Untersuchungen zur Peptidpräsentation gewebsspezifischer HLA-Moleküle:
Gespeichert in:
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| Format: | Buch |
| Sprache: | German |
| Veröffentlicht: |
1996
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INHALTSVERZEICHNIS
1
ABKUERZUNGEN
.
7
2
EINLEITUNG
.
9
2.1
PEPTIDPRAESENTATION
DURCH
MHC-KLASSE-I-MOLEKULE
.
9
2.1
1
MHC-I-GENE
.
10
2
12
MHC-I-MOLEKUELE
.
13
2.13
PROZESSIERUNG
UND
PRAESENTATION
DER
MHC-I-PEPTIDLIGANDEN
.
15
2
2
PEPTIDPRAESENTATION
GEWEBSSPEZIFISCHER
HLA-MOLEKUELE
.
18
2
2
1
PEPTIDPRAESENTATION
THROMBOZYTAERER
HLA-MOLEKULE
.
19
2.2.2
PEPTIDPRASENTATION
LOESLICHER
HLA-MOLEKUELE
DES
BLUTPLASMAS
.
21
2.2.3
PEPTIDPRAESENTATION
DURCH
HLA-G-MOLEKUELE
.
23
2.3
ZIEL
DER
ARBEIT
.
25
3
MATERIAL
UND
METHODEN
.
27
3.1
HUMANE
PRIMAERE
ZELLEN
.
27
3.1.1
THROMBOZYTEN
.
27
3.2
TUMORZELLEN
28
3.2.1
HLA-G
UND
HLA-A2.1-TRANSFIZIERTE
ZELLINIEN
.
28
3.2.2
JY
.
29
3.3
GEWEBE
.
29
3
3
1
PLASMA
.
29
3.4
ANTIKOERPER.
.
30
3
4.1
TAP-SPEZIFISCHE MONOKLONALE
ANTIKOERPER
UND
ANTISEREN
.
30
3.4
2
SIINFEKL-SPEZIFISCHER
ANTIKOERPER
.
30
3.4
3
HLA-SPEZIFISCHE
HYBRIDOME
.
31
3
4.4
ISOLIERUNG
MONOKLONALER
ANTIKOERPER
.
32
3.5
PROTEINBESTIMMUNG
NACH
BRADFORD
.
33
3.6
DURCHFLUSSZYTOMETRIE
.
33
3.6.1
ANALYTISCHE
DURCHFLUSSZYTOMETRIE
(FACSCAN)
.
33
3.6
2
PRAEPARATIVE
DURCHFLUSSZYTOMETRIE
(FACSORT)
.
34
3.7
ISOLIERUNG
VON
HLA-LIGANDEN
.
35
37
1
ISOLIERUNG
DER
HLA-MOLEKULE
.
35
3
7
11
SOLUBILISIERUNG
DER
MEMBRANPROTEINE
DURCH
DETERGENZLYSE
.
35
3.7
1.2
PRAPARATIVE
IMMUNPRAEZIPITATION
DER
HLA-MOLEKUELE
.
36
3
72
ELUTION
DER
HLA-LIGANDEN
.
36
3.7.3
RP-HPLC-TRENNUNG
DER
HLA-LIGANDEN
.
37
3
7
4
GEMISCHSEQUENZIERUNG
.
39
3
7.5
SEQUENZIERUNG
INDIVIDUELLER
LIGANDEN
.
39
3.7
6
MASSENSPEKTROMETRIE
(MS)
.
39
3
7.7
DATENBANKSUCHE
.
40
3.8
ANALYTISCHE
IMMUNPRAEZIPITATION
.
40
3
8.1
RADIOAKTIVE
MARKIERUNG
VON
THROMBOZYTEN
.
40
3
8.2
MARKIERUNG
VON
THROMBOZYTEN
MIT
SULFO-NHS-BIOTIN
.
40
3
8.3
IMMUNPRAEZIPITATION
.
41
4
ERGEBNISSE
.
.
45
4
1
PEPTIDPRAESENTATION
THROMBOZYTAERER
HLA-MOLEKULE
.
45
4
1
1
MOTIVATION
.
45
4.12
HLA-EXPRESSION
HUMANER
THROMBOZYTEN
.
46
4.1.3
EXPERIMENTELLES
SYSTEM
.
47
4
1.4
HLA-LIGANDEN
VON
THROMBOZYTEN
.
48
4
1.5
TAP
UND
HLA-EXPRESSION
VON
THROMBOZYTEN
.
65
4
1.5
1
IMMUNPRAEZIPITATION
ZELLOBERFLAECHEN-MARKIERTER
THROMBOZYTEN
.
65
4.1.5
2
IMMUNPRAEZIPITATION
LYSAT-MARKIERTER
THROMBOZYTEN
.
66
4
15
3
TAP
UND
HLA-T/E
NOVO-SYNTHESE
VON
THROMBOZYTEN
.
67
4.2
PEPTIDPRAESENTATION
LOESLICHER
HLA-MOLEKULE
DES
BLUTPLASMAS
.
68
4.2
1
MOTIVATION
.
68
4
2
2
SHLA-LIGANDEN
.
68
4.3
HLA-G-ABHAENGIGE
PEPTIDPRAESENTATION
.
77
4
3
1
MOTIVATION
.
77
4.3.2
EXPERIMENTELLES
SYSTEM
.
77
4.3
3
HLA-EXPRESSION
DER
TRANSFEKTANTEN
.
78
4.3.4
HLA-G-LIGANDEN
.
79
5
DISKUSSION
.
93
5.1
PEPTIDPRAESENTATION
THROMBOZYTAERER
HLA-MOLEKUELE
.
93
5.1.1
DAS
HLA-A2-MOTIV,
ABGELEITET
AUS
DEN
GEMISCHSEQUENZIERUNGSDATEN
.
93
5.12
DAS
HLA-A2-MOTIV,
ABGELEITET
AUS
DEN
SEQUENZEN
INDIVIDUELLER
LIGANDEN
.
96
5
1.3
VERGLEICH
DES
THROMBOZYTEN-HLA-A2-MOTIV
ZU
DEM
JY-HLA-A2-MOTIV
VON
F
ALK
ET
AL
1991
.
98
5.1.4
PROTEINQUELLEN
DER
THROMBOZYTENLIGANDEN
.
102
5
1.5
THROMBOZYTENPROTEINE
IN
DER
DATENBANK
.
109
5.1.6
HERKUNFT
DER
HLA-MOLEKUELE
AUF
THROMBOZYTEN
.
110
5.1
7
ANALYSE
DER
N-TERMINAL
FLANKIERENDEN
SEQUENZEN
.
112
5
1.8
ANALYSE
DER
C-TERMINAL
FLANKIERENDEN
SEQUENZEN
.
114
5.1.9
VERGLEICH
DER
SIGNALPEPTIDLIGANDEN
AUS
THROMBOZYTEN
MIT
DEN
VON
H
ENDERSON
ET
AL.
1992
BESCHRIEBENEN
SIGNALPEPTIDLIGANDEN
AUS
T2
.
116
5.110
PHYSIOLOGISCHE
BEDEUTUNG
DER
PEPTIDPRAESENTATION
VON
THROMBOZYTEN
.
117
5
111
KLINISCHE
BEDEUTUNG
DER
PEPTIDPRASENTATION
VON
THROMBOZYTEN
.
118
5.1.11.1
IMPLIKATIONEN
FUER
DIE
TRANSFUSION
VON
THROMBOZYTENPRAEPARATEN
.
118
5
1112
THROMBOZYTARE
AUTOIMMUNITAET
.
118
5
1.12
WEITERFUEHRENDE
VERSUCHE
.
.
118
5
2
PEPTIDPRASENTATION
LOESLICHER
HLA-MOLEKUELE
DES
BLUTPLASMAS
.
119
5.2
1
DAS
SHLA-A2-MOTIV,
ABGELEITET
AUS
DEN
GEMISCHSEQUENZIERUNGSDATEN
.
119
5
2
2
HERKUNFT
DER
SHLA-MOLEKULE
.
120
5.2.3
FUNKTION
DER
SHLA-MOLEKUELE
.
121
5.2.4
WEITERFUEHRENDE
VERSUCHE
.
122
5.3
HLA-G-ABHAENGIGE
PEPTIDPRAESENTATION
.
123
5
3
1
DAS
HLA-G-MOTIV,
ABGELEITET
AUS
DEN
GEMISCHSEQUENZIERUNGSDATEN
.
123
5.3.2
INDIVIDUELLE
HLA-G-LIGANDEN
.
125
5.3.3
SEQUENZHOMOLOGIE
VON
HLA-G
ZU
ANDEREN
MHC-MOLEKUELEN
.
127
5.3.4
SEQUENZHOMOLOGIE
DER
BINDUNGSTASCHEN
VON
HLA-G
ZU
ANDEREN
MHC
MOLEKULEN
.
128
5.3.5
VERGLEICH
DER
PEPTIDBINDUNG
VON
HLA-G
UND
HLA-A2.
1
.
129
5.3.6
VERGLEICH
DER
PEPTIDLIGANDEN
VON
HLA-G
MIT
DEN
LIGANDEN
ANDERER
NICHT
KLASSISCHER
MHC-MOLEKUELE
.
132
5.3.7
VERGLEICH
DES
HLA-G-MOTIV
MIT
DEM
KLASSE-I-LIGANDENMOTIV
AUS
SAGUINUS
OEDIPUS
(G
RAHOVA
C
ET
AL.,
UNVEROEFFENTLICHT)
.
133
5.3.8
FUNKTION
DER
HLA-G-MOLEKUELE
.
135
53
9
WEITERFUEHRENDE
VERSUCHE
.
136
5.4
VERGLEICH
DER
PEPTIDPRAESENTATION
GEWEBSSPEZIFISCHER
HLA-MOLEKULE
.
137
6
ZUSAMMENFASSUNG
.
139
7
REFERENZEN
.
141
ANHANG:
8
TABELLARISCHER
LEBENSLAUF
.
157
9
VERZEICHNIS
DER
AKADEMISCHEN
LEHRER
.159
10
DANKSAGUNG
.
161
11
EHRENWOERTLICHE
ERKLAERUNG
.
163 |
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