Immunologische und funktionelle Charakterisierung der Wachstumshormon-Bindungsproteine:
Gespeichert in:
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Veröffentlicht: |
1996
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INHALTSVERZEICHNIS SEITE
1 EINLEITUNG 1
1.1 WACHSTUMSHORMON 1
1.1.1 STRUKTUR DES WACHSTUMSHORMONS 1
1.1.2 FUNKTION DES WACHSTUMSHORMONS/ 1
SOMATOMEDINHYPOTHESE
1.1.3 REGULATION DER WACHSTUMSHORMONFREISETZUNG 3
1.2 WACHSTUMSHORMONREZEPTOR UND HOCHAFFINES 4
WACHSTUMSHORMON-BINDUNGSPROTEIN
1.2.1 STRUKTUR DES WACHSTUMSHORMONREZEPTORS 4
1.2.2 STRUKTUR DES HOCHAFFINEN 5
WACHSTUMSHORMON-BINDUNGSPROTEINS
1.2.3 FUNKTION DES 7
HOCHAFFINEN WACHSTUMSHORMON-BINDUNGSPROTEINS
1.2.4 REGULATION DER FREISETZUNG DES HOCHAFFINEN 8
WACHSTUMSHORMON-BINDUNGSPROTEINS UND
KLINISCHE ASPEKTE
1.3 NIEDRIGAFFINES WACHSTUMSHORMON-BINDUNGSPROTEIN 10
1.3.1 STRUKTUR DES NIEDRIGAFFINEN 10
WACHSTUMSHORMON-BINDUNGSPROTEINS
1.3.2 KONZENTRATION DES NIEDRIGAFFINEN 10
WACHSTUMSHORMON-BINDUNGSPROTEINS IM SERUM
1.4 1 A2-MAKROGLOBULIN 11
1.4.1 STRUKTUR DES A
2-MAKROGLOBULINS 11
1.4.1.1 BAIT-REGION 11
1.4.1.2 THIOL-ESTER 11
1.4.2 FUNKTION DES A
2-MAKROGLOBULINS 12
1.4.3 KONZENTRATION VON OT
2-MAKROGLOBULIN IM SERUM 13
1.5 ZIELSTELLUNG 14
2 MATERIAL UND METHODEN 15
2.1 LABORCHEMIKALIEN 15
2.2 METHODEN 17
2.2.1 WESTERN-IMMUNOBLOT 17
2.2.1.1 NATRIUMDODECYLSULFAT-POLYACRYLAMIDGELELEKTROPHORESE 18
2.2.1.2 WESTERN-BLOTTING 19
BIBLIOGRAFISCHE INFORMATIONEN
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2.2.1.3 IMMUNOPRINT 20
2.2.2 GELAUSSCHLUSSCHROMATOGRAPHIE 22
2.2.3 PROTEINFAERBUNGEN 22
2.2.3.1 COOMASSIEBLAU-FAERBUNG 22
2.2.3.2 PONCEAU S-FAERBUNG 23
2.2.3.3 INDIAN INK-FAERBUNG 23
2.2.4 RADIOAKTIVE MARKIERUNG VON WACHSTUMSHORMON 24
2.2.5 WACHSTUMSHORMONBINDUNGSTESTS 24
2.2.5.1 CROSS-IINKING-STUDIEN 24
2.2.5.2 VERTEILUNG DER WACHSTUMSHORMON-BINDENDEN AKTIVITAET IM 25
SERUM
2.2.6 HERSTELLUNG SPEZIFISCHER ANTISEREN 26
2.2.7 ANREICHERUNG DER WACHSTUMSHORMON-BINDUNGSPROTEINE 27
2.2.7.1 ANREICHERUNG DES HOCHAFFINEN WACHSTUMSHORMON- 27
BINDUNGSPROTEINS AUS HUMANPLASMA
2.27.2 ANREICHERUNG DES NIEDRIGAFFINEN WACHSTUMSHORMON- 28
BINDUNGSPROTEINS AUS HUMANPLASMA
3 ERGEBNISSE 29
3.1 VERTEILUNG DER WACHSTUMSHORMON-BINDUNGSAKTIVITAET 29
IM SERUM
3.2 UNTERSUCHUNGEN DES HOCHAFFINEN WACHSTUMSHORMON- 31
BINDUNGSPROTEINS
3.2.1 'OPTIMIERUNG DES WESTERN-IMMUNOBLOTS 31
3.2.2 CHARAKTERISIERUNG DER ANREICHERUNG DES HOCHAFFINEN 32
WACHSTUMSHORMON-BINDUNGSPROTEINS
3.2.3 CHARAKTERISIERUNG DES ANTI-WACHSTU MSHORMON-
BINDUNGSPROTEIN-ANTISERUMS 34
3.2.3.1 UNTERSUCHUNG VON HUMANEM SERUM 34
AUF WACHSTUMSHORMON-BINDUNGSPROTEIN-AEHNLICHE
IMMUNREAKTIVITAET
3.2.3.2 UNTERSUCHUNGEN ZUR SPEZIFITAET DES ANTI-WACHSTUMSHORMON- 35
BINDUNGSPROTEIN-ANTISERUMS
3.2.4 VERGLEICH DER ANTISEREN 40
3.3 CHARAKTERISIERUNG DER ANREICHERUNG DES NIEDRIGAFFINEN 41
WACHSTUMSHORMON-BINDUNGSPROTEINS 41
3.3.1 FAERBUNG DER PROTEINBESTANDTEILE DER ANREICHERUNG DES
NIEDRIGAFFINEN WACHSTUMSHORMON-BINDUNGSPROTEINS
3.3.2 UNTERSUCHUNG DER ANREICHERUNG DES NIEDRIGAFFINEN 41
WACHSTUMSHORMON-BINDUNGSPROTEINS
AUF A2-MAKROGLOBULIN-GEHALT
3.3.3 UNTERSUCHUNG DER ANREICHERUNG DES NIEDRIGAFFINEN
WACHSTUMSHORMON-BINDUNGSPROTEINS AUF WACHSTUMSHORMON
BINDENDE AKTIVITAET 42
3.4 UNTERSUCHUNG DER WACHSTUMSHORMON-BINDENDEN 42
AKTIVITAET VON A2-MAKROGLOBULIN
3.4.1 VERHALTEN VON A2-MAKROGLOBULIN WAEHREND DER 42
SDS-PAGE UNTER REDUZIERENDEN BEDINGUNGEN
3.4.2 CROSS-IINKING STUDIEN ZUM NACHWEIS DER 43
WACHSTUMSHORMONBINDUNG VON CC
2-MAKROGLOBULIN
4 DISKUSSION 46
4.1 IDENTIFIKATION VON ZWEI ISOFORMEN DES HOCHAFFINEN 46
WACHSTUMSHORMON-BINDUNGSPROTEINS
4.2 VERGLEICH DER ANTISEREN 49
4.3 IDENTIFIKATION VON OT
2-MAKROGLOBULIN ALS NIEDRIG-AFFINES 51
WACHSTUMSHORMON-BINDUNGSPROTEIN
4.4 GH-BINDUNG AN A2-MAKROGLOBULIN 53
5 ZUSAMMENFASSUNG 55
6 LITERATURVERZEICHNIS 57 |
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