Struktur und Biosynthese von Neuropeptiden aus Hydro- und Scyphozoen:
Gespeichert in:
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| Format: | Abschlussarbeit Buch |
| Sprache: | German |
| Veröffentlicht: |
1995
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INHALTSVERZEICHNIS
SEITE
ABKUERZUNGSVERZEICHNIS
------------------------------------------------------
I
ZUSAMMENFASSUNG
------------------------------------------------------------
1
1.
EINLEITUNG
1.1.
SYNAPTISCHE
REIZLEITUNG
-------------------------------------------------------
4
1.2.
BIOSYNTHESE
VON
NEUROPEPTIDEN
---------------------------------------------
6
1.3.1.
SYSTEMATIK
DER
COELENTERATEN
------------------------------------------------
9
1.3.2.
DAS
NERVENSYSTEM
DER
COELENTERATEN
------------------------------------
9
1.4.
NEUROPEPTIDE
IN
COELENTERATEN
-----------------------------------------------
11
1.5.
ZIELSETZUNG
--------------------------------------------------------------------------------
13
2.
MATERIAL
UND
METHODEN
2.1.
CHEMIKALIEN,
ENZYME,
OLIGONUKLEOTIDE
UND
PEPTIDE
-------------------
14
2.2.
VERSUCHSTIERE
---------------------------------------------------------------------
14
2.3.1.
BAKTERIENSTAEMME
UND
VEKTOREN
-----------------------------------------------------
15
2.3.2.
NAEHRMEDIEN
-------------------------------------------------------------------------------
15
2.4.
LOESUNGEN
----------------------------------------------------------------------------------
16
2.5.
HERSTELLUNG
VON
ANTISEREN
-------------------------------------------------------------
19
2.5.1.
KOPPLUNG
DER
PEPTIDE
AN
RINDERTHYREOGLOBULIN
-------------------------
19
2.5.2.
GEWINNUNG
DER
ANTISEREN
-----------------------------------------------------
20
2.6.
RADIOIMMUNOASSAY
-------------------------------------------------------------
20
2.6.1.
RADIOAKTIVE
MARKIERUNG
EINES
TRACERS
--------------------------------------------
20
2.6.2.
DURCHFUEHRUNG
EINES
RADIOIMMUNOASSAYS
----------------------------------------
21
2.7.1.
HERSTELLUNG
EINES
ESSIGSAEUREEXTRAKTES
AUS
CYANEA
LAMARCKII
-------
22
2.7.2.
HERSTELLUNG
EINES
ESSIGSAEUREEXTRAKTES
AUS
HYDRA MAGNIPAPILLATA
-
22
2.8.
PEPTIDREINIGUNG
DURCH
HOCHLEISTUNGSFLUESSIGKEITSCHROMATOGRAPHIE
-
23
2.9.
PEPTIDCHEMIE
---------------------------------------------------------------------
24
2.9.1.
IDENTIFIKATION
DER
AMINOSAEUREZUSAMMENSETZUNG
EINES
PEPTIDS
-
24
2.9.2.
IDENTIFIZIERUNG
DER
N-TERMINALEN
AMINOSAEURE
------------------------------------
24
2.9.3.
ENTFERNUNG
EINES
N-TERMINALEN
PYROGLUTAMYLRESTES
-------------------
25
2.9.4.
IDENTIFIZIERUNG
DES
C-TERMINUS
----------------------------------------------
25
2.9.5.
PEPTIDSEQUENZIERUNG
-----------------------------------------------------------
25
2.10.
IMMUNCYTOCHEMIE
-----------------------------------------------------------------------
25
2.11.
ISOLIERUNG
VON
RNA
AUS
CYANEA
LAMARCKII
-------------------------------
26
2.12.
PRAEPARATION
VON
POLY(A)
+
RNA
------------------------------------------------------
26
2.13.
RNA
GELELEKTROPHORESE
---------------------------------------------------
-
27
2.14.
RADIOAKTIVE
MARKIERUNG
VON
DNA-FRAGMENTEN
--------------------------------
27
2.15.
HYBRIDISIERUNG
UND
AUTORADIOGRAPHIE
---------------------------------
27
2.16.
HERSTELLUNG
EINER
XGT
10
CDNA
BIBLIOTHEK
AUS
CYANEA
LAMARCKII
-
28
2.17.
ANALYSE
DER
X-KLONE
MIT
DER
PCR-METHODE
------------------------------
28
2.18.
AUSPLATTIEREN
DER
CDNA-BIBLIOTHEK,
HERSTELLUNG
VON
FILTERABZUEGEN
29
2.19.
RADIOAKTIVE
MARKIERUNG
VON
OLIGONUKLEOTIDEN
--------------------------
30
2.20.
HYBRIDISIERUNG
VON
NITROCELLULOSEFILTERN
----------------------------------
30
2.21.
ENTFERNUNG
DER
RADIOAKTIV
MARKIERTEN
PROBE
VON
DEN
NITROCELLULOSE
MEMBRANEN
-------------------------------------------------------------
31
2.22.
PRAEPARATION
VON
XGT
10
DNA
AUS
PLATTENLYSATEN
-----------------------
31
2.23.
RESTRIKTION
VON
DNA
------------------------------------------------------------
31
2.24.
LIGATION
EINES
DNA-FRAGMENTES
IN
EIN
PLASMID
--------------------------------
32
2.25.
HERSTELLUNG
KOMPETENTER
E.
COLI
FUER
DIE
PLASMID-TRANSFORMATION
-
32
2.26.
TRANSFORMATION
------------------------------------------------------------------
33
2.27.
MINIPRAEPARATION
VON
PLASMID-DNA
-----------------------------------------
33
2.28.
ISOLIERUNG
VON
PLASMID-DNA
UEBER
SAEULENCHROMATOGRAPHIE
---------
34
2.29.
HERSTELLUNG
VON
DELETIONSKLONEN
--------------------------------------------------
34
2.30.
SEQUENZANALYSE
----------------------------------------------------------------
37
2.31.
AUSWERTUNG
DER
DNA-SEQUENZEN
-------------------------------------------------
37
3.
ERGEBNISSE
3.1.
ENTWICKLUNG
VON
PHELACPEPTID-SPEZIFISCHEN
RADIOIMMUNOASSAYS
-
38
3.2.
SUCHE
NACH
PHENYLLACTYL-PEPTIDEN
-----------------------------------------------
45
3.3.
ISOLIERUNG
VON
RFAMID-PEPTIDEN
AUS
HYDRA
MAGNIPAPILLATA
---------
46
3.3.1.
VORBEREITUNG
DES
ESSIGSAEUREEXTRAKTES
FUER
DIE
HPLC
------------------------
46
3.3.2.1.
ISOLIERUNG
VON
HYDRA-RFAMID
I
----------------------------------------------------
47
3.3.2.2.
STRUKTURAUFKLAERUNG
VON
HYDRA-RFAMID
I
-----------------------------------------
49
3.3.3.1.
ISOLIERUNG
VON
HYDRA-RFAMID
II
----------------------------------------------------
51
3.3.3.2.
STRUKTURAUFKLAERUNG
VON
HYDRA-RFAMID
II
----------------------------------
52
3.3.4.1.
ISOLIERUNG
VON
HYDRA-RFAMID
III
--------------------------------------------
54
3.3.4.2.
STRUKTURAUFKLAERUNG
VON
HYDRA-RFAMID
III
---------------------------------------
57
3.3.5.1.
ISOLIERUNG
VON
HYDRA-RFAMID
IV
--------------------------------------------
58
3.3.5.2.
STRUKTURAUFKLAERUNG
VON
HYDRA-RFAMID
IV
--------------------------------
59
3.4.
ISOLIERUNG
RFAMID-IMMUNREAKTIVER
PEPTIDE
AUS
CYANEA
LAMARCKII
60
3.4.1.
VORBEREITUNG
DES
ESSIGSAEUREEXTRAKTES
FUER
DIE
HPLC
-----------------
60
3.4.2.1.
ISOLIERUNG
VON
CYANO-RFAMID
I
---------------------------------------------
62
3.4.2.2.
STRUKTURAUFKLAERUNG
VON
CYANO-RFAMID
I
----------------------------------
64
3.4.3.1.
ISOLIERUNG
VON
CYANO-RFAMID
II
--------------------------------------
-
-
65
3.4.3.2.
STRUKTURAUFKLAERUNG
VON
CYANO-RFAMID
II
--------------------------------
67
3.4.4.1.
ISOLIERUNG
VON
CYANO-RFAMID
III
------------------------------------------
68
3.4.4.2.
STRUKTURAUFKLAERUNG
VON
CYANO-RFAMID
III
-------------------------------
71
3.5.
ISOLIERUNG
VON
RFAMID-PEPTIDEN
AUS
CHRYSAORA
HYSOSCELLA
--------
72
3.6.
IMMUNHISTOLOGISCHE
UNTERSUCHUNG
DER
VERTEILUNG
ANTHO-RFAMID
AEHNLICHEN
MATERIALS
IN
SCYPHOMEDUSEN
-----------------------
74
3.6.1.
IMMUNHISTOLOGISCHE
FAERBUNGEN
AN
CHRYSAORA
HYSOSCELLA
---------
74
3.6.2.
IMMUNHISTOLOGISCHE
FAERBUNGEN
AN
CYANEA-SPEZIES
---------------
76
3.7.
KLONIERUNG
DES
CYANO-RFAMID
I
VORLAEUFERPROTEINS
AUS
CYANEA
LAMARCKII
----------------------------------------------------------------
77
3.7.1.
STRUKTUR
DES
CYANO-RFAMID
I
VORLAEUFERPROTEINS
-----------------------
81
3.7.2.
PROZESSIERUNGSSIGNALE
IM
CYANO-RFAMID
I
VORLAEUFERPROTEIN
------
83
3.7.3.
NORTHERN-BLOT
ANALYSE
---------------------------------------------------------
84
4.
DISKUSSION
4.1.
RFAMID-PEPTIDE
IN
COELENTERATEN
-----------------------------------------
87
4.2.
KLONIERUNG
DER
CDNA
DES
CYANO-RFAMID
I
VORLAEUFERPROTEINS
-----
92
4.3.
BIOSYNTHESE
DES
CYANO-RFAMID
I
-----------------------------------------
98
5.
LITERATURVERZEICHNIS
---------------------------------------------------------
106 |
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| topic_facet | Neuropeptide Scheibenquallen Hydrozoa Genexpression Hochschulschrift |
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