Die Markierung des Insulinrezeptors mit verschiedenen photoreaktiven Insulinen:
Gespeichert in:
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| Format: | Buch |
| Sprache: | German |
| Veröffentlicht: |
Aachen
Shaker
1996
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| Ausgabe: | Als Ms. gedr. |
| Schriftenreihe: | Berichte aus der Chemie
|
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| Online-Zugang: | Inhaltsverzeichnis |
| Beschreibung: | Zugl.: Aachen, Techn. Hochsch., Diss., 1996 |
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VI
INHALTSVERZEICHNIS
ZUSAMMENFASSUNG
I
SUMMARY
III
ABKUERZUNGEN
V
INHALTSVERZEICHNIS
VI
I
EINLEITUNG
.
1
1.
DAS
HORMON
INSULIN
UND
SEIN
REZEPTOR
.
1
2.
DIE
PHOTOAFFINITAETSMARKIERUNG
.
8
II
PROBLEMSTELLUNG
.
12
M
ERGEBNISSE
.
14
1.
PHOTOCHEMISCH
REAKTIVE
INSULINE
.
14
1.1
PHOTOAKTIVIERBARE
GRUPPEN
IN
DER
PHOTOAFFINITAETSMARKIERUNG
.
14
1.2
SEMISYNTHESE
VON
INSULINDERIVATEN
.
17
1.2.1
ENZYMATISCHE
SEMISYNTHESE
.
17
1.2.1
CHEMISCHE
SEMISYNTHESE
.
21
1.3
CHARAKTERISIERUNG
DER
PHOTOINSULINE
.
22
1.3.1
CHEMISCHE
CHARAKTERISIERUNG
.
22
1.3.2
PHOTOLYSESTUDIEN
.
25
1.3.3
BIOLOGISCHE
EIGENSCHAFTEN
DER
PRAEPARATE
.
26
2.
PHOTOAFFINITAETSMARKIERUNG
MIT
DEN
PHOTOCHEMISCH
REAKTIVEN
INSULINANALOGA
.
28
2.1
MARKIERUNG
MIT
125
IOD
.
28
2.2.
PHOTOAFFINITAETSMARKIERUNG
DER
INSULINREZEPTOR-EKTODOMAENE
.
34
2.2.1
BESTIMMUNG
DER
KUPPLUNGSAUSBEUTE
.
34
2.2.2
BESTIMMUNG
DES
MOLEKULARGEWICHTS
.
36
2.2.3
PHOTOAFFINITAETSMARKIERUNG
VERSCHIEDENER
INSULINANALOGA
.
40
3.
DER
INSULINBINDENDE
BEREICH
DES
INSULINREZEPTORS
.
46
3.1
PROTEOLYTISCHE
SPALTUNG
DES
INSULIN-EKTODOMAENENKOMPLEXES
.
46
3.2
ISOLIERUNG
DER
BINDUNGSFTAGMENTE
.
50
3.3
SEQUENZIERUNG
DER
BINDUNGSFTAGMENTE
.
52
IV
DISKUSSION
.
55
1.
PHOTOCHEMISCH
REAKTIVE
INSULINE
.
55
2.
PHOTOAFFINITAETSMARKIERUNGEN
MIT
DEN
PHOTOCHEMISCH
REAKTIVEN
INSULINANALOGA
.
57
3.
DER
INSULINBINDENDE
BEREICH
DES
INSULINREZEPTORS
.
63
VII
V
EXPERIMENTELLER
TEIL
.
70
1.
CHEMIKALIEN
.
70
2.
GERAETE
UND
METHODEN
.
70
3.
SYNTHESEN
.
72
3.1
DARSTELLUNG
DER
INSULINANALOGA
.
72
3.2
SYNTHESE
DER
PHOTOGRUPPEN
.
73
3.3
SYNTHESE
DER
PHOTOINSULINE
.
78
4.
METHODEN
.
82
4.1
MARKIERUNG
MIT
125
IOD
.
82
4.1.1
RADIOIODIERUNG
NACH
DER
LACTOPEROXIDASE/H
2
O
2
-METHODE
.
82
4.1.2
RADIOIODIERUNG
MIT
CHLORAMIN
T
.
82
4.1.3
BESTIMMUNG
DER
LODPOSITION
.
84
4.2
BIOLOGISCHE
TESTS
.
86
4.2.1
AKTIVITAETSBESTIMMUNG
.
86
4.2.2
BINDUNGSAFFINITAETSTESTS
AN
IM-9-LYMPHOCYTEN
.
87
4.3
PHOTOAFFINITAETSMARKIERUNG
.
88
4.3.1
ANALYTISCHE
PHOTOAFFINITAETSMARKIERUNG
.
88
4.3.2
PRAEPARATIVE
PHOTOAFFINITAETSMARKIERUNG
.
89
4.4
QUALITATIVE
BESTIMMUNG
DER
KOVALENTEN
BINDUNG
.
89
4.5
DETEKTION
DER
PROTEINE
UND
TROCKNEN
DER
GELE
.
92
4.6
QUANTITATIVE
BESTIMMUNG
DER
KOVALENTEN
BINDUNG
.
94
4.7
PROTEINGEHALTSBESTIMMUNG
.
95
4.8
REDUKTION
UND
CARBOXYMETHYLIERUNG
.
95
4
9
PROTEOLYTISCHER
ABBAU
DES
INSULIN-EKTODOMAENENKOMPLEXES
.
95
4.10
SEMI-DRY-BLOTTING
VON
PROTEINEN
.
97
VI
LITERATUR
.
98
VD
ANHANG
.
113 |
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