Struktur des Transkriptionsfaktors CTCBF:
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1996
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INHALTSVERZEICHNIS
ABKUERZUNGEN
SEITE
I.
ZUSAMMENFASSUNG
1
II.
EINLEITUNG
3
1
REGULATION
DER
TRANSKRIPTION
3
2
KOLLAGEN
TYP
IV
10
2
1
BASALMEMBRANEN
10
2
2
PROTEIN
UND
GENSTRUKTUR
DER
KOLLAGEN
TYP
IV
GENE
11
2.3
REGULATION
DER
COL4
GENE
14
3
DER
CTC-BMDEFAKTOR
16
3
1
DAS
KU-PROTEIN
16
HL
AUFGABENSTELLUNG
20
IV.
ERGEBNISSE
21
1.
CHARAKTERISIERUNG
DES
CTC-BINDEFAKTORS
(CTCBF)
21
1
1
EFFEKT
VON
TBP-ANTIKOERPER
AUF
DIE
BILDUNG
VON
CTCBF
23
1
2
UNTERSUCHUNG
DER
ANWESENHEIT
VON
TBP
IM
AUFGEREINIGTEM
CTCBF
24
2
REKOMBINANTE
EXPRESSION
DER
UNTEREINHEITEN
DES
CTCBF-KOMPLEXES
25
2.1
HERSTELLUNG
DER
CDNA
KLONE
VON
KU70,
KU80
UND
TBP
25
2
1
1
KLONIERUNG
DER
CDNA
VON
KU70
25
2.1.2
KLONIERUNG
DER
CDNA
VON
KU80
27
2.1.3
KLONIERUNG
DER
CDNA
VON
TBP
27
2
2
REKOMBINANTE
EXPRESSION
28
2.2
1
PROKARYONTISCHE
EXPRESSION
UND
REINIGUNG
VON
6XHIS-PROTEINEN
28
2
2.1
1
KLONIERUNG
VON
PQE70/KU70,
PQE70/KU80
UND
PQE70/TBP
28
2.2
1.2
EXPRESSION
VON
KU70-HIS,
KU80-HIS
UND
TBP-HIS
31
2
2
2
EXPRESSION
UND
REINIGUNG
VON
GLUTATHION-S-TRANSFERASE
(GST)-FUSIONSPROTEINEN
34
2
2
2
1
KLONIERUNG
VON
PGEX/KU70,
PGEX/KU80
UND
PGEX/TBP
34
2
2.2
2
EXPRESSION
VON
GST-KU70,
GST-KU80
UND
TBP
35
2.2
3
IN
VITRO
TRANSKRIPTION
UND
TRANSLATION
37
2.2.3
1
HERSTELLUNG
VON
RADIOAKTIV
MARKIERTEN
6XHIS-PROTEINEN
39
2
2
4
EXPRESSION
VON
KU70-HIS/KU80
IN
293EBNA-ZELLEN
40
2
2.4
1
KLONIERUNG
VON
PCEP/KU70-HIS
UND
PCEP-SH/KU80
42
2
2
4
2
TRANSFEKTION
VON
PCEP/KU70-HIS
UND
PCEP-SH/KU80
IN
293EBNA-ZELLEN
43
2
2
4
3
AUFREINIGUNG
VON
KU70-HIS/KU80
43
3.
IN
VITRO
REGENERIERUNG
DES
CTCBF-KOMPLEXES
45
3
1
UNTERSUCHUNG
DER
GST-FUSIONSPROTEINE
IM
GELSHIFT
45
3
2
UNTERSUCHUNG
DER
IN
VITRO
TRANSLATIERTEN
PROTEINE
IM
GELSHIFT
47
3.2.1
UNTERSUCHUNG
DER
DNA-BINDENDEN
EIGENSCHAFTEN
DER
IN
VITRO
TRANSLATIERTEN
UNTEREINHEITEN
48
3
2
2
HERSTELLUNG
DES
CTCBF-KOMPLEXES
AUS
IN
VITRO
TRANSLATIERTEN
KU70/KU80
UND
REKOMBMANTEN
TBP
49
3.3
UNTERSUCHUNG
VON
EUKARYONTISCH
HERGESTELLTEM
KU70-HIS/KU80
IM
GELSHIFT
51
3.3.1
UNTERSUCHUNG
DER
DNA-BINDUNGSEIGENSCHAFTEN
VON
KU70-HIS/KU80
52
3
3.2
HERSTELLUNG
DES
CTCBF-KOMPLEXES
AUS
KU70-HIS/KU80
UND
TBP
54
3
3.3
UNTERSUCHUNG
DER
SPEZIFITAET
DER
BINDUNG
AN
DIE
CTC-BOX
57
3
3.4
VERGLEICH
DER
DNA
BINDENDEN
EIGENSCHAFTEN
VON
KU70/KU80
UND
DEM
IN
VITRO
HERGESTELLTEN
CTCBF-KOMPLEXES
63
V.
DISKUSSION
66
1
CTCBF
IST
EM
SEQUENZSPEZIFISCHER
TRANSKRIPTIONSFAKTOR
66
2
KU
UND
TBP
SIND
POTENTIELLE
UNTEREINHEITEN
VON
CTCBF
67
3
REKOMBINANTE
EXPRESSION
POTENTIELLER
UNTEREINHEITEN
VON
CTCBF
70
4
DNA-BINDENDE
EIGENSCHAFTEN
DER
UNTEREINHEITEN
DES
KU-PROTEINS
73
5
DAS
KU-HETERODIMER
UND
TBP
SIND
INTEGRALE
BESTANDTEILE
VON
CTCBF
76
6
POTENTIELLE
FUNKTION
DES
CTCBF-KOMPLEXES
FUER
DIE
TRANSKRIPTION
DER
HUMANEN
COL4
GENE
78
VI.
MATERIAL
86
1
CHEMIKALIEN
86
2
ENZYME
86
3.
KITS
86
4.
RADIOISOTOPE
87
5.
BAKTERIENSTAEMME,
ZELLINIEN
UND
CDNA-BIBLIOTHEKEN
87
6.
DNA-VEKTOREN
87
7.
LAENGEN
UND
MOLEKULARGEWICHTSSTANDARDS
88
8.
MEDIEN
FUER
DIE
BAKTERIEN
UND
ZELLKULTUR
88
9.
LOESUNGEN
UND
PUFFER
89
10
ANTIKOERPER
89
11
OLIGONUKLEOTIDE
90
VII.
METHODEN
91
1
MOLEKULARBIOLOGISCHE
METHODEN
91
1
1
ALLGEMEINE
METHODEN
91
1.2
DNA-ISOLIERUNG
91
1.2.1
PLASMID-DNA
ISOLIERUNG
91
A)
ISOLATION
KLEINER
MENGEN
PLASMID-DNA
91
B)
ISOLATION
GROESSERER
MENGEN
PLASMID-DNA
91
1.2
2
AE.-DNA
ISOLIERUNG
92
1.3
ISOLATION
VON
GESAMT-RNA
AUS
ZELLINIEN
92
1.4
ERSTRANG
CDN
A
SYNTHESE
92
1
5
POLYMERASE-KETTEN-REAKTION
(PCR)
92
1
6
RESTRIKTIONSVERDAU
UND
SUBKLONIERUNG
93
1
6
1
SUBKLONIERUNG
VON
PCR-FRAGMENTEN
93
1
6.2
SUBKLONIERUNG
VON
AE.-DNA
UND
PLASMID-DNA
FRAGMENTEN
93
I
7
DNA-SEQUENZIERUNG
94
1
8
KOLONIERHYBRDISIERUNG
94
1
8
1
KOLOMETRANSFER
AUF
MEMBRANEN
94
1.8
2
RADIOAKTIVE
MARKIERUNG
VON
OLIGONUKLEOTIDEN
94
1
8.3
HYBRIDISIERUNG
DER
FILTER
MIT
DER
DNA-PROBE
95
2.
METHODEN
ZUR
ANALYSE
VON
PROTEIN/DNA
WECHSELWIRKUNGEN
95
2
1
PRAEPARATION
VON
KEMEXTRAKTEN
AUS
HELA-KEMEN
95
2.2
FRAGMENTISOLATION
96
2
3
RADIOAKTIVE
MARKIERUNG
DER
DNA-FRAGMENTE
96
2
4
GELRETARDATIONS-EXPENMENT
(GELSHIFT)
97
A)
CTCBF-GELSHIFT
97
B)
TBP-GELSHIFT
97
3.
PROTEMBIOCHEMISCHE
METHODEN
98
3
1
PROTEINKONZENTRATIONSBESTIMMUNG
98
3
2
SDS-POLYACRYLAMIDGELELEKTROPHORESE
(SDS-PAGE)
98
3
3
IMMUNO-BLOTTMG
99
3
4
HERSTELLUNG
AUF
AUFREINIGUNG
REKOMBINANTER
PROTEINE
99
3
4
1
EXPRESSION
UND
AUFREINIGUNG
VON
6XHIS-PROTEINEN
99
A)
BAKTERIELLE
EXPRESSION
99
B)
EUKARYONTISCHE
EXPRESSION
100
3.4.2
EXPRESSION
UND
AUFREINIGUNG
VON
GLUTATHION-S-TRANSFERASE-FUSIONSPROTEME
100
3.4
3
IN
VITRO
TRANSKRIPTION
UND
TRANSLATION
101
4
ZELLBIOLOGISCHE
METHODEN
101
4.1
TRANSFEKTION
EUKARYONTISCHER
ZELLEN
MIT
DNA
101
4.2
HERSTELLUNG
VON
KEMEXTRAKTEN
AUS
DEN
TRANSFIZIERTEN
ZELLEN
102
4
3
EINFRIEREN
VON
ZELLEN
102
VIII.
LITERATURVERZEICHNIS
103 |
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| spelling | Herzog, Christine Verfasser aut Struktur des Transkriptionsfaktors CTCBF von Christine Herzog 1996 [5], 113 S. Ill. txt rdacontent n rdamedia nc rdacarrier Erlangen-Nürnberg, Univ., Diss., 1996 Genregulation (DE-588)4122166-7 gnd rswk-swf Untereinheit (DE-588)4335882-2 gnd rswk-swf Transkriptionsfaktor (DE-588)4303350-7 gnd rswk-swf Kollagen (DE-588)4164652-6 gnd rswk-swf DNS-Bindungsproteine (DE-588)4150338-7 gnd rswk-swf Strukturaufklärung (DE-588)4183788-5 gnd rswk-swf Genexpression (DE-588)4020136-3 gnd rswk-swf (DE-588)4113937-9 Hochschulschrift gnd-content DNS-Bindungsproteine (DE-588)4150338-7 s Untereinheit (DE-588)4335882-2 s Genexpression (DE-588)4020136-3 s Kollagen (DE-588)4164652-6 s DE-604 Genregulation (DE-588)4122166-7 s Transkriptionsfaktor (DE-588)4303350-7 s Strukturaufklärung (DE-588)4183788-5 s DNB Datenaustausch application/pdf http://bvbr.bib-bvb.de:8991/F?func=service&doc_library=BVB01&local_base=BVB01&doc_number=007290680&sequence=000001&line_number=0001&func_code=DB_RECORDS&service_type=MEDIA Inhaltsverzeichnis |
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