Die Glucose-Oxidase als Konjugat in der erweiterten passiven Immuntherapie des Neuroblastoms: in-vitro-Untersuchungen am Sphäroid
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1996
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INHALT
I
1
EINLEITUNG
1
1.1
D
AS
N
EUROBLASTOM
1
1.2
S
PHAEROIDE
7
1.3
Z
IEL
DER
A
RBEIT
10
2
MATERIAL
UND
METHODEN
11
2.1
M
ATERIALIEN
11
2
1
1
ZELLINIE
11
2
1
2
Z
ELLKULTURMEDIEN
UND
Z
USAETZE
11
2
1
3
C
HEMIKALIEN
,
A
NTIKOERPER
UND
E
NZYME
12
2
1
4
R
ADIOAKTIVE
S
UBSTANZEN
14
2.2
Z
USAMMENSETZUNG
DER
K
ULTURMEDIEN
UND
P
UFFERLOESUNGEN
15
2.3
E
IGENS
ANGEFERTIGTE
G
ERAETE
17
23
1
S
CHAUKEL
17
2
3
2
T
RENNSAEULE
18
2
3
3
S
CHUETTLER
19
2.4
Z
ELLKULTURTECHNIKEN
20
24
1
A
UFTAUEN
VON
Z
ELLEN
20
242
P
ASSAGIEREN
DER
M
ONOLAYERKULTUREN
20
243
H
ERSTELLEN
VON
S
PHAEROIDEN
20
244
A
UFLOESEN
DER
S
PHAEROIDE
IN
EINE
E
INZELZELLSUSPENSION
21
245
L
ANGZEITLAGERUNG
DER
Z
ELLEN
21
2.5
R
ADIOAKTIVE
M
ARKIERUNGEN
MIT
1-125
22
2.5.1
M
ARKIERUNG
DER
A
NTIKOERPER
22
2.5
2
M
ARKIERUNG
DER
AN
A
VIDIN
GEKOPPELTEN
G
LUCOSE
-O
XIDASE
(A
V
-GO)
22
2.6
F
IXIERUNG
UND
E
INBETTUNG
DER
S
PHAEROIDE
22
2.7
H
ISTOLOGISCHE
UND
IMMUNHISTOCHEMISCHE
F
AERBUNGEN
DER
S
PHAEROIDSCHNITTE
23
27
1
H
AMALAUN
-
UND
E
OSIN
-
FAERBUNG
(HE-F
AERBUNG
)
23
2.7
2
P
ROLIFERATIONSFAERBUNG
(KI-67)
23
2.8
A
UTORADIOGRAPHIE
-V
ERFAHREN
('D
IPPING
-T
ECHNIK
')
24
2.9
V
ITALITAETS
-,
P
ROLIFERATIONS
-
UND
W
ACHSTUMSBESTIMMUNG
24
29
1
V
ITALITAETSMESSUNG
MITTELS
DES
MTT-T
ESTS
AN
M
ONOLAYERN
24
2.9
2
VITALITATSMESSUNG
MITTELS
DES
WST-1
-TESTS
UND
PROLIFERATIONSMESSUNG
MITTELS
H-3-THYMIDIN
AN
SPHAEROIDEN
25
293
VOLUMENBESTIMMUNG
DER
SPHAEROIDE
26
INHALT
II
2.10
N
ACHWEISVERFAHREN
FUER
DAS
G
DJ
-A
NTIGEN
26
2
10.1
B
ESTIMMUNG
DER
G
M
-ANNGENHAEUFIGKERR
26
210.1
1
L
IGANDENVERDRANGUNGSTEST
26
2
10
1
2
SCATCHARD-PLOT
27
2.102
A
UTORADIOGRAPHISCHER
N
ACHWEIS
DES
G
D2
-
A
NTIGENS
AM
S
PHAROIDSCHNTTT
28
2.103
G
RA
-
A
NTIGEN
-N
ACHWEIS
O
BER
F
LUORESZENZ
(C
Y
3)-FA
RBUNG
AM
INTAKTEN
SPHARO1D
28
2.10.4
G
D2
-
A
NTIGEN
-D
ARSTELLUNG
IM
R
ASTERELEKTRONENMIKROSKOP
28
2
10
4
1
A
N
M
ONOLAYERZELLEN
28
2
10
4
2
A
NDER
S
PHAROIDOBERFLACHE
29
2.11
BINDUNGSKINETIK
DER
IMMUNKONJUGATKOMPONENTEN
AM
SPHAEROID
29
2
111
ANTI-G
D2
-ANTIKOERPER
CH14
18
29
2
112
A
VIDIN
-
GEKOPPELTE
G
LUCOSE
-O
XIDASE
(A
V
-GO)
30
2.12
A
UTORADIOGRAPHISCHE
D
ARSTELLUNG
DER
I
MMUNKONJUGATKOMPO
NENTEN
IM
SPHAEROID
31
2
12
1
A
NTI
-G
D2
-A
NTIKOERPER
CH
1
4
18
31
2
12
2
B
IOTIN
-
GEKOPPELTER
ANN-HUMAN-LGG
A
NTIKOERPER
32
2
12
3
A
VIDIN
-
GEKOPPELTE
G
LUCOSE
-O
XIDASE
(AV-GO)
32
2.13
INKUBATION
DER
SPHAEROIDE
MIT
DEM
IMMUNKONJUGATKOMPLEX
ZUR
U
NTERSUCHUNG
SEINER
ZYTOTOXISCHEN
W
IRKUNG
33
2.14
H
2
O
2
-BESTIMMUNG
NACH
THURMAN
35
3
ERGEBNISSE
36
3.1
E
IGENSCHAFTEN
DER
NEUROBLASTOM
-Z
ELLINIE
SK-N-LO
36
3.1
1
ZELL
WACHSTUM
IN
DER
MONOLAYERKULTUR
36
3
1.2
M
ORPHOLOGISCHE
E
IGENSCHAFTEN
DES
M
ONOLAYERS
40
313
W
ACHSTUM
DER
S
PHAEROIDE
40
3
14
M
ORPHOLOGISCHE
E
IGENSCHAFTEN
DES
S
PHAEROIDS
44
3.2
N
ACHWEIS
DES
D
ISIALOGANGLIOSIDS
G
N2
49
32
1
Q
UANTITATIVER
N
ACHWEIS
VON
G
D2
49
3
.2
2
A
UTORADIOGRAPHISCHER
N
ACHWEIS
VON
G
K
-S
TRUKTUREN
AM
S
PHAROID
-
SCHNITT
55
3.2
3
N
ACHWEIS
VON
G
M
MITTELS
EINES
F
LUORESZENZ
(C
Y
3)
MARKIERTEN
SEKUNDAERANTIKORPERS
AM
INTAKTEN
SPHAEROID
56
3
2
4
E
LEKTRONENMIKROSKOPISCHER
N
ACHWEIS
VON
G
M
57
3
.2
4.1
A
N
M
ONOLAYERZELLEN
57
3
2
4
2
A
N
DER
S
PHAEROIDOBERFLAECHE
59
3.3
E
IGENSCHAFTENDES
A
NTI
-G
D
2
-A
NTIKOERPERSCH
14.18
60
INHALT
III
3
3
1
Z
EITLICHER
V
ERLAUF
DER
A
NTIKOERPERBINDUNG
IM
S
PHAEROID
60
3.3
2
A
NTIKOERPERBINDUNG
IN
A
BHAENGIGKEIT
VON
DER
S
PHAROIDGROBE
63
3
3
3
S
TABILITAET
DER
A
NTIKOERPERBINDUNG
IM
S
PHAEROID
64
3
3.4
A
UTORADIOGRAPHISCHER
N
ACHWEIS
DES
A
NTIKOERPERS
CH
14
18
66
3
3
5
W
ACHSTUMSINHIBIERENDE
W
IRKUNG
DES
A
NTIKOERPERS
70
3
3
5
1
A
M
M
ONOLAYER
70
3.3
5
2
A
M
S
PHAEROID
72
3.4
E
IGENSCHAFTEN
DES
B
IOTIN
-
GEKOPPELTEN
A
NTI
-
HUMAN
-I
R
C-A
NTIKOERPERS
(B
RUECKENANTIKOERPER
)
75
3.5
E
IGENSCHAFTEN
DER
A
VIDIN
-
GEKOPPELTEN
G
LUCOSE
-O
XIDASE
(A
V
-GO)
76
3
5
1
Z
EITLICHER
V
ERLAUF
DER
B
INDUNG
VON
A
VIDIN
-
GEKOPPELTER
G
LUCOSE
-
O
XIDASE
IM
S
PHAEROID
77
3
52
B
INDUNGSSTABILITAT
DER
A
VIDIN
-
GEKOPPELTEN
G
LUCOSE
-O
XIDASE
IM
I
MMUNKONJUGAT
78
3
5
3
A
UTORADIOGRAPHISCHER
N
ACHWEIS
DER
IM
S
PHAEROID
GEBUNDENEN
A
VIDIN
-
GEKOPPELTEN
G
LUCOSE
-O
XIDASE
82
3.6
H
2
O
2
-B
ESTIMMUNG
IN
DEN
A
NSAETZEN
MIT
I-125
MARKIERTER
A
VIDIN
-
GEKOPPELTER
GLUCOSE-OXIDASE
(A
V
-GO)
83
3.7
T
OXIZITAET
DES
I
MMUNKONJUGATKOMPLEXES
AN
S
PHAEKOIDEN
DER
N
EUROBLASTOM
-Z
ELUNIE
SK-N-LO
87
3
7
1
N
ACHWEIS
DER
T
OXIZITAET
ANHAND
DES
WST
1-T
ESTS
87
372
N
ACHWEIS
DER
T
OXIZITAET
ANHAND
DER
H-3-T
HYMIDINAUFNAHME
90
373
N
ACHWEIS
DER
T
OXIZITAET
ANHAND
EINER
P
ROLIFERATIONSFAERBUNG
AN
S
PHAROIDSCHNTTTEN
93
3.8
H
2
O
2
-B
ESTIMMUNG
ZUM
N
ACHWEIS
DER
E
NZYMAKTIVITAET
DER
AVIDIN
-
GEKOPPELTEN
GLUCOSE-OXIDASE
(A
V
-GO)
94
4
DISKUSSION
98
5
ZUSAMMENFASSUNG
107
6
ABBILDUNGS
VERZEICHNIS
108
LITERATURVERZEICHNIS
111 |
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