"Immunoprints": Polymorphismen immunrelevanter Gene zur Identifizierung genetischer Prädispositionen bei der Rheumatoiden Arthritis
Gespeichert in:
1. Verfasser: | |
---|---|
Format: | Buch |
Sprache: | German |
Veröffentlicht: |
1994
|
Schlagworte: | |
Online-Zugang: | Inhaltsverzeichnis |
Beschreibung: | München, Univ., Diss., 1995 |
Beschreibung: | 152, [24] S. Ill., graph. Darst. |
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I
NHALTSVERZEICHNIS
I
A
BKUERZUNGSVERZEICHNIS
1
E
INLEITUNG
.
1
1.1
DAS
INUNUNSYSTEM DES
MENSCHEN
.
1
1
1.1
MHC-MOLEKUELE
.
3
1.1.1.1
MHC-MOLEKUELE
UND
KRANKHEITSASSOZIATIONEN
.
4
1.1.2
T-LYMPHOZYTEN
UND
IHRE
REZEPTOREN
.
5
1.1.2.1
DER
TZR
UND
AUTOIMMUNITAET
.
7
1.1.3
ZELLADHAESIONSMOLEKUELE
.
9
1.1.4
LYMPHOKINE
UND
IHRE
ROLLE
IN
DER
AUTOIMMUNITAET
.
10
11.5
RHEUMATOIDE
ARTHRITIS
.
11
1.2
MIKROSATELLITEN
.
12
1.3
ZIELSETZUNG
DER
ARBEIT
.
13
2
M
ATERIAL
UND
M
ETHODEN
.
15
2
1
MATERIAL
.
15
2.1.1
UNTERSUCHUNGSKLIENTEL
.
15
2
1.2
BIOLOGISCHE
SYSTEME
.
16
2.1.3
OLIGONUKLEOTIDE
UND
PCR-BEDINGUNGEN
.
17
2
1.4
LOESUNGEN
UND
PUFFER
.
22
2
2
METHODEN
.
27
2
2.1
ISOLIERUNG
VON
PERIPHEREN
BLUTLYMPHOZYTEN
AUS
HUMANEM
VOLLBLUT
.
27
2.2.2
KRYOKONSERVIERUNG
UND
"AUFTAUEN"
VON
ZELLEN
.
27
2.2.3
ZELLKULTUREN
.
27
2
2.31
ANZUCHT
VON
VERSCHIEDENEN
ZELLINIEN
.
27
2
2.3.2
STIMULIERUNG
VON
T-ZELLEN
ZUR
RNA-ISOLIERUNG
.
28
2.2.4
ISOLIERUNG
VON
KEMPROTEINEN
.
28
2.2.4
1
BESTIMMUNG
DER
PROTEINKONZENTRATION
.
29
2.2.5
ISOLIERUNG
VON
BAKTERIELL
EXPRIMIERTEM
GLUTATHION
S-TRANSFERASE-ELP-
FUSIONSPROTEIN
.
29
2.2.6
ISOLIERUNG
VON
NUKLEINSAEUREN
.
30
2
2.6.1
DNA-ISOLIERUNG
.
30
2.2.6.1
1
DNA-ISOLIERUNG
AUS
EDTA-BLUT
.
30
2
2.6.12
DNA-ISOLIERUNG
AUS
ZELLINIEN
.
31
2
2
6.1
3
ISOLIERUNG
VON
PLASMID-DNA
.
31
2.2.6.1
4
ISOLATION
VON
DNA-FRAGMENTEN
AUS
AGAROSEGELEN
MITTELS
GELELUTIONSKIT
.
32
2.2.6.1.5
ISOLATION
VON
DNA-FRAGMENTEN
AUS
AGAROSEGELEN
MITTELS
DEAE-IONENAUSTAUSCHPAPIER
.
32
2.2
6
1
6
AUFREINIGUNG
VON
OLIGONUKLEOTIDEN
ZUR
GELRETENTIONSANALYSE
.
32
2
2.6
1
7
AUFREINIGUNG
VON
MONIERTEN
FRAGMENTEN
FUER
DIE
GELRETENTIONSANALYSE
.
33
2
2
6
1
8
RNA-ISOLIERUNG
NACH
DER
CSCL
METHODE
.
33
2.2.7
KONZENTRATIONSBESTIMMUNG
VON
NUKLEINSAEUREN
.
34
2.2.8
CDNA
SYNTHESE
ZUM
NACHWEIS
EXPRIMIERTER
TUEAEBFOE-ELEMENTE
.
35
2.2
9
AMPLIFIKATION
VON
DNA
ABSCHNITTEN
MIT
DER
POLYMERASEKETTENREAKTION
.
35
2.2.10
GELELEKTROPHORESEN
.
36
2.2.11
TRANSFER
VON
NUKLEINSAEUREN
AUF
MEMBRANEN
.
39
2.2.12
SPALTUNG
VON
DNA
MIT
RESTRIKTIONSENZYMEN
.
40
2.2.13
KLONIERUNG
VON
PCR
PRODUKTEN
.
40
2.2.13.1
HERSTELLUNG
EINES
KLONIERUNGS-VEKTORS
MIT
"GLATTEN"
ENDEN
.
40
2
2.13.2
VORBEREITEN
VON
PCR-FRAGMENTEN
ZUR
KLONIERUNG
MIT
"GLATTEN"
ENDEN
.
41
2.2.13
3
LIGATION
.
41
2.2.13.4
TRANSFORMATION
VON
PLASMID
DNA
.
42
2
2.14
RADIOAKTIVE
MARKIERUNG
VON
OLIGONUKLEOTIDEN
.
43
2.2.15 HYBRIDISIERUNG
MIT
OLIGONUKLEOTIDEN
.
44
2
2
15
1
BEHANDLUNG
VON
AGAROSEGELEN
FUER
DIE
IN-GEL-HYBRIDISIERUNGEN
.
44
2.2.15.2
HYBRIDISIERUNGEN
.
44
2.2.16
DNA-SEQUENZIERUNG
.
45
2.2.17
MIKROSATELLITENANALYSE
.
47
2
2
18
GELRETENTIONSANALYSE
.
49
2.2.18.1
HERSTELLUNG
VON
DOPPELSTRAENGIGEN
OLIGONUKLEOTIDEN
.
49
2.2
18.2
RADIOAKTIVE
MARKIERUNG
DER
3
OMER
OLIGONUKLEOTIDE
.
49
2
2.18.3
RADIOAKTIVE
MARKIERUNG
VON
DNA-FRAGMENTEN
MITTELS
KLENOW-DNA-POLYMERASE
REAKTION
.
49
2
2
18.4
PROTEINZDNA-BINDUNG
.
50
2
2
19
DOKUMENTATION
DER
ERGEBNISSE
.
52
2
2
20
GENTECHNOLOGISCHE
SICHERHEITSBESTIMMUNGEN
.
52
2.2
21
COMPUTERPROGRAMME
UND
STATISTISCHE
ANALYSEN
.
52
3
E
RGEBNISSE
.
54
3.1
POLYMORPHISMEN
IN
IMMUNRELEVANTEN
GENEN
.
54
3
1
2
POLYMORPHISMEN
IN
DER
TC/?BK6-FAMILIE
.
54
3
1.2.1
DARSTELLUNG
VON
7UAEZ?
KD-LAENGENVARIATIONEN
UND
VERSCHIEDENEN
GENELEMENTEN
IM
ELEKTROBLOTVERFAHREN
.
54
3.1.2.2
SEQUENZIERUNG
DER
NEUEN
ZCAESS
KD-ELEMENTE
.
56
3
1.2.3
NACHWEIS
DER
EXPRESSION
DER
NEUEN
TCRBV6-GENE
.
63
3.1.2.4
LAENGENPOLYMORPHISMEN
DER
TCRB
KD-ELEMENTE
.
63
3
1
2.4
1
CHARAKTERISIERUNG
DER
LAENGENVARIANTEN
DER
GENELEMENTE
TCRBV6S1,
TCRBV6S3
UND
TCRBV6S7
.
63
3
1.2.4.2
DARSTELLUNG
VON
LAENGENPOLYMORPHISMEN
DES
TCRBV6S7SYSTEMS
MIT
FLUORESZENZ-MARKIERTEN
PRIMERN
.
65
3.1.2.5
KORRELATIONEN
ZWISCHEN
EXONISCHEN
POLYMORPHISMEN
UND
INTRONISCHEN
LANGENVARIANTEN
.
66
3.1.3
LAENGENPOLYMORPHISMUS
IN
DER
TOM/D-REGION
.
67
3.1.4
FORMALGENETISCHE
ANALYSE
DER
POLYMORPHEN
TZR-MIKROSATELLITENSYSTEME
.
.
69
3.1.4.1
GENOMISCHE
STABILITAET
.
69
3
1.4.2
ALLELFREQUENZEN
DER
7Z7?-MIKROSATELLITENLOCI
IN
VERSCHIEDENEN
EURASISCHEN
BEVOELKERUNGEN
(VERGLEICH
MIT
ANONYMEN
TETRANUKLEOTIDLOCI
AUF
CHROMOSOM
12
UND
EINEM
Y-SPEZIFISCHEN
MIKROSATELLITENMARKER)
.
70
3
1.5
LAENGENPOLYMORPHISMUS
IM
CD3D-GEN
.
75
3.16
LAENGENPOLYMORPHISMEN
IN
INTERLEUKIN-
UND
INTERLEUKINREZEPTOR-GENEN
.
77
3
1.6.1
INTERLEUKIN-1A
.
77
3.1.6.2
INTERLEUKIN-2
.
78
3.1.6
3
INTERLEUKIN-5
REZEPTOR
A
.
78
3.1
7
LAENGENPOLYMORPHISMUS
EINES
MIKROSATELLITEN
(TNFD)
BENACHBART
ZUM
TNFFY
GEN
.
79
3.1.8
LAENGENPOLYMORPHISMUS
IM
CD40L-LOCUS
.
82
3
1.9
ZUSAMMENFASSUNG
DER
FUER
DAS
"IMMUNOPRINTING"
ETABLIERTEN
MIKRO
SATELLITENSYSTEME
.
83
3.2
ASSOZIATIONSANALYSE
ZWISCHEN
MIKROSATELLITENMARKEM
UND
RA
.
84
3
2
1
ETABLIERUNG
UND
CHARAKTERISIERUNG
DES
UNTERSUCHUNGSKOLLEKTIVS
.
84
3
2
2
ASSOZIATIONEN
VON
MIKROSATELLITEN
ZU
RA
.
85
3
2.3
UNTERSUCHUNG
DER
GENETISCHEN
BZW.
FUNKTIONELLEN
URSACHEN
DER
MIKROSATELLITEN
ASSOZIATIONEN
VON
TCRBV6S7
UND
TCRA/D
.
88
3
2.3
1
POLYMORPHISMUS
IM
BENACHBARTEN
TCRBV13S2-L
OCUES
.
88
3
2
3
2
ANALYSE
DES
ZUM
TOMZD-MIKROSATELLITEN
BENACHBARTEN
TRANSCRIPTION
ENHANCING
ELEMENT
A
(TEA)
.
93
3.2.32.1
SEQUENZ
UND
STRUKTURVERGIEICH
VON
POLYMORPHISMEN
IN
DER
TEA
PROMOTORREGION
.
95
3
2.3
2
2
PROTEINBINDUNGSSTUDIEN
MITTELS
GELRETENTIONSANALYSEN
.
97
3
2.4
BONFERONI-KORREKTUR
DER
BERECHNETEN
CHI
2
-SIGNIFIKANZEN
.
107
4
D
ISKUSSION
.
108
4.1
DIE
TCRB
KD-FAMILIE
.
108
4.1.1
KLONIERUNG
NEUER
TCRRKD-SUBFAMILIENMITGLIEDER
.
108
4
1.2
EXPRESSION
DER
GENOMISCHEN
7UERB
KD-ELEMENTE
.
108
4.12
1
PRAEFERENZ
VON
7UERAE72-ELEMENTEN
.
109
4.1.3
WIEVIELE
TCRB
KD-SUBFAMILIENMITGLIEDER
SIND
NACHWEISBAR?
.
110
4
1.4
PSEUDOGENE
UND
NULLALLELE
IN
DER
TCRBV6-FAMUEIE
.
111
4.2
AUSWAHLKRITERIEN
FUER
DIE
727?-LOCI,
DIE
IM
IMMUNOPRINTVERFAHREN
TYPISIERT
WERDEN
SOLLTEN
.
113
4.2
1
ELEKTROBLOT
VS.
RADIOAKTIVE
PCR
.
113
4.2.2
AUSWAHLKRITERIEN
.
113
4.3
CHARAKTERISIERUNG
DER
TZR
-MIKROSATELLITENSYSTEME
.
114
4.3.1
REKOMBINATIONSEREIGNISSE
IN
DER
727?-REGION
.
114
4.3.2
VARIATION
DER
ZZR-MIKROSATELLITEN
ZWISCHEN
POPULATIONEN
.
115
4
4
BETEILIGUNG
VON
TZR-GENELEMENTEN
AN
DER
RA
.
117
4
4.1
ASSOZIATIONEN
DER
MIKROSATELLITEN
IN
DER
TZR-REGION
UND
IM
CD3D-LOCUS
.
119
4.4.1
1
TCRBV6SJ-LOCUS
.
119
4
4.1.2
TCRBV6S7-YOAXS
.
120
4.4.1.3
TCTM/D-MIKROSATELLIT
.
121
4.4.1
4
7E4-POLYMORPHISMEN
UND
PROTEINBINDUNG
.
122
4.4.1.5
7E4-POLYMORPHISMEN
UND
RA
.
123
4.5
ETABLIERUNG
VON
MIKROSATELLITEN
MULTIPLEX-PCR
SYSTEMEN
FUER
ZYTOKINGENE
UND
CD40L
.
125
4
5.1
POLYMORPHIE
DER
MIKROSATELLITEN-SYSTEME
UND
HINWEIS
AUF
FUNKTIONELLE
KORRELATIONEN
.
126
4
5.2 ZYTOKINE,
CD40L
UND
IHRE
ASSOZIATION
ZU
RA
.
126
4
5
2.1
WELCHEN
EINFLUSS
HABEN
TNF
ODER
TNFSS
AUF
DEN
VERLAUF
DER
RA?
.
126
4.5
2
2
CD40L,
EIN
WEITERER
RA
ASSOZIIERTER
MARKER
IN
DR47DR7
'
-INDIVIDUEN
.
127
4.6
BEURTEILUNG
DES
IMMUNOPRINTVERFAHRENS
ZUR
ERFASSUNG
VON
GENETISCHEN
PRAEDISPOSITIONEN
IN
AUTOIMMUNERKRANKUNGEN
.
128
4.7
WEITERE
ANWENDUNGEN
DER
HIER
ETABLIERTEN
MIKROSATELLITENMARKER
.
128
4
8
AUSBLICK
.
128
5
Z
USAMMENFASSUNG
.
130
6
L
ITERATURVERZEICHNIS
.
132
A
NHANG
(I-XVI)
152 |
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author | Gomolka, Maria Dorothee |
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