Entwicklung von Enzymimmunoassays (ELISA) und Immunadsorbern zur Bestimmung des Herbizids 2,4-Dichlorphenoxyessigsäure (2,4-D) mit polyklonalen Antiseren:
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| Format: | Buch |
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1995
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I
NHALT
I.
E
INLEITUNG
UND
P
ROBLEMSTELLUNG
.
1
1
EINLEITUNG
.
1
2
PROBLEMSTELLUNG
UND
ZIELSETZUNG
.
3
N.
T
HEORETISCHE
G
RUNDLAGEN
.
5
1
DAS
HERBIZID
2,4-DICHLORPHENOXYESSIGSAEURE
(2,4-D)
.
5
1.1
ALLGEMEINES
.
5
1.2
HERSTELLUNG
VON
2,4-D
.
5
1.3
EINIGE
WICHTIGE
KENNDATEN
DER
VERWENDETEN
HERBIZIDE
.
6
1.4
WIRKUNGSWEISE
VON
2,4-D
.
9
1.5
ABBAU
.
10
1.6
UMWELTVERHALTEN
UND
TOXIKOLOGISCHE
BEDEUTUNG
.
11
1.7
METHODEN
ZUR
BESTIMMUNG
VON
2,4-D
.
13
1.7.1
GASCHROMATOGRAPHIE
.
13
1.7.2
HOCHAUFLOESENDE
FLUESSIGCHROMATOGRAPHIE
.
14
1.7.3
IMMUNOLOGISCHE
VERFAHREN
.
15
2
DER
ENZYME-LINKED
IMMUNOSORBENT
ASSAY
(ELISA)
.
17
2.1
ALLGEMEINES
.
17
2.2
ANTIKOERPER
.
17
2.2.1
ALLGEMEINES
.
17
2.2.2
EIGENSCHAFTEN
.
18
2.2.3
STRUKTUR
DER
ANTIKOERPER
.
19
2.2.4
BILDUNG
DER
ANTIKOERPER
.
19
2.3
ENZYMTRACER
.
21
2.4
PRINZIP
UND
DURCHFUEHRUNG
DES
ELISA
.
21
2.4.1
DIREKTER
ELISA
.
22
2.4.2
INDIREKTER
ELISA
.
24
2.5
AUSWERTUNG
DER
MESSUNGEN
.
27
2.6
QUEREMPFINDLICHKEIT
.
28
3
DIE
IMMUNOAFFMITAETSCHROMATOGRAPHIE
(IAC)
.
30
3.1
ALLGEMEINES
.
30
3.2
PRINZIP
DER
IMMUNADSORPTION
.
31
3.3
ISOLIERUNG
DER
IGG-FRAKTION
.
33
3.4
KOPPLUNG
DER
IGG
AN
TRAEGERMATERIALIEN
.
34
3.5
CHARAKTERISIERUNG
DES
IMMUNADSORBERS
.
36
3.6
ELUTION
.
37
DI.
E
XPERIMENTELLER
T
EIL
.
39
1
CHEMIKALIEN
.
39
1.1
GRUNDCHEMIKALIEN
.
39
1.2
STANDARDSUBSTANZEN
.
40
1.3
PUFFER
.
41
1.4
SUBSTRATLOESUNG
.
42
2
GERAETE
.
42
3
ELISA-DURCHFUEHRUNG:
DIREKTES
VERFAHREN
.
43
4
DURCHFUEHRUNG
DER
IMMUNOAFFMITAETSCHROMATOGRAPHIE
.
43
5
SYNTHESEN
.
44
5.1
2,4-D-POD-TRACER
.
44
5.2
2,4-DB-POD-TRACER
.
44
5.3
2,4-D-AMINOCAPRONSAEURE-POD-TRACER
.
44
5.4
SYNTHESE
DER
IMMUNOGENE
UND
COATING-ANTIGENE
.
45
5.5
DUENNSCHICHTCHROMATOGRAPHIE
.
45
5.6
GELCHROMATOGRAPHIE
.
46
5.7
GC-DERIVATISIERUNG
.
46
5.8
GC-MESSUNG
.
46
6
ISOLIERUNG
DER
IGG
.
47
6.1
AFFINITAETSCHROMATOGRAPHISCHE
ISOLIERUNG
.
47
6.1.1
ENTSALZUNG
.
47
6.1.2
ABTRENNUNG
DER
IGG-FRAKTION
.
47
6.1.3
AUFKONZENTRIEREN
DER
GEREINIGTEN
IGG-FRAKTION
.
47
6.2
MODIFIZIERTES
PRAEZIPITATIONSVERFAHREN
.
48
6.3
PROTEIN-ASSAY
.
48
7
KOPPLUNG
VON
IGG
AN
TRAEGERMATERIALIEN
.
48
7.1
KOVALENTE,
GERICHTETE
KOPPLUNG
.
48
7.2
KOVALENTE,
UNGERICHTETE
KOPPLUNG
.
49
7.2.1
IGG-KOPPLUNG
AN
AFFIPREP
HZ
HYDRAZID-GEL
.
49
7.2.2
IGG-KOPPLUNG
AN
CONTROLLED
PORE
CERAMICS
(CPC)
.
50
7.2.2.1
AKTIVIERUNG
VON
CPC
.
50
7.2.2.2
KOPPLUNG
UNSPEZIFISCHER
ANTIKOERPER
AN
CPC
.
50
7.2.2.3
KOPPLUNG
DER
2,
4-D-ANTIKOERPER
AN
CPC
.
51
7.2.3
IGG-KOPPLUNG
AN
CONTROLLED
PORE
GLASS
(CPG)
.
51
7.2.3.1
AKTIVIERUNG
VON
(CPG)
.
51
7.2.3.2
KOPPLUNG
UNSPEZIFISCHER
ANTIKOERPER
AN
CPG
.
51
IV.
E
RGEBNISSE
UND
D
ISKUSSION
.
53
1
ELISA
FUER
2,4-D
MIT
ANTISERUM
7/89
.
53
1.1
HERSTELLUNG
DES
ANTISERUMS
.
53
1.2
HERSTELLUNG
DER
TRACER
.
53
1.3
AUSWAHL
DER
TRACER
.
55
1.4
UEBERSICHT
UEBER
BLUTUNGEN
.
58
1.5
ISOLIERUNG
DER
IGG
AUS
DEM
POLYKLONALEN
ROHSERUM
.
61
1.5.1
AFFINITAETSCHROMATOGRAPHISCHE
IGG-REINIGUNG
.
62
1.6
BESTIMMUNG
DER
AFFINITAETSKONSTANTEN
DES
ANTISERUMS
7/89
.
64
1.7
EINFLUSS
DER
TRACERINKUBATIONSZEIT
.
66
1.8
OPTIMIERTER
ELISA
FUER
2,4-D
MIT
DEM
IGG-KONZENTRAT
7/89
.
67
1.9
REPRODUZIERBARKEIT
.
69
1.9.1
INTRA-VARIATIONSKOEFFIZIENT
.
70
1.9.2
INTER-VARIATIONSKOEFFIZIENT
.
71
1.10
TEMPERATURABHAENGIGKEIT
.
74
1.11
ERMITTLUNG
DER
KREUZREAKTIVITAETEN
.
76
1.12
EINFLUSS
VON
LOESUNGSMITTELN
.
79
1.13
EINFLUSS
VON
HUMINSTOFFEN
.
82
1.14
BESTIMMUNG
VON
REALPROBEN
.
83
1.14.1
DER
VARIABLE
MODELLAQUIFER
.
83
1.14.1.1
UNTERSUCHUNGSMATERIAL:
QUARTAERER
KARBONATSCHOTTER
.
85
1.14.1.2
UNTERSUCHUNGSMATERIAL.-TERTIAERER
SAND
.
88
1.14.1.3
ZUSAMMENFASSUNG
.
90
1.14.2
UNTERSUCHUNG
VON
LUFTPROBEN
.
91
2
ELISA
FUER
2,4-D
MIT
ANTISENUN
16/88
.
95
2.1
OPTIMIERTER
ELISA
MIT
ANTISERUM
16/88
.
95
2.2
KREUZREAKTIVITAET
.
96
2.3
EINFLUSS
VON
TENSIDEN
.
97
2.4
EINFLUSS
VON
LOESUNGSMITTELN
.
98
2.5
EINFLUSS
VON
HUMINSTOFFEN
.
99
2.6
UNTERSUCHUNG
VON
REALPROBEN
.
99
2.7
INDIREKTER
ELISA
.
102
3
ELISA
FUER
2,4-D
MIT
DEN
ANTISEREN
5/89
UND
45/89
.
103
4
IMMUNOAFFINITAETSCHROMATOGRAPHIE
.
105
4.1
MODIFIZIERTES
PRAEZIPITATIONSVERFAHREN
.
105
4.2
GERICHTETE
KOPPLUNG
DER
ANTIKOERPER
.
105
4.2.1
SAEULENKAPAZITAET
.
107
4.2.2
IMMUNADSORBER
MIT
1
ML
VOLUMEN
.
108
4.2.2.1
UNBELADENER
TRAEGER
.
108
4.2.2.2
BELADUNG
DES
TRAEGERS
MIT
UNSPEZIFISCHEN
IGG
.
109
4.2.2.3
BELADUNG
DES
TRAEGERS
MIT
2,
4-D-ANTIKOERPEM
.
110
4.2.2.4
ELUTION
DES
ANALYTEN
.
113
4.2.2.4.1
ELUTION
MIT
NIEDRIGEM
PH-WERT
.
113
4.2.2.4.2
ELUTION
MIT
80
%
DMSO
.
114
4.2.3
IMMUNADSORBER
MIT
200
/IL
VOLUMEN
.
117
4.2.3.1
WEITERE
ELUTIONSMITTEL
.
117
4.2.3.2
REPRODUZIERBARKEIT
DER
ELUTION
MIT
40
%
ACETONITRIL
.
118
4.2.3.3
CHARAKTERISIERUNG
DER
200-/D-IAC-SAEULE
.
119
4.2.3.3.1
BESTIMMUNG
DER
BINDUNGSKAPAZITAET
.
119
4.2.3.3.2
BELADUNG
MIT
NIEDRIGER
2,4-D-KONZENTRATION
.
121
4.2.3.3.3
EINFLUSS
VON
HUMINSTOFFEN
AUF
DEN
IMMUNADSORBER
.
122
4.2.3.3.4
ANREICHERUNG
VON
REALPROBEN
.
126
4.2.3.3.4.1
"WANNENVERSUCH"
.
126
4.2.3.3.4.2
AUFGESTOCKTE
REALPROBEN
ZWEIER
OBERFLAECHENGEWAESSER
.
128
4.2.4
ZUSAMMENFASSUNG
.
131
4.3
UNGERICHTETE
KOPPLUNG
DER
ANTIKOERPER
.
131
4.3.1
AFFIPREP
HZ
HYDRAZID-GEL
.
132
4.3.2
CONTROLLED
PORE
CERAMICS
(CPC)
.
134
4.3.2.1
UNBELADENER
TRAEGER
.
134
4.3.2.2
BELADUNG
DES
TRAEGERS
MIT
UNSPEZIFLSCHEN
IGG
.
135
4.3.2.3
BELADUNG
DES
TRAEGERS
MIT
2
,4-D-ANTIKOERPERN
.
136
4.3.3
CONTROLLED
PORE
GLASS
(CPG)
.
139
4.3.4
ZUSAMMENFASSUNG
.
139
V.
Z
USAMMENFASSUNG
.
141
VI.
A
BKUERZUNGEN
.
145
VN.
L
ITERATUR
.
147 |
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| spelling | Matuszczyk, Georg Verfasser aut Entwicklung von Enzymimmunoassays (ELISA) und Immunadsorbern zur Bestimmung des Herbizids 2,4-Dichlorphenoxyessigsäure (2,4-D) mit polyklonalen Antiseren Georg Matuszczyk 1995 VI, 181 S. Ill., graph. Darst. txt rdacontent n rdamedia nc rdacarrier München, Techn. Univ., Diss., 1996 Nachweis (DE-588)4115334-0 gnd rswk-swf D 2,4- (DE-588)4229553-1 gnd rswk-swf Enzyme-linked immunosorbent assay (DE-588)4152476-7 gnd rswk-swf (DE-588)4113937-9 Hochschulschrift gnd-content D 2,4- (DE-588)4229553-1 s Nachweis (DE-588)4115334-0 s Enzyme-linked immunosorbent assay (DE-588)4152476-7 s DE-604 DNB Datenaustausch application/pdf http://bvbr.bib-bvb.de:8991/F?func=service&doc_library=BVB01&local_base=BVB01&doc_number=007192787&sequence=000001&line_number=0001&func_code=DB_RECORDS&service_type=MEDIA Inhaltsverzeichnis |
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