUETTLERS 47 4.3.2.4 ALTER DES
INOKULUMS 48 4.3.2.5 GLUKOSEKONZENTRATION 49 4.3.2.6
HEFEEXTRAKTKONZENTRATION 50 4.3.2.7 ANDERE NAEHRMEDIEN 51 4.3.2.8 EINFLUSS
DER KULTIVIERUNGSGEFAESSE AUF PRODUKTBILDUNG UND ZELLPRODUKTION 52 4.3.2.9
NAEHRSTOFFVERWERTUNG UND PRODUKTBILDUNG (WACHSTUMSKURVEN) 53 4.4
PROBENVORBEREITUNG ZUR HEMMSTOFFISOLIERUNG AUS STREPTOMYCES CALIFORNICUS
56 4.4.1 GEWINNUNG DES ROHEXTRAKTES 56 4.4.2 ROHEXTRAKTREINIGUNG DURCH
ADSORPTION AN EXTRELUT-20 57 4.5 ISOLIERUNG EINES HEMMSTOFFES DER NA7K +
-ATPASE AUS PENICILLHIM LAGENA 58 4.5.1 TROCKENZELLGEWINNUNG AUS DEM
KULTURMEDIUM 58 4.5.2 PROBENVORBEREITUNG 58 4.5.2.1 EXTRAKTION 58
4.5.2.2 ADSORPTION 60 4.5.3 NIEDERDRUCKSAEULENCHROMATOGRAPHIE 62 4.5.3.1
REVERSED-PHASE-CHROMATOGRAPHIE 62 4.5.3.2 GELPERMEATIONSCHROMATOGRAPHIE
64 4.5.4 HOCHDRUCKFLUESSIGKEITSCHROMATOGRAPHIE 65 4.5.5
AUFREINIGUNGSSCHEMA 67 4.6 STRUKTURAUFKLAERUNG 69 4.6.1
KERNRESONANZSPEKTROSKOPIE 69 4.6.2
GASCHROMATOGRAPHIE/MASSENSPEKTROSKOPIE 76 4.6.3 INFRAROTSPEKTROSKOPIE .
78 4.7 CHARAKTERISIERUNG DES ISOLIERTEN HEMMSTOFFES 80 4.7.1
TEMPERATURSTABILIAET 80 4.7.2 SAEURE-BASE-EINFLUSS AUF DAS HEMMVERHALTEN 80
4.7.3 VERGLEICH DES HEMMSTOFFS MIT HERZGLYKOSIDEN MITTELS HPTLC 82 4.7.4
CHARAKTERISIERUNG DER HEMMEIGENSCHAFTEN 82 4.7.5 KOMPETITIVE VERDRAENGUNG
VOM REZEPTOR DURCH KALIUM 84 5. DISKUSSION 85 6. ZUSAMMENFASSUNG 93 7.
LITERATURVERZEICHNIS 96 8. ANHANG 103 8.1 VERZEICHNIS DER ABKUERZUNGEN
.-.- 103 8.2 VERZEICHNIS DER ABBILDUNGEN 104 8.3 VERZEICHNIS DER
TABELLEN 106 8.4 LITERATUR-SPEKTREN.... 107
|
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| spelling | Frerichs, Edda Verfasser aut Isolierung und Charakterisierung eines Hemmstoffes der Na+/K+-ATPase aus Penicillium lagena und Optimierung der Wachstumsbedingungen bezüglich der Bildung von Hemmstoffen der Na+/K+-ATPase in verschiedenen Mikroorganismen von Edda Frerichs 1996 110 S. Ill., graph. Darst. txt rdacontent n rdamedia nc rdacarrier Halle, Univ., Diss., 1996 Herzglykosidrezeptor - Natrium-Kalium-Pumpe - Mikroorganismus - Wachstumshemmung Penicillium lagena - Natrium-Kalium-Pumpe - Wachstumshemmung Wachstumshemmung (DE-588)4136401-6 gnd rswk-swf Penicillium lagena (DE-588)4427107-4 gnd rswk-swf Herzglykosidrezeptor (DE-588)4206755-8 gnd rswk-swf Mikroorganismus (DE-588)4039226-0 gnd rswk-swf Natrium-Kalium-Pumpe (DE-588)4202457-2 gnd rswk-swf (DE-588)4113937-9 Hochschulschrift gnd-content Penicillium lagena (DE-588)4427107-4 s Natrium-Kalium-Pumpe (DE-588)4202457-2 s Wachstumshemmung (DE-588)4136401-6 s DE-604 Herzglykosidrezeptor (DE-588)4206755-8 s Mikroorganismus (DE-588)4039226-0 s GBV Datenaustausch application/pdf http://bvbr.bib-bvb.de:8991/F?func=service&doc_library=BVB01&local_base=BVB01&doc_number=007390385&sequence=000001&line_number=0001&func_code=DB_RECORDS&service_type=MEDIA Inhaltsverzeichnis |
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