In-vitro-Untersuchungen zur Kurz- und Langzeitregulation neuronaler Plastizität durch Neurotrophine:
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| Format: | Abschlussarbeit Buch |
| Sprache: | German |
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1996
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PUBLIKATIONEN
N
DANKSAGUNG
IQ
INHALTSVERZEICHNIS
IV
ZUSAMMENFASSUNG
1
1.
EINLEITUNG
3
1.1.
STRUKTURELLE
MERKMALE
DER
NEUROTROPHINE
3
1.2.
BIOLOGISCHE
FUNKTIONEN
DER
NEUROTROPHINE
4
1.3.
SIGNALTRANSDUKTION
DURCH
NEUROTROPHIN-REZEPTOREN
5
1.3.1.
NEUROTROPHIN-SIGNALTRANSDUKTION
DURCH
TRK-REZEPTOREN
5
1.3.2.
NEUROTROPHIN-SIGNALTRANSDUKTION
DURCH
P75
9
1.4.
NEUROTROPHINE
UND
AKTIVITAETSABHAENGIGE
NEURONALE
PLASTIZITAET
9
1.4.1.
REGULATION
DER
NEUROTROPHIN-SYNTHESE
DURCH
NEURONALE
AKTIVITAET
9
1.4.2.
REGULATION
DER
NGF
UND
BDNF-FREISETZUNG
DURCH
NEURONALE
AKTIVITAET
11
1.4.3.
EINFLUSS
VON
NEUROTROPHINEN
AUF
DIE
AKTIVITAETSABHAENGIGE
PLASTIZITAET
IM
VISUELLEN
CORTEX
11
1.4.4.
MODULATION
SYNAPTISCHER
TRANSMISSION
DURCH
NEUROTROPHINE
13
1.4.4.1
.POTENZIERUNG
DURCH
ERHOEHTE
NEUROTRANSMITTERAUSSCHUETTUNG
-
PRAESYNAPTISCHE
EFFEKTE
VON
NEUROTROPHINEN
13
1.4.4.2.MODULATION
SYNAPTISCHER
TRANSMISSION
DURCH
NEUROTROPHINE
VIA
POSTSYNAPTISCHE
MECHANISMEN
13
1.4.4.3
.EVIDENZ
FUER
EINE
ROLLE
VON
NEUROTROPHINEN
AN
DER
LANGZEITPOTEN
ZIERUNG
IM
HIPPOCAMPUS
14
1
.4.4.4.NEUROTROPHINE
INDUZIEREN
RASCHE
VERAENDERUNGEN
DER
NEURONALEN
AKTIVITAET
IN
VIVO
15
1.5.
EXPERIMENTELLE
FRAGESTELLUNGEN
15
2.
MATERIAL
UND
METHODEN
16
2.1.
ZELLKULTUR
16
2.1.1.
MATERIALIEN
UND
CHEMIKALIEN
FUER
DIE
ZELLKULTUR
16
2.1.2.
LOESUNGEN
UND
ZELLKULTURMEDIEN
16
2.1.3.
BESCHICHTUNG
VON
ZELLKULTURSCHALEN
MIT
POLY-DL-OMITHIN
17
2.1.4.
PRAEPARATION
HIPPOCAMPALER
NEURONEN
17
2.2.
CALCIUM-FLUORESZENZMIKROSKOPIE
18
2.2.1.
MESSPRINZIP
18
2.2.2.
EIGENSCHAFTEN
VON
FURA-2
18
2.2.3.
BELADEN
DER
NEURONEN
MIT
FURA-2
19
2.2.4.
KALIBRIERUNG
20
2.2.5.
AUFBAU
DES
MESSPLATZES
21
2.2.5.
1
.BESTANDTEILE
DES
MESSPLATZES
21
2.2.5.2.
KONFIGURATION
DES
MESSPLATZES
21
2.2.5.3.DAS
PROGRAMM
ARGUS-50/CA
VER.
3.0
22
2.3.
HERSTELLUNG
VON
MIKROPIPETTEN
ZUR
LOKALEN
APPLIKATION
23
2.4.
LOKALE
APPLIKATION
VON
NEUROTROPHINEN
23
2.5.
BESCHICHTUNG
VON
GLASMIKROSPHAEREN
MIT
BDNF
23
2.6.
RNA-ANALYSE
24
2.6.1.
MATERIALIEN
24
2.6.
1
.1
.REAGENZIEN
UND
APPARATE
24
2.6.1.2.SONDEN
25
2.6.2.
LOESUNGEN
25
2.6.3.
RNA-EXTRAKTION
26
2.6.4.
GELELEKTROPHORESE
26
2.6.5.
NORTHERN-TRANSFER
27
2.6.6.
SYNTHESE
RADIOAKTIV-MARKIERTER
NUKLEINSAEURESONDEN
27
2.6.7.
HYBRIDISIERUNG
27
2.6.8.
ENTWICKLUNG
UND
QUANTIFIZIERUNG
27
2.7.
IMMUNZYTOCHEMISCHE
NACHWEISMETHODEN
28
2.7.1.
REAGENZIEN
28
2.7.2.
VERDUENNUNGEN
UND
LOESUNGEN
28
2.7.3.
IMMUNZYTOCHEMIE
28
2.8.
MORPHOMETRISCHE
ANALYSE
UND
BESTIMMUNG
DER
ZELLZAHL
29
3.
ERGEBNISSE
31
3.1.
CHARAKTERISIERUNG
NEUROTROPHIN-INDUZIERTER
CA
2+
-SIGNALE
IN
HIPPOCAMPALEN
NEURONEN
31
3.1.1.
BDNF
UND
NT-3
INDUZIEREN
EINEN
ANSTIEG
DER
[CA
2+
]J
IN
HIPPOCAMPALEN
NEURONEN
31
3.1.2.
DER
BDNF-INDUZIERTE
[CA
2+
]J-ANSTIEG
IST
ABHAENGIG
VON
DER
AKTIVIERUNG
VON
TRK-REZEPTOREN
33
3.1.3.
DER
BDNF-INDUZIERTE
[CA
2+
]J-ANSTIEG
IST
ABHAENGIG
VON
EXTRAZELLULAEREM
CA
2+
35
3.1.4.
RAEUMLICHE
HETEROGENITAET
DES
BDNF-INDUZIERTEN
CA
2+
-SIGNALS
38
3.1.5.
BDNF
POTENZIERT
SPONTANE
AKTIVITAETSABHAENGIGE
CA
2+
-TRANSIENTEN
IN
KULTUREN
DICHT
VERNETZTER
HIPPOCAMPALER
NEURONEN
41
3.2.
UNTERSUCHUNGEN
ZUR
FUNKTION
VON
BDNF
BEI
DER
REGULATION
DES
PHAENOTYPS
GABAERGER
INTEMEURONEN
44
3.2.1.
GABA
UND
MUSCIMOL
ERHOEHEN
DIE
[CA
2+]J
IN
UNREIFEN
HIPPOCAMPALEN
NEURONEN,
ABER
UNTERDRUECKEN
AKTIVITAETSABHAENGIGE
VERAENDERUNGEN
DER
[CA
2+
]J
NACH
REIFUNG
IN
VITRO
44
3.2.2.
GABAA-REZEPTORAKTIVIERUNG
INDUZIERT
C-FOS-IMMUNREAKTIVITAET
IN
UNREIFEN
HIPPOCAMPALEN
NEURONEN
48
3.2.3.
GABAA-REZEPTORAKTIVIERUNG
ERHOEHT
DIE
BDNF-MRNA-SYNTHESE
IN
UNREIFEN
HIPPOCAMPALEN
NEURONEN,
REPRIMIERT
SIE
JEDOCH
NACH
REIFUNG
IN
VITRO
50
3.2.4.
GABAA-REZEPTORAKTIVIERUNG
FOERDERT
DIE
DIFFERENZIERUNG
VON
UNREIFEN
HIPPOCAMPALEN
INTEMEURONEN
52
3.2.5.
BDNF
VERMITTELT
DEN
EFFEKT
VON
MUSCIMOL
AUF
UNREIFE
INTEMEURONEN
56
3.2.6.
BDNF
ERHOEHT
DIE
ANZAHL
DER
PRIMAEREN
NEURITEN
GABAERGER
NEURONEN
58
3.2.7.
MUSCIMOLBEHANDLUNG
FUEHRT
ZU
ATROPHIE
UND
VERMINDERTER
NPY
EXPRESSION
IN
HIPPOCAMPALEN
INTEMEURONEN
NACH
REIFUNG
IN
VITRO
59
3.3.
BDNF-EFFEKTE
AUF
WACHSTUMSKEGE]
VON
NEURITEN
HIPPOCAMPALER
NEURONEN
62
3.3.1.
AN
GLASMIKROSPHAEREN
GEKOPPELTER
BDNF
IST
BIOLOGISCH
AKTIV
62
3.3.2.
VERHALTEN
NEURONALER
WACHSTUMSKEGEL
BEI
KONTAKT
MIT
BDNF
BESCHICHTETEN
GLASMIKROSPHAEREN
62
4.
DISKUSSION
68
4.1.
INDUKTION
EINES
CA
2+
-SIGNALS
DURCH
NEUROTROPHINE
-
EIN
MECHANISMUS
DER
KURZZEITREGULATION
NEURONALER
PLASTIZITAET
68
4.1.1.
DEM
NEUROTROPHIN-INDUZIERTEN
ANSTIEG
DER
NEURONALEN
[CA
2+
JI
LIEGT
EIN
NEUARTIGER
MECHANISMUS
ZUGRUNDE
68
4.1.1.1.INDUKTION
EINES
CA
2+
-SIGNALS
ALS
EIN
GENERELLER
MECHANISMUS
DER
NEUROTROPHIN-SIGNALUEBERTRAGUNG?
68
4.1.1.2.
WELCHE
SIGNAL
WEGE
SIND
FUER
DEN
NEUROTROPHIN-INDUZIERTEN
ANSTIEG
DER
[CA
2+
],
VERANTWORTLICH?
69
4.1.1
.3.RAEUMLICHE
HETEROGENITAET
71
4.1.1
.4.POTENZIERUNG
SPONTANER
CA
2+
-TRANSIENTEN
DURCH
BDNF
73
4.1.2.
FUNKTIONELLE
BEDEUTUNG
DES
NEUROTROPHIN-INDUZIERTEN
CA
2+
-SIGNALS
73
4.1.2.1.
RASCHE
EFFEKTE
VON
NEUROTROPHINEN
AUF
WACHSTUMSKEGEL
HIPPOCAMPALER
NEURONEN
74
4.1
,2.2.NEUROTROPHIN-INDUZIERTE
CA
2+
-SIGNALE
UND
SYNAPTOGENESE
76
4.1
,2.3.FUNKTION
DES
CA
2+
-SIGNALS
BEI
DER
MODULATION
SYNAPTISCHER
TRANSMISSION
DURCH
NEUROTROPHINE
77
4.2.
AKTIVITAETSABHAENGIGE
REGULATION
DES
PHAENOTYPS
GABAERGER
INTEMEURONEN
DURCH
BDNF
-
EIN
MECHANISMUS
DER
LANGZEITREGULATION
NEURONALER
PLASTIZITAET
79
4.2.1.
DER
GABA-INDUZIERTE
ANSTIEG
DER
[CA
2+
]I
IST
AUF
DIE
DEPOLARISIERENDE
WIRKUNG
VON
GABA
WAEHREND
DER
FRUEHEN
ENTWICKLUNG
ZURUECKZUFUEHIEN
UND
WIRD
DURCH
GABAA-REZEPTOREN
VERMITTELT
79
4.2.2.
GABAERGE
AKTIVITAET
WIRKT
WAEHREND
DER
FRUEHEN
ENTWICKLUNG
EXZITATORISCH
80
4.2.3.
CA
2+
-INFLUX
DURCH
SPANNUNGSABHAENGIGE
CA
2+
-KANAELE
IST
FUER
DIE
INDUKTION
DER
C-FOS-IMMUNREAKTIVITAET
VERANTWORTLICH
81
4.2.4.
GABAERGE
STIMULATION
REGULIERT
DIE
BDNF-SYNTHESE
IN
DEN
ZIELZELLEN
GABAERGER
NEURONEN
81
4.2.5.
GABAERGE
STIMULATION
FOERDERT
DIE
DIFFERENZIERUNG
UNREIFER
HIPPOCAMPALER
NEURONEN
82
4.2.6.
KONSEQUENZEN
VERSTAERKTER
GABAERGER
AKTIVITAET
FUER
DEN
PHAENOTYP
REIFER
GABAERGER
INTEMEURONEN
84
4.2.7.
REGULATION
DES
FUNKTIONSSTATUS
GABAERGER
NEURONEN
DURCH
NEURONALE
AKTIVITAET
UND
NEUROTROPHINE
-
MOEGLICHE
FUNKTIONELLE
KONSEQUENZEN
84
5.
LITERATUR
6.
ABKUERZUNGEN
7.
LEBENSLAUF
86
117
119 |
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