Protontransferprozesse im aktiven Zentrum von Alkoholdehydrogenasen: eine FTIR-spektroskopische Untersuchung
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1996
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INHALTSVERZEICHNIS
L.
EINLEITUNG
.
1
1.1.
ALKOHOLDEHYDROGENASEN
.
1
1.
1.
1
VORKOMMEN
UND
EIGENSCHAFTEN
.
1
1.1.2.
STRUKTUR
UND
MECHANISMUS
DER
LEBERALKOHOLDEHYDROGENASE
.
2
L
.2.
WASSERSTOFFBRUECKENBINDUNG
.
8
1.2.1.
THEORIE
DER
WASSERSTOFFBRUECKEN
.
8
1.2.2.
BEDEUTUNG
DER
H-BRUECKEN
FUER
BIOLOGISCHE
SYSTEME
.
14
1.3.
AUFGABENSTELLUNG
UND
ZIELE
.
14
2.
EXPERIMENTELLES
.
16
2.1.
CHEMIKALIEN
UND
GERAETE
.
16
2.2.
VORBEREITUNG
DER
PROBEN
.
17
2.2.1.
INHIBITOREN
UND
COENZYME
.
17
2.2.2.
REINIGUNG
DER
ALKOHOLDEHYDROGENASEN
.
18
2.2.3.
ENTFERNUNG
DES
ZINK-IONS
AUS
DEM
AKTIVEN
ZENTRUM
DER
YADH
.
20
2.2.4.
DARSTELLUNG
DER
MODELLSYSTEME
.
21
2.3.
MESSTECHNIK
.
23
2.3.1.
KUEVETTENTECHNIK
.
23
2.3.1.1.
FLUESSIGKEITSKUEVETTE
FUER
WAESSRIGE
LOESUNGEN
.
23
2.3.12.
ATR-TECHNIK
.
25
2.3.1.3.
TRANSMISSIONSFILME
.
27
2.3.2.
SPEKTRENAUFNAHME
.
30
2.3.3.
SPEKTRENAUSWERTUNG
.
32
3.
ERGEBNISSE
UND
DISKUSSION
.
34
3.1.
FTIR-MESSUNGEN
VON
MODELLSYSTEMEN
.
34
3.11.
NAD*
UND
DERIVATE
IN
WAESSRIGER
LOESUNG
.
34
3.1.1.1.
NAD
'
UND
DERIVATE
IM
NEUTRALEN
PH-BEREICH
.
34
3.1.1.2.
NAD
'
UND
DERIVATE
IM
SAUREN
PH-BEREICH
.
44
3.1.2.
KONFORMATION
DES
NAD*
.
47
3.1.3.
ADENIN
ALS
H-BRUECKEN-PARTNER
.
49
3.2.
FTIR-MESSUNGEN
VON
ALKOHOLDEHYDROGENASEN
.
56
3.2.1.
BINFTRER
KOMPLEX
DER
YADH
MIT
NAD"
.
56
3.2.2.
BINAERER
KOMPLEX
DER
YADH
MIT
ADPR
.
60
3.2.3.
BINAERER
KOMPLEX
DER
.JNNKFIEIEN
"
YADH
(H
T
YADH)
MIT
NAD
'
.
63
3.2.4.
BINAERE
KOMPLEXE
DER
LADH
MIT
NAD
'
UND
ADPR
.
65
3.2.5.
TERNAERER
KOMPLEX
DER
LADH
MIT
NAD
'
UND
DEM
INHIBITOR
2,2,2,
-TRIFLUORETHANOL
(
ITH)
.
68
3.3
DISKUSSION
DES
PROTONRELAY-SYSTEMS
.
72
3
3.
1.
DIE
ROLLE
DES
ZINK-IONS
.
72
3.3
2.
MECHANISMUS
DES
PROTONRELAY-SYSTEMS
.
73
4.
ZUSAMMENFASSUNG
.
79
4.1.
VORUNTERSUCHUNGEN
.
79
4.2.
ERGEBNISSE
DER
YADH
BZW
LADH-DIFFERENZSPEKTREN
.
80
LITERATURVERZEICHNIS
.
83
ANHANG
.
88
ANHANG
A
.
89
ANHANG
B
.
91
ANHANG
C
.
93 |
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