Die unterschiedlichen Effekte von pulsatiler und kontinuierlicher Exposition von kultivierten Chondrozyten aus den Wachstumsfugen junger Ratten gegenüber 1,25(OH)2D3:
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1995
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| Beschreibung: | Heidelberg, Univ., Diss., 1996 (Nicht für den Austausch) |
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INHALTSVERZEICHNIS
SEITE
ABKUERZUNASVERZEICHNIS
3
1-0 EINLEITUNG
4
1.1 VITAMIN-D-THERAPIE BEI CHRONISCHER NIERENINSUFFIZIENZ 4
1.2 DIE INTERMITTIERENDE GABE VON 1,25(OH)2D3
4
1.3 DER WACHSTUMSKNORPEL - EIN NICHT-KLASSISCHES ZIELORGAN DES 4
1,25(OH)
2D3
1.4 FRAGESTELLUNG 5
2.0 MATERIAL UND METHODE
6
2.1 MEDIEN UND PUFFER 6
2.2 CHEMIKALIEN 7
2.3 ISOLATION UND KULTIVIERUNG VON CHONDROCYTEN DER TIBIALEN
EPIPHYSENFUGEN JUNGER RATTEN 8
2.3.1 ISOLATION DER CHONDROZYTEN AUS TIBIALEN EPIPHYSENFUGEN 8
2.3.2 MONOLAYERPRIMAERKULTUREN 8
2.3.3 PASSAGIEREN DER CHONDROCYTEN 8
2.3.4 VITALITAETSPRUEFUNG 9
2.3.5 MORPHOLOGISCHE BEURTEILUNG NACH ZELLFIXIERUNG 9
2.4 PRINZIPIELLER VERSUCHSAUFBAU 10
2.5 PROLIFERATIONSTESTE 11
2.5.1 RADIOTHYMIDINASSAY 11
2.5.2 ZELLZAEHLUNG (WACHSTUMSKURVE) 11
2.6 PRUEFUNG SPEZIFISCHEF ZELLEISTUNGEN 12
2.6.1 BESTIMMUNG DER AKTIVITAET DER ALKALISCHEN PHOSPHATASE 12
2.6.2 BESTIMMUNG DER PROTEINBIOSYNTHESE DURCH EINEN RADIOLEUCINASSAY 13
2.7 VDR-NACHWEIS 13
2.7.1 SAETTIGUNGSANALYSE (SCATCHARD PLOT) 13
2.7.2 HYDROXYLAPATIT-ASSAY 13
2.8 STATISTIK 14
3.0 ERGEBNISSE
15
3.1 SYSTEMKONTROLLVERSUCH 15
3.2 PROLIFERATION 16
3.2.1 DOSIS-WIRKUNGSKURVE VON 1,25(OH)
2D3 AUF DIE DNA-SYNTHESERATE 16
3.2.2 EFFEKTE DES ZEITLICHEN MODUS DER EXPOSITION MIT L,25(OH)2D3 AUF
DIE DNA-SYNTHESERATE 17
3.2.3 ABHAENGIGKEIT DER L,25(OH)2D
3-WIRKUNG AUF DIE DNA-SYNTHESERATE
VON DER CA^
+-KONZENTRATION IM MEDIUM 21
1
BIBLIOGRAFISCHE INFORMATIONEN
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3.2.4 EFFEKTE DER PULSATILEN UND KONTINUIERLICHEN 1,25(OH)
2D3-EXPOSITION
AUF DIE ZELLZAHL (WACHSTUMSKURVE)
22
3.2.5 SPEZIFITAET DER WIRKUNG VON LA,25(OH)
2D3 25
3.3 PRUEFUNG SPEZIFISCHER ZELLEISTUNGEN 28
3.3.1 EFFEKTE DER KONTINUIERLICHEN UND PULSATILEN EXPOSITION MIT
1,25(OH HD
3
AUF DIE AKTIVITAET DER ALKALISCHEN PHOSPHATASE 28
3.3.2 EFFEKTE DES ZEITLICHEN MODUS DER EXPOSITION MIT UNTERSCHIEDLICHEN
KONZENTRATIONEN VON L,25(OH)2D3 AUF DIE PH (-LEUCIN-INKORPORATION
32
3.4
VITAMIN-D-REZEPTOMACHWEIS 34
3.4.1 SPEZIFISCHE BINDUNG VON L,25(OH)2D3 IN ABHAENGIGKEIT VON PULSATILER
UND KONTINUIERLICHER EXPOSITION MIT L,25(OH)2D3
34
3.4.2 ZEITVERLAUF DER VDR-REGULATION BEI PULSATILER UND KONTINUIERLICHER
EXPOSITION MIT L,25(OH)2D3
37
3.4.3 ABHAENGIGKEIT DER L,25(OH)
2D3-WIRKUNG AUF DIE VDR-REGULATION
VON DER PROTEINBIOSYNTHESE 40
4.0 DISKUSSION
41
4.1
ZUSAMMENFASSUNG UND VERGLEICH DER ERGEBNISSE DER
VERSCHIEDENEN UNTERSUCHTEN ZELLFUNKTIONEN 41
4.2
METHODISCHE ASPEKTE 42
4.3 DNA-SYNTHESERATE UND ZELLPROLIFERATION 44
4.4 DER DIFFERENZIERUNGSMARICER ALKALISCHE PHOSPHATASE IM
VERGLEICH MIT DER DNA-SYNTHESERATE 45
4.5
HOHE ZELLPROLIFERATION - NIEDRIGE PROTEINBIOSYNTHESE: EIN NICHT
ERKLAERLICHER GEGENSATZ ? 46
4.6 DIE VDR-REGULATION ALS MOEGLICHE ERKLAERUNG 46
4.7
SCHLUSSFOLGERUNGEN 47
5-0 ZUSAMMENFASSUNG
48
6.0 LITERATURVERZEICHNIS
50
LEBENSLAUF
55
DANKSAOUNA
56
2 |
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