Enzymimmunologische Bestimmung eines Plasmin-induzierten Fibrinogenspaltproduktes in Seren heparinisierter Patienten:
Gespeichert in:
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| Format: | Buch |
| Sprache: | German |
| Veröffentlicht: |
1995
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INHALTSVERZEICHNIS
A
EINLEITUNG
1
A.
1
BLUTGERINNUNG
UND
FIBRINOLYSE
1
A.
I
.
I
PROTEOLYTISCHE
SYSTEME
1
A.1.2
BLUTGERINNUNG
2
A.1.3
FIBRINOLYSE
4
A.
1.4
PATHOPHYSIOLOGISCHE
VERAENDERUNGEN
DES
GERIPNUNGS
UND
DES
FIBRINO
LYSESYSTEMS
AM
BEISPIEL
DES
SCHOCKS
5
A.2
YY)AS
FIBRINOGENSPALTPRODUKT
FPC
7
A.2.1
FIBRINOGENSTRUKTUR
UND
FIBRINBILDUNG
7
A.2.2
FIBRIN
UND
FIBNNOGENABBAU
DURCH
PLASMIN
11
A
2.3
ALTERNATIVE
FIBRINOLYSE
WEGE
13
A.2.4
NACHWEIS
UND
PATHOPHYSIOLOGISCHE
BEDEUTUNG
DER
FIBRINOGEN/
FIBRINSPALTPRODUKTE
13
A.2.5
DIE
FIBRINOGENSPALTPRODUKTE
FPC
UND
F-CB3
16
A.3
FPC-BESTIMMUNG
UND
STOERFAKTOREN
DER
MESSUNG
19
A.3.1
ENZYMIMMUNOASSAY
FUER
FPC
20
A.3.2
STOERFAKTOREN
DER
FPC-MESSUNG
22
A.4
AUFGABENSTELLUNG
23
B
MATERIAL
UND
METHODEN
24
B.L
MATERIAL
24
B.1.1
CHEMIKALIEN
UND
IMMUNREAGENZIEN
24
B.L.
2
MATERIALIEN
UND
GERAETE
25
B.2
METHODEN
26
B.2.1
ANTIKORPENSOLIERUNG
UND-KOPPLUNG
27
B.2.
1.1
ISOLIERUNG
DER
MONOKLONALEN
MAUS-ANTI-F-CB3-ANTIKOERPER
AUS
ASZITES
27
B.2.
1.2
ISOLIERUNG
DER
POLYKLONALEN
ZIEGE
ANTI-F-CB3-ANTIKOERPER
AUS
SERUM
29
B.2.
1.3
KOPPLUNG
DER
POLYKLONALEN
ZIEGE-ANTI-F-CB3-ANTIKOERPER
AN
PEROXIDASE
31
B.2.
1.4
ISOLIERUNG
DER
ANTI-FIBRINOGEN-ANTIKOERPER
ANTI-B/?
UND
ANTI-P
AUS
SERUM
32
B.2.
2
MODIFIKATIONEN
DES
ELISAS
FUER
DIE
BESTIMMUNG
DES
FPC
36
B.2.
2.1
OPTIMIERUNG
DER
BESCHICHLUNGSKONZENTRALION
34
B.2.
2.2
OPTIMIERUNG
DER
KONJUGATKONZENTRATION
36
B.2.2.3
EVALUIERUNG
EINER
GEEIGNETEN
SUBSTRATLOESUNG
36
B.2.2.4
STANDARDDURCHFUEHRUNG
DES
FPC-EI.ISAS
UND
AUSWERTUNG
37
B.2.2.5
EICHUNG
EINES
EIGENEN
STANDARDS
39
B.2.2.6
UNTERSUCHUNGEN
ZUR
REPRODUZIERBARKEIT
39
B.2.2.6.
1
VARIATION
IN
DER
REIHE
39
B.
2.2.6.2
VARIATION
ZWISCHEN
DEN
REIHEN
39
B.2.2.6.
3
VERGLEICH
DER
MESSUNGEN
IN
DREI
VERSCHIEDENEN
L^BORATORIEN
40
B.2.3
UNTERSUCHUNGEN
ZUM
EINFLUSS
VON
HEPARIN
40
B.2.3.1
SERUMGEWINNUNG
40
B.2.3.
2
UNTERSUCHUNGEN
AN
HEPARINSEREN
41
B.2.4
PROTEINCHEMISCHE
FAELLUNGEN
DES
FIBRINOGENS
42
B.2.4.
1
FAELLUNG
MIT
BENTONIT
42
B.2.4.
2
FAELLUNG
MIT
AETHANOL
43
B.2.4.
3
FAELLUNG
MIT
AMMONIUMSULFAT
44
B.2.5
IMMUNOLOGISCHE
FAELLUNGEN
DES
FIBRINOGENS
45
B.2.5.
1
ABSCHAETZUNG
DES
AEQUIVALENZVERHAELTNISSES
VON
ANTI-FIBRINOGEN-AK
UND
ANTI-LGG-AK
48
B.2.5.
2
OPTIMIERUNGSVERSUCHE
50
B.2.5.
2.1
VORVERDUENNUNG
DES
SERUMS
FUER
DIE
FAELLUNGSREAKTION
50
B.2.5.
2.2
UEBERPRUEFUNG
DES
AEQUIVALENZVERHAELTNISSES
50
B.2.5.
2.3
KONZENTRATION
DES
ERSTEN
FAELLUNGSANTIKOERPERS
51
B.2.5.
2.4
FAELLUNG
OHNE
ZWEITEN
FAELLUNGSANTIKOERPER
51
B.2.5.
2.5
VERAENDERUNG
DER
FAELLUNGSBEDINGUNGEN
51
B.2.5.
3
STANDARDISIERTE
FAELLUNGSREAKTION
52
B.2.5.
4
UNTERSUCHUNGEN
ZUR
REPRODUZIERBARKEIT
DER
FAELLUNG
52
B.2.5.
5
FAELLUNGSVERSUCHE
ZUM
NACHWEIS
DER
SPEZIFITAET
53
B.2.5.
5.1
SERUM
MIT
ZUGESETZTEM
FIBRINOGEN
53
B.2.5.
5.2
SERUM
MIT
ZUGESETZTEM
F-CB3
53
B.2.5.
5.3
FIBRINOGEN
IN
HEPARINSEREN
53
B.2.5.
5.4
EINFLUSS
VON
HEPARIN
AUF
IMMUNFAELLUNG
UND
FPC-ELISA
54
B.2.5.
5.5
FIBRINOGEN
IM
PLASMA
54
B.2.6
KLINISCH-CHEMISCHE
ANWENDUNG
DES
FPC-ELISAS
55
B.2.6.
1
MESSWERTE
VON
GESUNDEN
PROBANDEN
55
B.2.6.
2
MESSWERTE
VON
TRAUMAPATIENTEN
55
B.2.6.2.1
BESCHREIBUNG
DER
STUDIE
55
B.2.6.
2.2
NACHWEIS
VON
FPC
56
B.2.6.
2.3
NACHWEIS
VON
APROTININ
UND
PLASMINOGEN
57
B.2.6.2.4
STATISTISCHE
AUSWERTUNG
UND
DARSTELLUNG
DER
ERGEBNISSE
57
C
ERGEBNISSE
58
C.
1
ANTIKOERPERISOLIERUNG
UND
-KOPPLUNG
58
C.
1.1
ISOLIERUNG
DER
MONOKLONALEN
MAUS-ANTI-F-CB3-ANTIKOERPER
AUS
ASZITES
58
C.1.2
ISOLIERUNG
DER
POLYKLONALEN
ZIEGE-ANTI-F-CB3-ANTIKOERPER
AUS
SERUM
60
C.1.3
KOPPLUNG
DER
POLYKLONALEN
ZIEGE-ANTI-F-CB3-ANTIKOERPER
AN
PEROXIDASE
61
C.
1.4
ISOLIERUNG
DER
FIBRINOGEN-ANTIKOERPER
ANTI-B/?
UND
ANTI-Y
AUS
SERUM
61
C.2
MODIFIKATIONEN
DES
ELISAS
FUER
DIE
BESTIMMUNG
DES
FPC
64
C.2.1
OPTIMIERUNG
DER
BESCHICHTUNGSKONZENTRATION
64
C.2.
2
OPTIMIERUNG
DER
KONJUGATKONZENTRATION
65
C.2.
3
EVALUIERUNG
EINER
GEEIGNETEN
SUBSTRATLOESUNG
66
C.2.
4
EICHUNG
EINES
EIGENEN
STANDARDS
66
C.2.5
UNTERSUCHUNGEN
ZUR
REPRODUZIERBARKEIT
DES
ELISA
67
C.2.
5.1
VARIATION
IN
DER
REIHE
67
C.2.
5.2
VARIATION
ZWISCHEN
DEN
REIHEN
68
C.2.5
3
VERGLEICH
DER
MESSUNGEN
IN
DREI
VERSCHIEDENEN
IJTBORALORIEN
69
C.3
UNTERSUCHUNGEN
ZUM
EINFLUTT
VON
HEPARIN
71
C.3.1
SERUMGEWINNUNG
71
C.3.
2
UNTERSUCHUNGEN
AN
HEPARINSEREN
72
C.4
PROTEINCHEMISCHE
FAELLUNGEN
DES
FIBRINOGENS
74
C.4.
1
FAELLUNG
MIT
BENTONIT
74
C.4.
2
FAELLUNG
MIT
AETHANOL
UND
AMMONIUMSULFAT
74
C.5
IMMUNOLOGISCHE
FAELLUNGEN
DES
FIBRINOGENS
76
C.5.1
ABSCHAETZUNG
DES
AEQUIVALENZVERHAELTNISSES
VON
ANTI-FIBRINOGEN-AK
UND
ANTI-LGG-AK
76
C.5.
2
OPTIMIERUNGSVERSUCHE
78
C.5.
2.1
VORVERDUENNUNG
DES
SERUMS
FUER
DIE
FAELLUNGSREAKTION
78
('.5.2.2
UEBERPRUEFUNG
DES
AEQUIVALENZVERHAELTNISSES
79
C.5.
2.3
KONZENTRATION
DES
ERSTEN
FAELLUNGSANTIKOERPERS
80
C.5.
2.4
FAELLUNG
OHNE
ZWEITEN
FAELLUNGSANTIKOERPER
81
C.5.
2.5
VERAENDERUNG
DER
FAELLUNGSBEDINGUNGEN
82
C.5.
2.6
UNTERSUCHUNGEN
ZUR
REPRODUZIERBARKEIT
DER
FAELLUNG
83
C.5.
3
FAELLUNGSVERSUCHE
ZUM
NACHWEIS
DER
SPEZIFITAET
85
C.5.
3.1
SERUM
MIT
ZUGESETZTEM
FIBRINOGEN
85
C.5.
3.2
SERUM
MIT
ZUGESETZTEM
F-CB3
85
C.5.
3.3
FIBRINOGEN
IN
HEPARINSEREN
86
C.5.3.4
EINFLUSS
VON
HEPARIN
AUF
IMMUNFAELLUNG
UND
FPC
ELISA
88
C.5.3.5
FIBRINOGEN
IM
PLASMA
90
C.6
KLINISCH-CHEMISCHE
ANWENDUNG
DES
FPC-ELISA
91
C.6.1
MESSWERTE
VON
GESUNDEN
PROBANDEN
91
C.6.
2
MESSWERTE
VON
TRAUMAPATIENTEN
93
D
DISKUSSION
99
D.L
MODIFIKATIONEN
DES
FPC-ELISAS
100
D.2
ENTFERNUNG
KREUZREAGIERENDEN
FIBRINOGENS
AUS
SERUMPROBEN
102
D.2.1
SERUMGEWINNUNG
UND
HEPARINCINFLUSS
102
D.2.
2
FAELLUNG
DES
FIBRINOGENS
104
D.2.
2.1
PROTEINCHEMISCHE
FAELLUNGEN
104
D.2.
2.2
IMMUNOLOGISCHE
FAELLUNG
105
D.3
ANWENDUNG
DES
FPC-ELISA
HO
E
ZUSAMMENFASSUNG
115
F
LITERATURVERZEICHNIS
117
DANKSAGUNG
129
LEBENSLAUF
130 |
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