Das Muskelhomogenat als Modell zur Beschreibung der Pyruvat-Dehydrogenase-Aktivität unter pathologischen Bedingungen:
Gespeichert in:
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1995
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INHALTSVERZEICHNIS
1.
EINLEITUNG
.
11
1.
1
.
DIE
BEDEUTUNG
DER
PYRUVAT-DEHYDROGENASE
IM
STOFFWECHSEL
.
11
1.2.
DIE
FUNKTION
UND
REGULATION
DER
PDH
.12
ABB.
1.1.
DARSTELLUNG
DER
VON
DEN
UNTEREINHEITEN
KATALYSIERTEN
REAKTIONSSCHRITTE
.
13
1.3.
STOFIWECHSELLAGE
UND
PDH-AKTIVITAET
UNTER
DEN
BEDINGUNGEN
EINER
SEPSIS
.17
1.4.
GRUENDE
FUER
DIE
UNTERSUCHUNG
DER
PDH-AKTIVITAET
AN
MUSKELHOMOGENATEN
.
19
2.
MATERIALIEN
UND
METHODIK
.
21
2.1.
GERAETE
.
21
2.2.
CHEMIKALIEN,
RADIOAKTIVE
SUBSTANZEN
UND
MUSKELGEWEBE
.
21
2.3.
PRAEPARATION
UND
LAGERUNG
DES
MUSKELGEWEBES
.
22
2.4.
VERWENDETE
BASISLOESUNGEN
.
23
2.5.
HERSTELLEN
DES
MUSKELHOMOGENATS
.
24
2.6.
ALLGEMEINER
VERSUCHSAUFBAU
UND
VERSUCHSABLAUF
.
24
2.7.
AUSWERTUNG
DER
IM
SZINTILLATIONSZAEHLER
GEMESSENEN
WERTE
.
26
3.
DECARBOXYLIERUNG
DES
PYRUVATS
UNTER
STANDARDBEDINGUNGEN
.
27
ADENOSINDIPHOSPHAT,
ADP
.
27
L-CAMITIN
.
27
ABB.
3.1.
WIRKUNG
STEIGENDER
CAMITIN-KONZENTRATIONEN
AUF
DIE
PYRUVAT-DECARBOXYLIERUNG
.
28
COENZYM
A,
COA
.
28
ABB.
3.2.
WIRKUNG
STEIGENDER
COENZYM
A-KONZENTRATIONEN
AUF
DIE
PYRUVAT-DECARBOXYLIERUNG
.
29
ABB.
3.3.
SYNERGISMUS
VON
NAD
+
UND
COENZYM
A
IN
BEZUG
AUF
DIE
PYRUVAT-DECARBOXYLIERUNG
.
30
ETHYLENDIAMINTETRAESSIGSAEURE,
EDTA
.
30
KALIUMPHOSPHAT-PUFFER
.
30
LEUPEPTIN
.31
MAGNESIUMCHLORID,
MG
CLJ
.
31
NICOTINAMIDDINUCLEOTID,
NAD
+
.
32
ABB.
3.4.
WIRKUNG
STEIGENDER
NAD
+
-KONZENTRATIONEN
AUF
DIE
PYRUVAT-DECARBOXYLIERUNG
.
32
PYRUVAT
.33
ABB.
3.5.
WIRKUNG
STEIGENDER
PYRUVAT-KONZENTRATIONEN
AUF
DIE
PYRUVAT-DECARBOXYLIERUNG
.
33
ABB.
3.6.
DARSTELLUNG
DES
RELATIVEN
UMSATZES
AUS
ABB.
3.5
.
34
REAKTIONSDAUER
.
35
ABB.
3.7.
PYRUVAT-DECARBOXYLIERUNG
IN
ABHAENGIGKEIT
VON
DER
ZEIT
.
35
4.
BEZUG
DER
PYRUVAT-DEHYDROGENASE-REAKTION
ZU
ANDEREN
STOFFWECHSELWEGEN
.
37
4.1.
WECHSELWIRKUNGEN
MIT
DEM
CITRATZYKLUS
.
38
ABB.
4.1.1.
UEBERSICHT
UEBER
DIE
SUBSTRATE
UND
ENZYME
DES
CITRATZYKLUS
.38
ABB.
4.1.2.
WIRKUNG
STEIGENDER
MALAT-KONZENTRATIONEN
AUF
DIE
PYRUVAT-DECARBOXYLIERUNG
IN
GEGENWART
VON
0,1
MM
COA.
.
39
ABB.
4.1.3.
WIRKUNG
STEIGENDER
MALAT-KONZENTRATIONEN
AUF
DIE
PYRUVAT-DECARBOXYLIERUNG
IN
GEGENWART
VON
0,01
MM
COA
.
40
ABB.
4.1.4.
EFFEKT
DES
SUCDNATS
AUF
DIE
PYRUVAT-DECARBOXYLIERUNG
.
42
ABB.
4.1,5.
EFFEKT
DES
A-KETOGHITARATS
AUF
DIE
PYRUVAT-DECARBOXYLIERUNG
.
43
4.2.
WECHSELWIRKUNGEN
MIT
DER
ATMUNGSKETTE
.
44
ABB.
4.2.1.
-
4.2.4.
WIRKUNG
VON
ANTIMYCIN
A
AUF
DIE
PYRUVAT-DECARBOXYLIERUNG
.
45
ABB
4.2.5.
WIRKUNG
VON
ANTIMYCIN
A
AUF
DIE
PYRUVAT
DECARBOXYLIERUNG
IN
GEGENWART
STEIGENDER
NAD
+
-KONZENTRATIONEN
.
47
4.3.
WECHSELWIRKUNGEN
MIT
DER
LAKTAT-DEHYDROGENASE
.
48
ABB.
4.3.1.
EINFLUSS
VON
OXAMAT
AUF
DIE
PYRUVAT-DECARBOXYLIERUNG
.
48
5.
EINFLUSS
DER
PYRUVAT-DEHYDROGENASE-KINASE
AUF
DIE
PYRUVAT-DECARBOXYLIERUNG.
.49
5.1.
PYRUVAT-DECARBOXYLIERUNG
IN
GEGENWART
VON
DIE
AKTIVITAET
DER
PDH-KINASE
STIMULIERENDEN
SUBSTANZEN
.
50
ABB.
5.1.1.
EINFLUSS
VON
10
MM
ATP
BEI
EINER
PYRUVAT-KONZENTRATIONSREIHE
.
50
ABB.
5.1.2.
DARSTELLUNG
DES
RELATIVEN
UMSATZES
AUS
ABB.
5.1.1
.51
ABB.
5.1.3.
EINFLUSS
STEIGENDER
ATP-KONZENTRATIONEN
.
52
ABB.
S.1.4.
EINFLUSS
STEIGENDER
3-PHOSPHOGLYCERAT-KONZENTRATIONEN
.
54
ABB.
5.1.5.
PYRUVAT-UMSATZ
AUS
ABB.
5.1.4
UNTER
DER
ANNAHME,
DASS
50%
DES
3-PHOSPHO-GLYCERATS
ZU
PYRUVAT
REAGIEREN
.
55
ABB.
5.1.6.
EINFLUSS
STEIGENDER
PHOSPHO-KREATIN-KONZENTRATIONEN
BEI
0,01
MMCOA
.
56
ABB.
5.1.7
EINFLUSS
STEIGENDER
PHOSPHO-KREATIN-KONZENTRATIONEN
BEI
0,1
MMCOA
.
56
ABB.
5.1.8.
UND
5.1.9.
EINFLUSS
STEIGENDER
ADP-KONZENTRATIONEN
MIT
UND
OHNE
PHOSPHO-KREATIN
.57
5.2.
PYRUVAT-DECARBOXYLIERUNG
IN
GEGENWART
DER
DIE
AKTIVITAET
DER
PDH
KINASE
HEMMENDEN
SUBSTANZ
DICHLORESSIGSAEURE
(DCA)
.
60
ABB.
5.2.1.
UND
5.2.2.
EINFLUSS
STEIGENDER
DCA-KONZENTRATIONEN
.
61
ABB.
5.2.3.
EINFLUSS
VON
4
MM
DCA
BEI
STEIGENDEN
ATP-KONZENTRATIONEN
.
63
ABB.
5.2.4.
EINFLUSS
VON
4
MM
DCA
BEI
STEIGENDEN
PHOSPHO-KREATIN
KONZENTRATIONEN
UND
BEI
0,01
MM
COA
.
64
ABB.
5.2.5.
EINFLUSS
VON
4
MM
DCA
BEI
STEIGENDEN
PHOSPHO-KREATIN
KONZENTRATIONEN
UND
BEI
0,1
MM
COA
.
64
ABB.
5.2.6.
UND
5.2.7.
EINFLUSS
VON
4
MM
DCA
BEI
STEIGENDEN
PHOSPHO-KREATIN-KONZENTRATIONEN
NACH
45
UND
90
MINUTEN
.65
ABB.
5.2.8.
EINFLUSS
VON
4
MM
DCA
BEI
VERSCHIEDENEN
ADP
KONZENTRATIONEN
MIT
UND OHNE
P-KREATIN
.
66
6.
EINFLUSS
DER
PYRUVAT-DEHYDROGENASE-PHOSPHATASE
AUF
DIE
PYRUVAT-DECARBOXYLIERUNG
.
69
ABB.
6.1.
WIRKUNG
FREIER
KALZIUM-IONEN
(0,5
MM)
ZUSAMMEN
MIT
DCA
.
70
ABB.
6.2.
WIRKUNG
VON
9,75
MM
CACL
}
+
10
MM
EGTA
+
DCA
.71
ABB.
6.3.
WIRKUNG
VON
0,4
MM
CACL,
+
0,2
MM
EGTA
+
STEIGENDE
DCA-KONZENTRATIONEN
.
73
7.
VERSUCHSANORDNUNG
ZUR
MESSUNG
DER
PYRUVAT-DEHYDROGENASE-AKTIVITAET
IM
MUSKELHOMOGENAT
.
75
TABELLE
7.1.
ANWENDUNG
DES
TESTVERFAHRENS
AN
RATTENMUSKELN
.
76
TABELLE
7.2.
ANWENDUNG
DES
TESTVERFAHRENS
AN
PAVIANMUSKELN
.
77
8.
ZUSAMMENFASSUNG
DER
ERGEBNISSE
UND
VORSCHLAEGE
ZUR
ANWENDUNG
DES
MODELLS
.
85
8.1.
ZUSAMMENFASSUNG
DER
ERGEBNISSE
.
85
8.2.
VORSCHLAEGE
ZUR
ANWENDUNG
UND
ERWEITERUNG
DES
MODELLS
.
86
LITERATUR
.
93
DANK
.101
LEBENSLAUF
.
102
EHRENWOERTLICHE
ERKLAERUNG
.
105 |
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