Der Einfluss des HLA-DPB1 Gens auf die gemischte Lymphozytenkultur:
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1994
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I
NHALTSVERZEICHNIS
ABKUERZUNGEN
1.
E
INLEITUNG
.
1
1.1.
KNOCHENMARKTRANSPLANTATION
.
1
1.2.
GRAFT-VERSUS-HOST
DISEASE
.
1
1.3.
HAUPTHISTOKOMPATIBILITAETSKOMPLEX
.
2
1.4.
GENETISCHE
VARIATIONSBREITE
DES
HLA-SYSTEMS
.
4
1.5.
HLA-DP-SUBREGION
.
5
1.6.
GEWEBETYPISIERUNGSVERFAHREN
.
5
1.6.1.
SEROLOGISCHE
VERFAHREN
.
5
1.6.2.
MOLEKULARBIOLOGISCHE
VERFAHREN
.
6
1.6.3.
ZELLULAERE
VERFAHREN
.
6
1.7.
PROBLEM
UND
FRAGESTELLUNG
.
8
2.
M
ATERIAL
UND
M
ETHODEN
.
9
2.1.
MATERIAL
.
9
2.1.1.
UNTERSUCHUNGSKOILEKTIV
.
9
2.1.2.
ZELLMATERIAL
.
9
2.1.3.
CHEMIKALIEN,
REAGENZIEN,
ENZYME
.
9
2.1.4.
LOESUNGEN
UND
MIXTUREN
.
10
2.1.5.
GERAETE
UND
MATERIALIEN
.
12
2.2.
METHODEN
.
14
2.2.1.
GEMISCHTE
LYMPHOZYTENKULTUR
.
14
2.2.1.1.
LYMPHOZYTENSEPARATION
.
14
2.2.1.2.
KULTURANSATZ
.
14
2.2.1.3.
AUSWERTUNG
DER
MLC
.
14
2.2.2.
GENOTYPISIERUNG
DES
HLA-DPB
1
.
15
2.2.2.1.
DNA-EXTRAKTION
.
15
2.2.2.2.
SYNTHESE
UND
AUFARBEITUNG
VON
OLIGONUKLEOTIDEN
.
15
2.2.2.3.
POLYMERASE-KETTENREAKTION
.
18
2.2.2.4.
UEBERPRUEFUNG
DER
AMPLIFIKATIONSPRODUKTE
MITTELS
GELELEKTROPHORESE
.
18
2.2.2.5.
OLIGONUKLEOTIDHYBRIDISIERUNG
.
18
2.2.3.
EINTEILUNG
IN
GRUPPEN,
UNTERGRUPPEN
UND
KLASSEN
.
21
2.2.4.
STATISTISCHE
AUSWERTUNG
.
21
3.
E
RGEBNISSE
.
22
3.1.
ZUSAMMENSETZUNG
DES
PATIENTENKOLLEKTIVS
.
22
3.2.
ROHDATEN
.
23
3.2.1.
GEMISCHTE
LYMPHOYZTENKULTUREN
.
23
3.2.2.
GENERISCHE
AMPLIFIZIERUNG
DES
HLA-DPB1
GENS
.
23
3.2.3.
TYPISIERUNGSERGEBNISSE
DER
OLIGONUKLEOTIDHYBRIDISIERUNG
.
24
3.3.
DATENANALYSE
.
25
3.3.1.
PATIENTEN
REAKTIONS
UND
STIMULATIONSVERHALTEN
IM
VERGLEICH
MIT
SPENDERN
.
25
3.3.2.
EINFLUSS
DES
DRB1
GENS
AUF
DIE
GEMISCHTE
LYMPHOZYTENKULTUR
.
26
3.3.3.
MEDIANUNTERSCHIEDE
BEI
DRB
1
IDENTEN
UND
DRB
1
DIFFERENTEN
LYMPHOZYTENKULTUREN
.
27
3.3.4.
EINFLUSS
DER
DPBL-ALLELE
AUF
DIE
MLC
BEI
DRB
1
-IDENTITAET
.
28
3.3.5.
MEDIANUNTERSCHIEDE
IN
ABHAENGIGKEIT
VON
DPB
1
DIFFERENZEN
-BEI
DRB1
IDENTITAET-
.
29
3.3.6.
EINFLUSS
DER
DPB
1
ALLELE
AUF
DIE
MLC
BEI
DRB
1-1-ALLELDIFLFERENZ.
.
31
3.3.7.
MEDIANUNTERSCHIEDE
IN
ABHAENGIGKEIT
VON
DPB1
DIFFERENZEN
-BEI
DRB
1
-1
-
ALLEIDIFFERENZ-
.
32
3.3.8.
HIGH-RESPONDER-ALLELE
DES
HLA-DPB1
.
34
3.3.9.
HIGH-RESPONDER-SPEZIFITAETEN
DES
HLA-DR
.
37
3.3.10.
ZEHN
POSITIVE
GEMISCHTE
LYMPHOZYTENKULTUREN
BEI
HLA-DRB
1
-
UND
DPB
1
-IDENTITAET
.
39
3.3.11.
DPBL-ALLELFREQUENZEN
.
40
4.
DISKUSSION
.
42
5.
ZUSAMMENFASSUNG
.
47
6.
A
NHANG
I
(HLA-DPB1-ALLEL-SEQUENZPLAN
MIT
LAGE
UND
BEZEICHZNUNG
DER
HYBRIDISIERUNGSOLIGONUKLEOTIDE)
.
48
ANHANG
II
(TABELLARISCHE
AUFLISTUNG
DER
RRC-WERTE
IN
%)
.
51
ANHANG
HI
(AUFLISTUNG
DER
VORTYPISIERTEN
DRB
1
-ALLELE
UND
DER
TYPISIERTEN
DPB
1
-ALLELE)
.
58
7.
L
ITERATURVERZEICHNIS
.
63
8.
D
ANKSAGUNG
.
71
9.
L
EBENSLAUF
.
72 |
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