Entwicklung einer durchflußzytometrischen Methode zur Messung der Phagozytose-, Burst- und Killingfähigkeit humaner Phagozyten:
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| Format: | Buch |
| Sprache: | German |
| Veröffentlicht: |
1996
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| Beschreibung: | München, Univ., Med. Fak., Diss., 1996 |
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INHALTSVERZEICHNIS
I
INHALTSVERZEICHNIS
1
EINLEITUNG
1
2
UEBERBLICK
UEBER
DAS
IMMUNSYSTEM
3
3
ALLGEMEINE
TESTCHARAKTERISTIKEN
7
3.1
DER
MESSORT
.
7
3.2
DIE
MESSBAREN
ASPEKTE
DER
IMMUNREAKTION
.
7
3.3
DIE
HEFE
CANDIDA
ALBICANS
ALS
AUSLOESER
DER
IMMUNREAKTION
.
9
3.4
UNTERSUCHTE
ANTIBIOTIKA
.
10
3.4.1
UNTERSUCHTE
KONZENTRATIONEN
.
11
3.4.2
EINFLUSS
DER
ANTIBIOTIKA
AUF
CANDIDA
ALBICANS
.
12
3.4.3
VORBEREITUNG
DER
ANTIBIOTIKA
.
13
3.5
TESTPERSONEN
.
13
4
MIKROSKOPISCHE
METHODE
15
4.1
PRINZIP
.
15
4.1.1
MESSGROESSEN
.
15
4.1.2
ANFAERBUNG
MIT
ACRIDINORANGE
.
15
4.1.3
FLUORESZENZMIKROSKOPIE
.
16
4.1.4
TESTANLEITUNG
.
16
4.2
ANWENDUNGEN
UND
ERGEBNISSE
.
19
4.2.1
MESSUNGEN
OHNE
ANTIBIOTIKUM
.
19
4.2.2
MESSUNGEN
MIT
ANTIBIOTIKUM
.
22
4.3
ERFAHRUNGEN
MIT
DER
MIKROSKOP-METHODE
.
23
5
DURCHFLUSSZYTOMETRISCHE
METHODE
27
5.1
PRINZIP
DES
DURCHFLUSSZYTOMETERS
.
27
5.1.1
EINLEITUNG
.
27
5.1.2
VORBEREITUNG
DER
PROBEN
.
27
5.1.3
AUFBAU
DES
DURCHFLUSSZYTOMETERS
.
27
5.2
TESTENTWICKLUNG
.
29
5.2.1
ALLGEMEINE
VERSUCHSBEDINGUNGEN
.
30
5.2.2
GERAETESPEZIFISCHE
VERSUCHSBEDINGUNGEN
.
54
5.2.3
BESTIMMUNG
DER
PHAGOZYTOSEAKTIVITAET
.
56
5.2.4
BESTIMMUNG
DER
KILLINGAKTIVITAET
.
104
5.2.5
BESTIMMUNG
DER
BURSTAKTIVITAET
.
133
5.2.6
KOMBINIERTER
TEST
ZUR
MESSUNG
DER
PHAGOZYTOSE-,
BURST
UND
KILLING
AKTIVITAET
.
151
5.2.7
BESTIMMUNG
DER
PARAMETER
AUS
DEM
VOLLBLUT
.
160
5.3
STATISTISCHE
BERECHNUNGEN
.
167
5.3.1
DIE
VARIANZ
VON
MEHRFACHMESSUNGEN
.
168
5.3.2
DIE
TAGESVARIANZ
.
173
5.3.3
PERSOENLICHE
KONSTANTEN
.
175
5.3.4
DIE
ZEITSKALEN
.
181
IL
INHAM'SVERZEICHNIS
5.3.5
VERGLEICH
VON
MESSUNGEN
AN
LRP
UND
VOLLBLUT
.
.
183
6
ANWENDUNGEN
UND
ERGEBNISSE
DER
ZYTOMETRIEMETHODE
185
6
1
UNTERSUCHUNG
AN
CGD-PATIENTEN
.
185
6
2
EINFLUSS
VON
ANTIBIOTIKA
AUF
PHAGOZYTOSE
UND
KILL'MG
.
.
186
7
DISKUSSION
DER
ERGEBNISSE
205
7.1
DIE
DURCHFLUSSZYTOMETIISCHEN
TESTMETHODE
.
205
7
2
VERGLEICH
DER
MIKROSKOPISCHEN
MIT
DER
ZYTOIUETRISCHCN
METHODE
21?
7
3
AUSKLANG
UND
AUSBLICK
.
215
8
ZUSAMMENFASSUNG
217
LITERATURVERZEICHNIS
219
A
TESTANLEITUNG
ZUR
DURCHFUEHRUNG
DER
VOLLBLUTMETHODE
229
A.L
VORBEREITUNG
VON
REAGENZIEN
.
.
229
A.2
PROBENVORBEREITUNG
.
229
A.2.1
FAERBUNG
VON
CANDIDA
ALBICANS
DSM
1386
.
.
229
A.2.2
AUFBEREITUNG
DES
BLUTES
.
.
231
A.2.3
VORINKUBATION
DES
VOLLBLUTES
MIT
DIHYDROETHIDIUM
.
231
A.2.4
ZELLZAHLBESTIMMUNGEN
.
.231
A.2.5
LAGERUNG
DER
REAGENZIEN
AUF
EIS
.
231
A.2
6
VORBEREITUNG
DER
REAGENZGEFAESSE
.
23!
A.2.7
PROBENANSATZ:
VERMISCHEN
DER
GEFAERBTEN
HEFEN
MIT
DER
BLUTPROBE
.
.
232
A.2.8
VERTEILUNG
DES
PROBENANSATZES
AUF
DIE
REAKTIONSGEFAESSE
.
.
.
232
A.2.9
INKUBATION
DER
PROBEN
.
232
A.2.10
ANHALTEN
DER
PHAGOZYTOSE
(NUR
PHAGOZYTOSE
UND
BURST.MESSUNG)
232
A.2.11
PHAGOZYTOSEPROBEN
ZENTIIFUGIEREN
(NUR
PHAGOZYTOSE
UND
BURSTINCS
SUNG)
.
.
.
.
.
.
233
A.2.12
MARKIERUNG
DER
PHAGOZYTEN
(NUR
PHAGOZYTOSE
UND
BUISTMESSUNG)
233
A.2.13
LYSE
DER
ERYTHROZYTEN
(NUR
PHAGOZYTOSE
UND
BURSTMESSUNG)
233
A.2.14
STABILISIERUNG
DEI
PROBEN
(NUR
PHAGOZYTOSE
UND
BURSTMESSUNG)
.
.
.
234
A.2.15
MESSUNG
DER
PHAGOZYTOSE
UND
BURSTPROBEN
.
.
234
A.2.16
ANHALTEN
DES
KILLINGS
(NUR
KIILINGMESSUNG)
.
231
A.2
17
LYSE
DER
HUMANEN
ZELLEN
(NUR
KIILINGMESSUNG)
.
234
A.2.18
ANFAERBUNG
DER
TOTEN
ZELLEN
(NUR
KIILINGMESSUNG)
.
235
A
2
19
MESSUNG
DER
KILLINGPROBEN
.
235
A
3
EINSTELLUNGEN
DES
DURCHFLUSSZYTOMCTCIS
UND
DIE
AUSWERTEMETHODE
.
.
235
B
ANLEITUNGEN
ZUR
REAGENZIENVORBEREITUNG
237
B.L
RPMI-164UE-LOESUNG
.
.
237
B.2
PBS-LOESUNG
.
.
238
B.3
ACIIDINORANGE-LOESUNG
0,05%
.
.
.
.
.
.
.
238
11.1
SOJA-TRYPAN
NAEHRLOESUNG
.
.
238
B
5
PBS-GLUCOSE-LOESUNG
.
.
239
B
6
NEM-LOESUNG
(100
MM)
.
.
.
239
B.7
NEM-LOESUNG
(10
MM)
. .
21(1
B8
CALCEIN-AM
LOESUNG
(1,15
PG/RNL)
.
.
.
.
.
210
B.9
PARAFORMALDEHYD-LOESUNG
(EINPROZENTIG)
.
240
B.10
PARAFORMALDEHYD-LOESUNG
(0,2%)
.
241
B.LL
VERDUENNTE
ANTIKOERPERLOESUNG
.
241
B.12
LYSE-LOESUNG
FUER
HUMANE
ZELLEN
.
241
B.13
ETHIDIUM-HOMODIMER-L-LOESUNG
(ETHD-1,
10
/XM)
.
242
B.14
ETHIDIUM-HOMODIMER-L-LOESUNG
(ETHD-1,
2
/XM)
.
242
B.15
DIHYDROETHIDIUM-LOESUNG
(5
MG/ML)
.
243
B.16
DIHYDROETHIDIUM-LOESUNG
(25
/XG/ML)
.
243
B.17
LYSE-LOESUNG
FUER
ERYTHROZYTEN
.
243
C
ANLEITUNGEN
ZUR
PROBENVORBEREITUNG
245
C.L
FAERBUNG
VON
CANDIDA
ALBICANS
DSM
1386
.
245
C.2
AUFBEREITUNG
DES
BLUTES
UND
HERSTELLUNG
VON
LRP
.
247
C.3
ZELLZAHLBESTIMMUNGEN:
.
247
C.4
LAGERUNG
DER
REAGENZIEN
AUF
EIS:
.
247
D
LEBENSLAUF
249
E
DANKSAGUNG
251 |
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