Untersuchung der Schale von Biomphalaria glabrata (Say) unter besonderer Berücksichtigung der organischen Matrix:
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1995
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INHALTSVERZEICHNIS
SEI
TE
1.
EINLEITUNG
.
1
1.1
DIE
MOLLUSKENSCHALE,
EIN
BIOMINERALISATIONSPRODUKT
.
1
1.2.
DER
MANTEL
RAND,
DAS
SCHALENBILDENDE
GEWEBE
.
3
1.3.
DIE
EXTRAPAL
1
IALE
FLUESSIGKEIT
.
5
1.4.
DIE
CARBOANHYDRASE,
EIN
SCHLUESSELENZYM?
.
8
1.5.
DAS
ANORGANISCHE
MINERAL
DER
SCHALE
.
9
1.6.
DAS
ORGANISCHE
MATERIAL
DER
SCHALE
.
11
1.7.
MAT
RIX-KRI
STAL
1
-INTERAKTIONEN
.
17
2.
MATERIAL
.
22
2.1.
GERAETE
.
22
2.2.
REAGENZIEN
.
22
3.
METHODEN
.
24
3.1.
TIERHALTUNG
.
24
3.1.1.
SCHNECKENHALTUNG
.
24
3.1.2.
MAEUSEHALTUNG
.
24
3.2.
BESTIMMUNG
DER
KRISTALLMODIFIKATION
DER
SCHALE
.
24
3.2.1.
ROENTGEN-DI
FF
RAKTOMETRIE
.
24
3.2.2.
INFRAROT-SPEKTROMETRIE
.
25
3.3.
RASTEI
-
ELEKTRONENMIKROSKOPIE
DER
SCHALE
.
25
3.3.1.
SCHALENSTRUKTUR
.
25
3.3.2.
LONENEI
NLAGERUNG
.
25
3.4.
ISOLIERUNG
DER
ORGANISCHEN
SCHALENMATRIX
.
25
3.4.1.
ENTKALKUNG
DER
SCHALEN
.
25
3.4.2.
TRENNUNG
VON
WASSERLOESLICHER
UND
-UNLOESLICHER
MATRIX.
26
3.4.3.
ENTSALZUNG
DER
WASSERLOESLICHEN
MATRIX
.
26
3.4.4.
CALCIUMBESTIMMUNG
DURCH
AAS
.
27
3.5.
SPEKTROMETRISCHE
CHARAKTERISIERUNG
DER
MATRIX
.
28
3.5.1.
INFRAROT-SPEKTROMETRIE
.
28
3.5.2.
UV/VIS-SPEKTROMETRIE
.
28
3.5.3.
ERSTELLUNG
VON
STAINS-AL
1-SPEKTREN
.
28
3.6.
CHEMISCHE
CHARAKTERISIERUNG
DER
MATRIX
.
28
3.6.1.
COLORIMETRISCHE
NACHWEISMETHODEN
.
28
3.6.1.1.
BESTIMMUNG
VON
PROTEIN
.
28
3.6.1.2.
BESTIMMUNG
VON
NEUTRAL
ZUCKERN
.
29
3.6.1.3.
BESTIMMUNG
VON
AMINOZUCKERN
UND
CHITIN
.
30
3.6.1.4.
BESTIMMUNG
VON
URONSAEUREN
.
31
3.6.1.5.
BESTIMMUNG
VON
SULFAT
.
32
3.6.1.6.
BESTIMMUNG
VON
PHOSPHAT
.
32
3.6.2.
AMINOSAEURENANALYSE
.
33
3.7.
ELEKTROPHORETISCHE
CHARAKTERISIERUNG
DER
LOESLICHEN
MATRIX
.
34
3.7.1.
SDS-POLYACRYLAMID-GRADIENTENGEL-ELEKTROPHORESE
.
34
3.7.1.1.
SDS-PAGE
IM
HORIZONTALEN
SYSTEM
.
34
3.7.1.2.
SDS-PAGE
IM
VERTIKALEN
SYSTEM
.
35
3.7.2.
NATIVE
POLYACRYLAMID-GRADIENTENGEL-ELEKTROPHORESE
.
36
3.7.3.
POLYACRYLAMIDGEL-ELEKTROPHORESE
MIT
HARNSTOFF
.
38
3.7.4.
POLYACRYLAMIDGEL-ELEKTROPHORESE
MIT
BORAT
.
39
3.7.5.
ISOELEKTRISCHE
FOKUSSIERUNG
.
40
3.7.6.
2D-ELEKTROPHORESE
.
41
3.7.7.
FAERBEMETHODEN
FUER
ELEKTROPHORESEGELE
.
42
3.7.7.1.
COOMASSIE-BRI
1
LANTBLAU-FAERBUNG
.
42
3.7.7.2.
SI
1
BERFAERBUNGEN
.
42
3.7.7.3.
KOLLOIDALE
FAERBUNGEN
.
43
3.7.7.4.
STAINS-AL
1-FAERBUNGEN
.
44
3.7.7.5.
KOHLENHYDRATF
AERBUNGEN
.
45
3.7.8.
BLOTTEN
IM
SEMIDRYVERFAHREN
.
46
3.7.9.
FAERBEMETHODEN
FUER
BLOTMEMBRANEN
.
47
3.8.
MIKROSEQUENZIERUNG
.
47
3.9.
LEKTINBINDUNGSSTUDIEN
.
48
3.9.1.
LEKTINBINDUNG
AN
DIE
LOESLICHE
MATRIX
.
48
3.9.2.
LEKTINBINDUNG
AN
DIE
UNLOESLICHE
MATRIX
.
49
3.9.3.
LEKTINBINDUNG
AN
DIE
MATRIX
NACH
SDS-PAGE
.
50
3.9.4.
LEKTINBINDUNG
AN
DIE
MATRIX
NACH
IEF
.
50
3.10.
CALCIUMBINDUNGSSTUDIEN
.
51
3.10.1
.
CALCIUM-AUTORADIOGRAPHIE
.
51
3.10.2.
CALCIUMBINDUNGS-ASSAY
DER
UNLOESLICHEN
MATRIX
.
51
3.10.3.
CALCIUMBINDUNGS-ASSAY
DER
LOESLICHEN
MATRIX
.
53
3.11.
IMMUNOLOGISCHE
VERFAHREN
.
55
3.11.1.
HERSTELLUNG
VON
ANTISEREN
.
55
3.11.2.
TITERBESTIMMUNG
DURCH
ELISA
.
55
3.11.3.
KREUZREAKTIONEN
DER
ANTISEREN
.
56
3.11.4.
IMMUNELEKTROPHORESE
.
56
3.11.5.
FAERBUNG
DER
IMMUNELEKTROPHORESE
.
57
3.11.6.
ANTIKOERPER-FAERBUNG
DES
WESTERN-BLOTS
.
57
3.12.
PHENOL
OXIDASE-NACHWEIS
.
58
3.13.
STATISTISCHE
VERFAHREN
.
59
4.
ERGEBNISSE
.
60
4.1.
DER
ANORGANISCHE
BESTANDTEIL
DER
SCHALE
.
60
4.1.1.
KRISTALLMODIFIKATION
.
60
4.1.2.
SCHALENSTRUKTUR
.
61
4.1.3.
LONENEINLAGERUNG
.
64
4.2.
ISOLIERUNG
DER
ORGANISCHEN
SCHALENMATRIX
.
65
4.2.1.
GEL
F
I
1
TRATION
.
65
4.2.2.
AUSBEUTE
AN
ORGANISCHEM
MATERIAL
.
66
4.3.
SPEKTROMETRISCHE
CHARAKTERISIERUNG
DER
MATRIX
.
66
4.3.1.
UV/VIS-SPEKTRUM
.
66
4.3.2.
STAINS-AL
1-SPEKTRUM
.
67
4.4.
CHEMISCHE
CHARAKTERISIERUNG
DER
MATRIX
.
68
4.4.1.
QUANTITATIVE
BESTANDTEILANALYSEN
.
68
4.4.2.
AMINOSAEURENANALYSEN
.
73
4.5.
DIE
PROTEINE
DER
LOESLICHEN
MATRIX
.
75
4.5.1.
FAERBEMETHODEN
FUER
ELEKTROPHORESEN
.
75
4.5.2.
SDS-POLYACRY
1
AMI
D-GRADI
ENTENGEL-ELEKT
ROPHORESE
.
75
4.5.3.
NATIVE
POLYACRYLAMID-GRADIENTENGEL-ELEKTROPHORESE
.
79
4.5.4.
POLYACRYLAMIDGEL-ELEKTROPHORESE
MIT
HARNSTOFF
.
79
4.5.5.
POLYACRYLAMIDGEL-ELEKTROPHORESE
MIT
BORAT
.
81
4.5.6.
ISOELEKTRISCHE
FOKUSSIERUNG
.
82
4.5.7.
2D-ELEKTROPHORESE
.
85
4.6.
PARTIELLE
MIKROSEQUENZIERUNG
EINZELNER
PROTEINE
.
86
4.7.
DIE
KOHLENHYDRATE
DER
MATRIX
.
87
4.7.1.
LEKTINBINDUNG
AN
DIE
MATRIX
.
87
4.7.2.
LEKTINBINDUNG
AN
DIE
MATRIX
NACH
SDS-PAGE
.
88
4.7.3.
LEKTINBINDUNG
AN
DIE
MATRIX
NACH
IEF
.
89
4.7.4.
IR-SPEKTROMETRIE
DER
MATRIX
.
90
4.8.
CALCIUMBINDUNG
DER
MATRIX
.
93
4.8.1.
CALCIUM-AUTORADIOGRAPHIE
.
93
4.8.2.
CALCIUMBINDUNGS-ASSAY
DER
UNLOESLICHEN
MATRIX
.
96
4.8.3.
CALCIUMBINDUNGS-ASSAY
DER
LOESLICHEN
MATRIX
.
101
4.9.
IMMUNOLOGISCHE
STUDIEN
.
103
4.10.
NACHWEIS
DER
PHENOLOXIDASE
IN
DER
MATRIX
.
105
5.
DISKUSSION
.
106
5.1.
MATERIALGEWINNUNG
UND
MATRIXBESTANDTEI
LE
.
106
5.2.
DIE
PROTEINE
DER
LOESLICHEN
MATRIX
.
116
5.3.
DIE
KOHLENHYDRATE
DER
MATRIX
.
125
5.4.
DIE
CALCIUMBINDUNG
DER
MATRIX
.
132
5.5.
DIE
SCHALE,
EIN
BIOMINERAL
I
SATIONSPRODUKT
.
138
6.
ZUSAMMENFASSUNG
.
'146
7.
LITERATURVERZEICHNIS
.
149 |
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