Beeinflussung der Insulin-mRNA durch Hormone und Tyrosinkinaseinhibitoren:
Gespeichert in:
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| Format: | Buch |
| Sprache: | German |
| Veröffentlicht: |
1996
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| Online-Zugang: | Inhaltsverzeichnis |
| Beschreibung: | Münster, Univ., Diss., 1996 |
| Beschreibung: | III, 116 Bl. graph. Darst. |
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Datensatz im Suchindex
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INHALTSVERZEICHNIS
I
INHALTSVERZEICHNIS
1 EINLEITUNG
1.1 DAS INSULINGEN: STRUKTUR UND KONTROLLE DER EXPRESSION 1
1.1.1 EINLEITUNG 1
1.1.2 DIE STRUKTUR DES INSULINGENS 2
1.1.3 DER PROMOTOR DES RATTEN-INSULINGENS I 4
1.1.4 DIE KONTROLLE DER INSULINGENEXPRESSION DURCH EXTRAZELLULAERE
STIMULI 12
1.1.4.1 GLUCOSE UND AMINOSAEUREN 12
1.1.4.2 NEUROTRANSMITTER 15
1.1.5 DIE GENEXPRESSION WIRD UEBER UNTERSCHIEDLICHE
SIGNALTRANSDUKTIONSWEGE KONTROLLIERT 17
1.1.5.1 EINLEITUNG -. 17
1.1.5.2 GLUCOSEMETABOLISMUS 17
1.1.5.3 CALCIUM 19
1.1.5.4 DAS GLUCOSESENSITIVE ELEMENT 20
1.1.5.5 CAMP UND DAS CRE 21
1.1.5.6 PKC 24
1.1.6 GANZTIER, ZELLVERBAND UND ZELLKULTUR 25
1.1.7 ZUSAMMENFASSUNG 26
1.2 DAS NEGATIVE FEEDBACK VON INSULIN AUF SEINE SEKRETION 28
1.3 TYROSINKINASEN 30
1.4 ZIELSETZUNG DER ARBEIT 35
2 MATERIAL
2.1 ZELLKULTUR 36
2.2 GERAETE UND PROGRAMME 36
2.3 CHEMIKALIEN, KITS, ENZYME 36
2.4 LOESUNGEN 38
2.4.1 LOESUNGEN FUER DIE ZELLKULTUR 38
2.4.2 LOESUNGEN FUER DIE TRANSFORMATION UND ANZUCHT VON BAKTERIEN 38
2.4.3 LOESUNGEN FUER DIE ISOLIERUNG UND AUFREINIGUNG VON PLASMIDEN 38
2.4.4 LOESUNGEN FUER DIE RNA-ISOLIERUNG 39
2.4.5 LOESUNGEN FUER DIE GELELEKTROPHORESE 39
2.4.6 HYBRIDISIERUNGSLOESUNGEN 39
2.4.7 LOESUNGEN FUER DIE CHEMILUMINESZENZREAKTION 40
2.4.8 STAMMLOESUNGEN FUER DIE INKUBATIONEN 40
2.4.9 LOESUNGEN FUER DIE INSULINSEKRETIONSVERSUCHE 40
BIBLIOGRAFISCHE INFORMATIONEN
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INHALTSVERZEICHNIS
3 METHODEN
3.1 EINLEITUNG 41
3.2 BESCHREIBUNG DER PLASMIDE 42
3.3 LIGATION DES PTRI-RNA-28S 42
3.4 HERSTELLUNG UND TRANSFEKTION KOMPETENTER E. COLI 43
3.5 SELEKTION UND ANZUCHT DER TRANSFERIERTEN BAKTERIEN 44
3.6 ANZUCHT VON LOW COPY PLASMIDEN 44
3.7 ISOLIERUNG DER PLASMIDE 45
3.8 HERSTELLUNG DIG-MARKIERTER SONDEN 46
3.8.1 RNA-SONDEN: IN VITRO TRANSKRIPTION 46
3.8.2 DNA-SONDEN: RANDOM PRIMING 48
3.9 ZELLKULTUR 50
3.10 NORTHERN-BLOT ~ 50
3.10.1 ISOLIERUNG VON RNA AUS INS-1-ZELLEN 50
3.10.2 GELELEKTROPHORESE 52
3.10.3 BLOTTING 52
3.10.4 HYBRIDISIEREN 53
3.10.5 CHEMILUMINESZENZDETEKTION 55
3.10.6 LASERDENSITOMTRIE 56
3.11 VERSUCHE ZUR BEEINFLUSSUNG DER INSULIN-MRNA 57
3.12 DIE WAHL DES INTERNEN STANDARDS 59
3.13 VERSUCHE ZUR INSULINSEKRETION 60
3.14 UEBERPRUEFUNG DER STABILITAET VON GENISTIN BEI DER INKUBATION DER
INS-1-ZELLEN 60
3.15 STATISTIK 61
4 ERGEBNISSE
4.1 DER EINFLUSS VON GIP UND GRP AUF DIE INSULIN-MRNA 62
4.2 TYROSINKINASEN UND DIE REGULATION DER INSULINGENEXPRESSION 65
4.3 DER EINFLUSS VON INSULIN AUF DIE INSULIN-MRNA 71
4.4 DER EINFLUSS EINER GENISTEININKUBATION AUF DIE STABILITAET DER
INSULIN-MRNA 75
INHALTSVERZEICHNIS
5 DISKUSSION
5.1 DIE ZEITABHAENGIGE ERHOEHUNG DES INSULIN-MRNA-GEHALTES IN INS-1-
ZELLEN DURCH GIP UND GRP 76
5.2 DIE BETEILIGUNG VON TYROSINKINASEN BEI DER REGULATION DER INSULIN-
MRNA 81
5.3 DIE ROLLE VON EXOGENEM INSULIN BEI DER REGULATION DER
INSULIN-MRNA 86
5.4 GENISTEIN HAT KEINEN EINFLUSS AUF DIE STABILITAET DER INSULIN-MRNA 89
6 ZUSAMMENFASSUNG 91
7 LITERATURVERZEICHNIS 92
8 ANHANG 109 |
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